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复方桔梗止咳片的薄层色谱鉴别 薄层色谱解决方案

时间:2020-06-04    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     

摘要:采用薄屠色谱法对复方桔梗止咳片中的桔梗、远志及甘草等进行了定性鉴别。该法可用

于对产品质量的控制。 关键词:复方桔梗止咳片;TLC;鉴别 复方桔梗止咳片是由桔梗、远志(蜜炙)、款冬花(蜜炙)和甘草等四味中药组成,具有镇咳、祛痰之功效,用于治疗伤风咳嗽、咽喉肿痛、急慢性气管炎等。现行质量标准中只有性状一项。为了控制产品质量.本文对桔梗、远志及甘草进行了薄层色谱鉴别研究。 1 仪器与试药 YH140电热恒温干燥箱(广州东方红医疗器械厂);硅胶G(青岛海洋化工厂);桔梗、远志、甘草对照药材、甘草次酸对照品(中国药品生物制品检定所);复方桔梗止咳片(我所抽验样品);阴性样品(按处方工艺制得缺味样品);所用化学试剂均为分析纯。 2 实验方法与结果 2.1 桔梗与甘草的鉴别 2.1.1 样品溶液的制备 取本品10粒.去糖衣.研碎,取细粉1.5g,加盐酸1ml与氯仿20m1.加热回流1h.放冷,分取氯仿层,滤过.蒸干.残渣加乙醇lml溶解,即得。 2.1.2 对照药材溶液的制备 分别取桔梗、甘草对照药材各0.1g,按样品溶液制备方法制成对照药材溶液。 2.1.3 甘草次酸对照品溶液的制备 取甘草次酸对照品加乙醇制成2mg/ml的溶液。 2.1.4 阴性对照溶液的制备 分别取桔梗、甘草外的处方其它药材,按处方工艺分别制备成缺桔梗、缺甘草的阴性样品,再按样品溶液制备方法制成阴性对照溶液: 2.1.5 薄层色谱鉴别结果吸取上述溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(30~60℃) 醋酸乙酯-冰醋酸(25:7:0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以8%香草醛乙醇溶液与硫酸溶液(7~10)的混合液(0.5:5),在105℃ 加热至斑点显色清晰。样品溶液色谱中,在与对照药材溶液、对照品溶液相应的位置上显相同颜色的斑点,阴性对照溶液则无。 2 2 远志的鉴别 2 2.1 样品溶液的制备取本品10片,去糖衣,研碎,取细粉1.5g,加乙醇20ml,加热回流20min,滤过,滤液浓缩至约10ml,放冷,加入3倍量的乙醚,放置使沉淀完全,倾去上清液,加10%盐酸溶液10ml,加热回流30min,放冷,滤过,沉淀物用甲醇5ml溶解,即得。 2.2.2 对照药材溶液的制备 取远志对照药材0.5g,按样品溶液制备方法制成对照药材溶液。 2.2.3 阴性对照溶液的制备 取远志外的处方其它药材,按处方工艺制备成阴性样品,再按样品溶液制备方法制成缺远志的阴性对照溶液。 2.2.4 薄层色谱鉴别结果吸取上述溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-丙酮-正己烷-醋酸(8:4:0.2:0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。样品溶液色谱中,在与对照药材溶液相应的位置上显相同的紫色斑点,阴性对照溶液则无。 3 讨论 为了加强薄层鉴别的专属性,曾考虑采用药材及其化学成分单体,但目前尚未找到桔梗、远志药材成分的单体,所以以药材作对照。本文建立的色谱条件,可在同一薄层板上鉴别桔梗和甘草,结果令人满意。参考文献1卫生部部颁标准中药成方制剂(第四册) l991:1212卫生部部颁标准中药成方制剂(第十四册).1997:140~141

 

  【仪器网 使用手册】薄层色谱法是指根据各成分对同一吸附剂的吸附能力不同,在流动相流动固定相的过程中,连续发生吸附、解吸、再吸附、再解吸,实现各成分的相互分离的吸附薄层色谱法分离法。 以下,根据网上的资料,整理在薄层色谱法的使用中可以做的步骤
 
  1.制定薄层板,将固定相和水用研钵向一个方向研磨混合,除去表面气泡后,放入涂布器,将涂布器顺畅地移动到玻璃板上进行涂布,取下涂布在薄层上的玻璃板,放置在水平台上在室温下干燥后,在规定的温度下干燥,放入干燥剂进行干燥 使用前检查均匀度。
 
  2.点样除另有规定外,点基线距底边规定距离,点直径和点间距与纸色谱法相同,点间距看点扩散情况,不影响检测 做样品的时候,注意不要损伤薄层表面。
 
  3.展开油缸时,事先用展开剂使之饱和。 在汽缸中加入足够量的展开剂,将与汽缸相同高度、宽度的滤纸贴在墙壁上,一端浸在展开剂中,密封汽缸顶部的盖子,使系统平衡,或按照本文的规定操作。将样品薄片放入展开缸的展开剂中,浸渍在展开剂中的深度从薄片的底边开始 (请勿将样品点浸入展开剂),密封盖板,展开至规定距离取出薄板晾干,按照各品种以下的规定进行检查。
 
  4.用薄层扫描仪扫描检测色谱斑点,或直接扫描色谱斑点到薄层上定量上可以利用薄层扫描法。薄层扫描的方法除另有规定外,还依据各种薄层扫描仪的结构特征和使用说明根据具体情况,选择吸收法或荧光法,以二波长或一波长进行扫描。 对薄层扫描的结果产生影响原因很多,在保证供试品的斑点在一定浓度范围内形成线形的基础上,与供试品对照品在同一薄层展开扫描,比较定量,减少误差。 有各种各样的供试品只有得到分离度和再现性好的薄层色谱,才能得到满意的结果。
 
  由于资料有限,因而上述内容并不全面,欢迎补充。
  【仪器网 使用手册】薄层色谱是一种较新的色谱法,兼具柱色谱和纸色谱的优点,能快速分离和定性分析少量物质。薄层色谱性能优异,操作也较简单。
 
  1.选择吸附剂
 
  吸附剂一般要求直径为10~40μm,需要根据被分离物质的性质选择,常用的吸附剂有以下几种。
 
  硅胶:微酸性极性固定相,适用于酸性、中性物质分离
 
  氧化铝:碱性极性固定相,适用于碱性、中性物质分离
 
  纤维素:含有羟基的极性固定相,适用于分类亲水性物质。
 
  聚酰胺:含有酰胺基极性固定相,适用于酚类、醇类化合物的分离。
 
  2.制备薄层板
 
  薄层板的质量将决定分离的效果,应该尽量均匀且厚薄一致。薄层板的制备主要有两种方法:
 
  ①将洁净干燥的玻璃板置于铺板器中间,在铺板槽中倒入糊状物,自左向右推,将糊状物均匀地涂在玻璃板上。
 
  ②将调成糊状物倒在玻璃板上,或用角匙舀到玻璃板上,再用玻璃棒或角匙铺平并用手捏住玻璃板一角,轻轻碰敲桌面,使薄层表面均匀并除去 糊状物中的气泡。
 
  制备完成后还需要将涂好的薄层板水平放置于室温下晾干,然后放在烘箱内加热活化。(硅胶板需在烘箱内慢慢升温至105-110度后保温30分钟;氧化铝板需在200-220度烘4小时)
 
  3.点样
 
  将待测样品溶在极性尽可能低的溶剂中配成1%的溶液。用一支平口的细毛细管蘸取少量样品溶液点在薄板上。
 
  4.展开
 
  薄层层析有多种展开方式,可分为上行、下行、双向展开等,这里介绍一下上行法和下行法。
 
  上行法:在缸中加入足够量的展开剂,将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中,密封缸盖,待展 开前沿离薄板上端1cm时,取出薄层板,并用铅笔轻轻画下溶剂前沿,晾干。
 
  下行法:在展开缸的盖子上装一个小 钩,将展开的纸片钩住,并通过一滤纸条将展 开剂和纸片连起来。待展开剂前沿离纸片下端 1cm时,取出纸片,并用铅笔轻轻画下溶剂前 沿,晾干。
 
  5.显色
 
  晾干薄板溶剂后对板上的组分进行定位。将显色剂以喷雾方式直接喷到薄层板上可显示不同颜色的斑点。此外对于无色样品,可采用带荧光剂的吸附剂做薄板,展开后在紫外光下显暗色斑点;对于在光学条件下不显色的物质,可将薄板置于含有少量碘晶体的密闭容器中,与碘作用呈棕色斑点。
 
  6.Rf值计算
 
  用尺测量原点到色斑中心的距离除以原点到溶剂前沿的距离。不同的物质往往有着不同的Rf值,根据这个就可以简单判断它们是否是同一物质,但Rf值相同之后,还要进行进一步判断才能确定他们是否为同一个物质。


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