例1．甾族化合物
分析样品：含孕酮等4种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，四元梯度
泵，色谱工作站
检测器：MarkⅡA型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为135℃，氮气
流速为1.2L/min。
色谱柱：HyperilC18，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇：水=70：30
流速：1.2mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在12min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为氢化可的松，峰2为强的松，峰3为睾酮，峰4为孕酮。
例2．皮质醇分析
样品：含皮质醇等5种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：荧光
检测器，流动池30μL
激发波长370nm，检测波长480nm，狭缝均为20nm
色谱柱：FinepakC18，10μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇：水=50：100（v/v）
流速：0.8mL/min
进样：20μL
结果：所有组分70min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为皮质醇保留时间15.8min，峰2为β-Methasone 保留时间20.0min，峰3为四氢皮质酮保留时间22.5min，峰4为四反皮质醇保留时间32.5min，峰5为四氢-11-脱氧皮质醇保留时间 65.8min。
例3．植物甾醇分析（生物制药）
样品：含β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇、菜籽甾醇和胆固醇的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：Alltech2000型ELSD蒸发光散射检测器
漂移管温度为70℃，氮气流速1.6L/min
色谱柱：SupecolDiscoueryC18，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇
流速：1mL/min
进样：10μL
结果：所有组分在19min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为菜籽甾醇保留时间13.70min，峰2为胆固醇保留时间 14.62min，峰3为豆甾醇保留时间15.45min，峰4为菜油甾醇保留时间15.97min，峰5为β-谷甾醇保留时间17.05min。
例4．胆固醇分析
样品：含胆固醇等6组分的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：ELSD美国AlltechMKⅢ蒸发激光散射检测器
漂移管温度为65℃，氮气流速为2.0L/min。
色谱柱：AllsphereSilica，3μm，柱长10cm，柱径4.6mm
流动相：A为离子对试剂，B为正己烷，C为水
梯度：时间0min7min15min
A58%52%52%
B40%40%40%
C2%8%8%
流速：1.25mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在13min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为胆固醇，峰2为棕榈酸，峰3为磷脂酰乙醇胺，峰4为磷脂酰丝氨酸，峰5为磷脂酰胆碱，峰6为神经鞘磷脂。
例5．磷脂分析（生物）
样品：含磷脂酰肌醇等4种物质混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，四元梯度泵，色谱工作站
检测器：500型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为120℃，氮气流速为2.7L/min。
色谱柱：RosilNH2，5μm，柱长15cm，柱径4.6mm
流动相：A为无水乙醇，B为0.2mol/L的草酸溶液
梯度：时间0min15min30min30.1min35.1min
A95%85%85%95%95%
B5%15%15%5%5%
流速：1.5mL/min
进样：10μL
结果：所有组分在35min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为磷脂酰乙醇胺，峰2为磷脂酰丝氨酸，峰3为磷脂酰胆碱，峰4 为磷脂酰肌醇。
例6．维生素分析（食品分析）
样品：含维生素A等5种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有工作站
检测器：500型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为70℃，氮气流速为2.0L/min
色谱柱：AdsorbosphereC18，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇：乙醇=97：3
流速：1mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在21min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为维生素A，峰2为维生素D2，峰3为维生素D3，峰4为维生素E，峰5为维生素K1。
例7．抗菌素分析（药物）
样品：含有红霉素等5种抗菌素的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器，Rheadyane77251进样阀，HP化学工作站
检测器：2000型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为95℃，氮气流速为2.0L/min
色谱柱：AlltimaTMC18，5μm，柱长15cm，柱径4.6mm
流动相：A为0.2%五氟丙酸，B为甲醇
梯度：时间0min5min
A/B55%/45%35%/65%
流速：1mL/min
进样：10μL
结果：所有组分在6min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为红霉素，峰2为链霉素，峰3为托布霉素，峰4为阿米卡星，峰5 为新霉素。
例8．无活菌素分析（生物制药）
样品：含无活菌素等5种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器，Rheadyane77251进样阀，HP化学工作站
检测器：2000型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为96℃，氮气流速为2.9L/min
色谱柱：AlltimaTMC18，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：THF：水=60：40
流速：1mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在20min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为无活菌素，峰2为单活菌素，峰3为二活菌素，峰4为三活菌素，峰5为四活菌素。
例9．多肽分析（生物）
样品：含G-Y等3种多肽物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：ELSD美国AlltechMKⅢ蒸发激光散射检测器
漂移管温度为110℃，氮气流速为2.19L/min
色谱柱：AlltimaTMC18，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：0.05%TFA水溶液：乙腈=65：35
流速：0.6mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在5min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为G-Y，峰2为G-L-Y，峰3为K-D。
例10．非离子型去垢剂分析（化学化工）
样品：3种非离子型去垢剂物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：2000型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为65℃，氮气流速为1.9L/min
色谱柱：AlltechEconosphereTMC18，5μm，柱长15cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇：水=90：10
流速：0.8mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在5min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为n-葵基-β-D-吡喃葡萄糖甙，峰2为n-十二烷基-β- D-吡喃葡萄糖甙，峰3为n-辛葵基-β-D-吡喃葡萄糖甙。
对液相色谱系统的故障作逻辑推理是快速纠正毛病的关键。某些一目了然的故障，如接头漏液紧紧螺丝就可以。有些故障一时难以捉摸，如峰拖尾的问题一时找不到原因。遵循有规则的模式解决问题十分重要，而不是胡乱地逐一检查每个部件。 1、粗看一遍。 第一，故障发生后要给系统做一次快速的检查。沿着流动相贮存器经系统到放空这条流路看一遍，有什么问题一般都能发现；泵的入口处有无气泡，接头漏无，压力是否比平常高？还有无其他的反常现象？第二，确证所设定的条件是否合适。检查流动相，流速，压力，柱子种类，检测器和记录器，调整这些方面对方法的适应性。这两步检查仅仅需要几分钟的时间，但能事半功倍。 2、系统有什么新变化？ 例如开机后进行过维修，更换零部件，加入新流动相，分析过特殊样品，改变方法，停过电等。如有其他操作者在实验室中可询问一下他们是否动过仪器，或随手按过什么按钮。最后认真归纳一下系统发生的每一个变化，这样一般能解决问题。 3、对照参考比条件。 系统出了问题在色谱图上都有反应，再做一次试验参考色谱图。如果参考色谱图是好的，是否样品出了问题；如果参考色谱图不好，那么系统有了故障。也有问题不在色谱图中反映出来，如压力变化。这时应弄清流动相及其流速是否对头，不必做试验参考色谱图。 4、逐步分析并解决问题。 如果上述尝试无效，可将系统做一次做一种变化，并同时记录下来。变化无效的一般无问题，有效的应做上记号，然后根据情况，做出调整整个或局部部件的决定。液相色谱系统故障之逻辑推理
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