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液相色谱流动相的贮存方法 液相色谱操作规程

时间:2020-06-20    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
【导读】液相色谱流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑剂,导致溶剂被污染。被污染



    液相色谱流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑剂,导致溶剂被污染。被污染的溶剂如用于液相色谱系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成的变化,同时防止空气中的氧和二氧化碳溶入流动相中。
    磷酸盐、乙酸盐缓冲液极易长霉,应尽量新鲜配制使用。如需贮存,可至于冰箱内冷藏,并且一般不要超过3天。
    卤代溶剂中可能含有微量的酸性杂质,能与液相色谱仪系统中的不锈钢反应。卤代溶剂与水的混合物比较容易分解,不能存放太久。卤代溶剂混合后,可能会反应生成一些对不锈钢有较大腐蚀性的化合物。因此,尽量不采用卤代溶剂的混合流动相,或者使用之前新鲜配制。
    此外,卤代溶剂与一些反应性有机溶剂(如乙腈)混合静置时,还可能产生结晶。
    贮液器是装预混合流动相或流动相组分的容器,构造相对简单,但用于不合适的贮液器也可能带来问题。贮液器被污染了可能阻塞烧结不锈钢过滤片,影响液相色谱仪泵性能,在色谱图种出现多余的峰或者产生噪声。
    贮液器的容积一般为1L,有的贮液器仅能用于冲氦气,而不能用于真空脱气,因为有破裂的危险。用于真空脱气的贮液器要加厚或者加外套。自备的贮液器要松松地盖上盖子,以挡灰尘。盖得太紧会形成部分真空,使泵停止运转。





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液相色谱填料的粒度选择

  现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,首先必须对此有一定的认识和了解。

  液相色谱填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。液相色谱填料中的有机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大,在溶剂中不容易膨胀。

  液相色谱填料中有机聚合物基质主要有交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩,溶剂或溶质容易渗入有机基质中,导致填料颗粒膨胀,结果减少传质,最终使柱效降低。

  液相色谱填料的粒度选择

  液相色谱填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,填充柱的柱效越高;然而粒度越小,柱压越大,柱压的增加限制了粒度小于3μm的填料应用。在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是唯一的因素。如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选用更小粒度的填料是很有用的。3μm填料填充柱的柱效比相同条件下的5μm填料的柱效提高近30%;然而,3μm的色谱柱的背压却是5μm的2倍。与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选用更短的色谱柱,以缩短分析时间。另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色谱柱的压力。

标签: 液相色谱
液相色谱 液相色谱填料的粒度选择_液相色谱 【导读】液相色谱仪是一种常见的色谱分析方法,与气相色谱相比液相色谱可以在常温中操作,且不受样品挥发度和热稳定性的限制。 这使得液相色谱非常适合相对分子量较大,



    液相色谱仪是一种常见的色谱分析方法,与气相色谱相比液相色谱可以在常温中操作,且不受样品挥发度和热稳定性的限制。


    这使得液相色谱非常适合相对分子量较大,难汽化;


    不易挥发或对热敏感的物质、离子型化合物和高聚物的分离分析。


    然而要选购一台品质优良的液相色谱并不容易。


    液相色谱仪的指标很多,有关于泵的、关于检测器的、关于色谱柱的……不过,从选购角度考虑;


    可以优先考虑噪音、漂移、最小检测浓度、定性定量重复性等主要技术指标。


    当然,这些指标都要放在系统、回路里去看去比较。


    1.噪音


    噪音指由仪器的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动产生的声音。


    噪音的大小直接关系到仪器的检测灵敏度,噪音越大检测的灵敏度就越低。


    对于检测低含量的样品就要求仪器的噪音越小越好,否则噪音过大将会导致基线不稳,甚至影响分析结果;


    2.最小检测浓度(最小检测限)


    最小检测浓度是反映仪器灵敏度的重要参数。


    根据公式CL=2×Nd×C/H(CL:最小检测浓度Nd:噪音C:样品浓度最小检测浓度H:样品峰高);


    最小检测浓度是和噪音成正比的,噪音越大,最小检测浓度就越大,灵敏度就越低。


    如果选购的仪器回避了这个指标,说明他们不愿在最小检测浓度的基础上去比较噪音;


    3.漂移


    漂移是指仪器稳定后一段时间内基线漂离原点的距离,通常用来衡量仪器稳定快慢。


    高品质的仪器能在较短的时间内达到稳定,从而在一定程度上提高分析效率;


    4.定性定量重复性


    主要是考核仪器稳定性的指标,这对于分析样品来说是非常重要的。


    好的仪器其稳定性应该是十分不错的,这就要求多次进样保留时间及含量的一致性,这样做出来的结果才能使人信服。


    虽然这些指标都属于检测器,但是就像前面所说的,条件是要放在整个回路和系统里去看去比较。


    例如:泵的脉动会直接影响噪音指标、泵的流量准确度指标,以及密封性不好也会影响相关指标。


    所以要系统地看指标才可以反应出仪器的一些真实水平。





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