由于GPC/SEC的分离机理是按照分子尺寸的大小进行分离的，不考虑溶质和载体之间的吸附效应，也不考虑溶质在流动相和固定相之间的分配效应，其淋出体积（自试样进柱到被淋洗出来所接收到的淋洗液总体积）仅由溶质分子尺寸和载体的孔洞尺寸决定，与分子量只是间接的关系。不同的高分子，虽然分子量相同，但分子体积并不一定相同。例如，线形PE和支化PE，虽然有相同的分子量，但分子尺寸后者比前者小。因此，在同一根柱子和相同的测试条件下，不同的高分子试样由于分子链形态不同，所得到的分子量—淋出体积校正曲线并不重合。为此，在测定某种聚合物的分子量分布时，都需要有这种聚合物的单分散（或窄分布）试样所求得的专用的校正曲线，而单分散（或窄分布）试样不容易得到，只有很少的高聚物能制得窄分布的标准试样，这给测试工作带来极大的不便。对此通常采用能够制得窄分布标准样的聚合物聚苯乙烯（PS，溶于各种有机溶剂）、聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA，溶于有机溶剂）、聚环氧乙烷（PEO，也叫聚氧化乙烯，溶于水）、聚乙二醇（PEG，溶于水）代替，因此用GPC采用实验数据后要对数据进行校正处理，才能得到尽可能真实的相对分子量。
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色谱柱是高效液相的心脏，在液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透性，延长柱子的使用寿命是非常重要。色谱柱压力过高、过低都属于柱压问题。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质，造成流体阻力加大所致。以下是专业技术人员总结的几个方面：
1、流动相的前处理：流动相或杨平中杂质堵塞色谱柱进口滤片，导致压力升高。这是由于流动相可能没有过滤，或过滤不彻底，使固体杂质滞留于滤板上所致。另一个方面也可能没有使用预保护柱所致。
2、样品的沉淀：当流动相与溶解样品的溶剂不一致时，样品进入色谱柱时，可能因溶解度降低而沉淀出来吸附于柱内，造成压力升高。
3、晶体的析出：使用含有缓冲液的流动相时，缓冲液中的无机盐可能会残留在体系之中，它们会因在新流动相中的溶解度降低而析出阻塞而压力升高。
4、细菌或霉菌孳生：流动相中、管路中或柱子进口处繁殖、生长霉菌堵塞滤板，导致压力升高。所以在使用磷酸盐缓冲液时一般要现配现用。
5、溶质吸附：一些溶质在色谱柱上有较强大的吸附力，洗脱时流动相也难以清除掉，累积的未洗脱溶质也会造成阻力增大从而造成压力升高。
6、流动相更换过度较快：当改变流动相体系时，不彻底的更换使不同性质、互不混溶的流动相存在于同一个体系之中，也会造成压力升高。
7、压力脉冲：运行过程中，有时会产生整个液相色谱仪系统内压力的突然升降。如泵压力变化，此所形成的压力脉冲会造成多孔填料的崩坏和柱床结构的微小变化，填料微屑的长期积累也可能会使柱床阻力增大，造成压力升高。
以上几种色谱仪柱压升高的原因，希望能给您一定的帮助。
我们不应该在仪器有故障反映时才想到应该对仪器进行维护，不仅要定期有目的地做，还要树立一个观念 ，维护与保养的一个重要作用就是保障保证一个良好的检测状态，确保得到准确的检测数据，影响分析仪器的可持续运行有因素主要有： 下一篇：恒温水浴的操作使用及注意事项
1.易损件清理更换不及时;
2.硬件使用不科学;
3.仪器本身选购及配置不当;
各种分析仪器从结构、功能、应用各方面差别极大，但是经常出的问题以及维护保养的方向还是有一定的共性。这种共性就是：“仪器本身各个固定部件很少出问题，只有使用者经常接触到的地方才容易出故障”。
下面分别就气相色谱仪的常见故障及常用维护：
在使用气相色谱仪时(以下主要以配有分流进样口和氢火焰检测器的气相色谱仪为例)，使用者经常做的对仪器结构有改变的行为莫过于换柱了，虽然换柱和扎针一样，都是气相色谱工作者的基本功，但是，至少有一半的问题与之相关。
问题1：漏气
进样垫漏气，接柱的固定螺丝漏气，尤其是使用填充柱而又采用硅石墨垫更会如此。如果用橡胶圈好些，但是不需用，需要定期更换。毛细柱由于采用石墨垫圈则漏气问题相对好些。
问题2：固定位置不准：
这是制约灵敏度的一个关键点。填充柱由于是刚性的，尺寸形状固定，在换装时，一般容易掌握。常出问题的是毛细柱，由于其本身柔性，在进样口和检测器内的长度完全由使用者个人掌握，如果把握不准，会成为制约实验效果的一个重要因素。不同公司仪器的装柱尺寸是不同的，在使用不同衬管时也有很大区别。有些仪器提供了专用的测量工具，有些则没有。
问题3：清理更换不及时：
这是硬件无故障而检测状态不好的主要原因，其具体表现就是污染，如，进样口衬管及玻璃棉污染，柱内污染，检测器污染，如果不及时更换或清洗，会造成基线不稳，灵敏度下降等现象。
对策：
定期清洗，定期更换，用检漏液测漏，是常用但不是zui好的处理方法。我觉得，zui好的方法是状态监控，时刻观察系统状态，发现问题马上判断问题再处理问题。同一台机，同一根柱，在同流量，同柱头压下，应该有基本一致的信号基线和差不多的稳定时间，仪器状态的不同问题会有各种不同的反映。
例 1 ： 装柱后，通上一定的流量，柱头压和平时不一样。如果柱头压明显比平时高，可能是柱头堵塞。如果低，可能是漏气或柱断裂，漏气可以在关闭柱箱风扇后应该能听到声音，柱断裂可以很容易看出来。
例 2： 流量正常，柱头压正常，但基线信号明显地低且稳定奇快。这种现象在使用毛细柱时常发生，原因多半就是喷嘴堵塞。确定是否这个原因的方法就是进空白溶剂，如果信号比平时低了很多，而且出峰时间又晚了一些，就基本就是这个原因，这时只能关机清洗。
例 3 ： 流量正常，柱头压正常，在三温(OVEN，INJ，DET)到达设定值后，但基线信号明显地偏高且不稳定。这种情况多是污染。污染又分：进样口污染，柱污染，检测器污染。确定是哪一种故障并不容易(有时还是交叉反应)，但是处理方法却一致：停机-清洗-升温烤。我建议每次清洗zui好把检测器和进样口都处理一下，毕竟最耗时间的是降温升温。
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