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液相色谱泵的使用和维护注意事项 液相色谱操作规程

时间:2020-06-21    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
【导读】为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性,必须按照下列注意事项进行操作:1、防止任何固体微粒进入泵体,因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸



    为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性,必须按照下列注意事项进行操作:

    1、防止任何固体微粒进入泵体,因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相可以在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2?m或0.45?m)等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒(或片)。输液泵的滤器应经常清洗或更换。

    2、泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完,否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环,最终产生漏液。

    3、输液泵的工作压力决不要超过规定的最高压力,否则会使高压密封环变形,产生漏液。

    Series1500恒流泵专为分析或小型制备色谱应用而设计。专利的双柱塞设计和低死体积的隔膜贮能式脉冲阻尼器的使用消除了泵的脉冲波动,可满足广泛的分析应用,具有无可比拟的性能。可稳定提供0.001到12.0mL/min的流速。





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安捷伦液相色谱仪的维修与保养

1、安捷伦液相色谱仪用不同批号的色谱柱后如何对分析方法进行测试并确认可用此柱?

首先,在色谱柱包装盒的外面找到它的批号。批号的字体比较小,通常在条形码的下面。批号通常以字母“B”开头,后面是 5 位阿拉伯数字。例如,下面示例中的色谱柱批号为 B99091。 如果找不到包装盒,则查看色谱柱标签上的序列号。要从序列号来确定批号,请安捷伦科技公司 HPLC 色谱柱的。他们会请公司生产部门来查询批号,同时确定其它哪些批号的色谱柱可用。 获得所需的批号或知道您的批号后,可使用以下步骤进行订购: 从安捷伦科技公司。使用特殊的部件号 899999-888, 该号码表示此订单是专用色谱柱。 说明要订购的色谱柱的类型、尺寸和填料粒度大小,包括通用部件号。指出您希望色谱柱是哪个批号,或者哪个批号的色谱柱不能用。示例说明: 部件号 899999-888 Eclipse XDB-C18 分析色谱柱,4.6mm x 250mm,(963967-902) 除了批号为 B99091 和 B99079 的专用色谱柱 用于方法确认目的的色谱柱

                              

2、安捷伦液相色谱仪-如何避免峰拖尾和峰分叉?

  与色谱柱相关的原因及处理方法 

  1 色谱柱污染; 处理方法:清洗或更换色谱柱

  2色谱柱填料有问题;处理方法:反冲色谱柱或更换柱头过滤片

  3 色谱柱中间出现间断;处理方法:更换色谱柱或填充空隙 

  4 保护柱失效;处理方法:更换保护柱 

  5 样品分布差;处理方法:改进色谱柱进口的设计 

  6 与色谱柱无关的原因:柱外体积大、样品过量、流动相组分(添加剂、pH值、缓冲液浓度)改变。

3、什么原因导致安捷伦液相色谱仪出现神秘峰”?

  与色谱柱相关的原因: 

  1 色谱柱污染; 处理方法:清洗或更换色谱柱 

  2 保护柱失效; 处理方法:更换保护柱 

  3 与色谱柱无关的原因:流动相溶不纯、样品里有其他成分、系统里有气泡、电路问题。

 

更多关于安捷伦液相色谱仪与色谱柱的产品相关信息,可访问我公司或致电销售工程师。

 

怎样选择色谱柱

现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。

1、正相色谱

正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。

由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯仿

(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。

2、反相色谱

反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
二、聚合物填料

聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要优点是在PH值为1~14均可使用。

相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。

现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。

三、其他无机填料

其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质,一般仅限于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强,石墨化碳可用于分离某些几何导构体,又由于流动相中不会被溶解,这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC,氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可在PH高达12的流动相中使用。但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强,应用范围受到一定的限制,所以未能广泛应用,新型氧化锆填料也可用于HPLC,商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱,应用PH范1~14,温度可达100℃。由于氧化锆填料几年才开始研究,加之面临的实验难度,其重要用途与优势尚在进行中。


怎样选择填料粒度

目前,商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3um、5um和10um填料,填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是唯一的因素。如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选择更小粒度的填料
是很有用的,3um填料填充柱的柱数比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%;然而,3um的色相谱的背压却是5um的2倍。与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选择更短的色谱柱,以缩短分析时间,另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色谱柱的压力。



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