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高效液相色谱在分析领域的展望 液相色谱操作规程

时间:2020-06-21    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
【导读】高效液相色谱法(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是70年代迅速发展起来的一种分离分析技术,是目前各种色谱模式中应用广泛的一个领域,据估计,

高效液相色谱法(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是70年代迅速发展起来的一种分离分析技术,是目前各种色谱模式中应用广泛的一个领域,据估计,世界上几百万种化合物中除20%宜用其相色谱分离分析外,其余80%的化合物,包括大分子化合物、热不稳定化合物以及有生物活性的化合物都可以用不同模式的HPLC进行分离分析。

 自80年代以来,HPLC以成为国际分析化学界发展较快的一个分支。随着高效液相色谱设备的不断更新换代,功能和分析手段的逐渐增加,高效液相色谱仪在生物化学、生物工程、医药研究、食品分析等各个领域中被广泛应用;是分析化学家、生物化学家等用以解决他们面临的各种实际分离分析课题必不可缺少的工具。高效液相具有简便、快速、分辨率高、检测限低、重复性好,定量精度高等特点的同时,还必将会在提高检测质量和速度上有更大的发展前景。

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分析高效液相色谱仪灵敏度不够时

  高效液相色谱仪是实验中常见的仪器之一,色谱柱的灵敏度是确保实验准确性的重要原因,那么当色谱柱的灵敏度不够时,我们该如何去解决呢?应该从以下几个方面去分析:

  1、样品量不足:解决办法为增加样品量

  2、样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子

  3、样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器

  4、检测器衰减太多:调整衰减即可。

  5、检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数

  6、检测器池窗污染:解决办法为清洗池窗。

  7、检测池中有气泡:解决办法为排气。

  8、记录仪测压范围不当:调整电压范围即可。

  9、流动相流量不合适:调整流速即可。

  10、检测器与记录仪超出校正曲线:解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。

标签: 高效液相色谱仪
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  液相色谱仪是一种利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。现代液相色谱仪一般由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。可以说每个部分的品质好坏都可能直接影响仪器的检测结果。
 
  一般来说,液相色谱仪使用后,应该对检测器进行清洗。常规清洗不必拆下流通池,可直接在流通池入口处(即检测器输入端),接上一个专用的注射器接头,依次用去离子水、酒精和3MHNO3冲洗流通池,后用去离子水反复冲洗数次。检测器出口用玻璃瓶盛接流出的废液。
 
  但如果检测器已长期使用或受到高浓度样品的污染,经上述方法还不能除去污垢,就得取下流通池,按以下步骤拆开进行清洗:
 
  1.卸下紫外检测器侧面遮盖流通池的盖板,松开固定流通池支架的螺钉,小心地取出流通池支架。
 
  2.拆下连接流通池输入、输出端的不锈钢导管(或PEEK导管),卸下流通池体。仔细拧下石英窗和透镜的护圈。小心取下垫圈、石英窗、透镜、护圈,放在一个盛有乙醇的烧杯内,用超声波清洗机处理5min~10min。
 
  3.用蒸馏水、乙醇冲洗流通池,并用超声波清洗,后用去离子水冲洗数次,除去池内杂物。
 
  4.烘干各部件(注意:避免用手直接接触透镜及石英窗)。
 
  5.重新装配流通池体。
 
  6.按原样装在流通池支架上,并接好导管,并进行试漏。(方法:池体输入端与恒流泵连接,开启恒流泵(流动相用蒸馏水),视各密封点及石英窗口是否有漏液溢出。
 
  7.装入紫外检测器机箱内,盖上盖板,并用原螺钉、螺帽固定。
 
  注:上述液相色谱仪检测器的保养拆洗应有经培训过的专业维修人员进行。
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