高效液相色谱法(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是70年代迅速发展起来的一种分离分析技术,是目前各种色谱模式中应用广泛的一个领域,据估计,世界上几百万种化合物中除20%宜用其相色谱分离分析外,其余80%的化合物,包括大分子化合物、热不稳定化合物以及有生物活性的化合物都可以用不同模式的HPLC进行分离分析。
自80年代以来,HPLC以成为国际分析化学界发展较快的一个分支。随着高效液相色谱设备的不断更新换代,功能和分析手段的逐渐增加,高效液相色谱仪在生物化学、生物工程、医药研究、食品分析等各个领域中被广泛应用;是分析化学家、生物化学家等用以解决他们面临的各种实际分离分析课题必不可缺少的工具。高效液相具有简便、快速、分辨率高、检测限低、重复性好,定量精度高等特点的同时,还必将会在提高检测质量和速度上有更大的发展前景。
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高效液相色谱仪是实验中常见的仪器之一,色谱柱的灵敏度是确保实验准确性的重要原因,那么当色谱柱的灵敏度不够时,我们该如何去解决呢?应该从以下几个方面去分析:
1、样品量不足:解决办法为增加样品量
2、样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子
3、样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器
4、检测器衰减太多:调整衰减即可。
5、检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数
6、检测器池窗污染:解决办法为清洗池窗。
7、检测池中有气泡:解决办法为排气。
8、记录仪测压范围不当:调整电压范围即可。
9、流动相流量不合适:调整流速即可。
10、检测器与记录仪超出校正曲线:解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。