在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单独一种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。
分离细菌的方法很多,常用的有以下几种。
将被检材料接种于适宜培养基,再于固体培养基表面生长的菌落中,选样欲分离菌的单个菌落,移种于另一适宜培养基中培养。因为一个菌落通常由一个细菌生长繁殖所形成,故培养出的细菌是单一的种类,即纯培养。
用特殊的培养环境(如厌氧、二氧化碳环境等)分离细菌。
将被检材料接种子易感动物体内,使病原菌在动物体内繁殖,然后从动物体内取材料利用离心机进行离心分离出需要的成分后培养。利用某些细菌对一些理化因素有特殊抵抗力,用理化方法处理接种材料,杀死其他微生物而保存需要的细菌,再分离培养。
一般情况下,被检材料用前两种方法分离培养即可。如披捡材料污染严重,可先用后两种方法处理,再用前两种方法获得纯培养。
在分离培养操作中,严格遵守无菌操作。所有用具、培养基、试剂都要经过灭菌,而且不能长时间暴露于空气中。禁止用手接触或用口吹已灭菌的器皿内部。
根据被检材料中可能存在的病原苗的特性,选择适当的培养基和培养条件:(温度、气体环境等)。进行未知菌的初次分离,可以多用几种培养基,如肉汤、鲜血琼脂、麦康克琼脂等,每种培养基接种数管,分别放在普通环境和厌氧环境中培养。一般经过24—78小时观察结果,但也有一些病原菌,需要培养校长时间才能生长。
被检材料一般不需要处理,直接按种于培养基上。当怀疑为有芽脑的病原苗时,可将被检材料加生理盐水磨碎,作成1:10乳剂(液体材料不必稀释),置60-80℃水浴中20—30分钟,以杀死无芽胞的杂菌,然后再接种于培养基中。
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一、离心机有电源、电机转速异常故障检修方式
轴承损坏或转动受阻,轴承内缺油或轴承内有污垢较多而引起摩擦阻力增大,电机达不到额定转速,应及时清洗或更换轴承。整流子表面有一层氧化物,甚至烧成凹凸不平或电刷与整流子外缘不吻合也可使转速下降,应清理整流子及电刷,使其接触良好。如转子线圈中短路或断路,可用万用表检查,重新绕制线圈。转子在使用时可因金属疲劳、超速、过应力、化学腐蚀、选择不当、使用中转头不平衡及温度失控等原因而导致离心管破裂,样品渗漏,转子损坏。对于以上情况主要要求操作者熟练掌握操作程序,正确选用合适的离心管和离心转子,注意严格控制每一步操作操序,尽量减少人为的不必要的损伤,在转子的安全系数及保证期内使用。
二、离心机有电源、但电机不能起动的故障现象排除方式
在使用过程中经常出现电机不能起动的现象,如主电源指示灯亮,这时应检查炭刷磨损程度,如炭刷磨损超过总量的三分之一,应及时更换新的炭刷。主电源指示灯不亮时,检查指示灯保险丝及室内配电板保险丝是否熔断,同时检查电源线是否接触良好,如保险丝断则应更换保险丝并保持电路畅通。还应检查真空泵表及油压指示值,如油压过高而主机也不能启动,必须检查各油路是否堵塞,特别是节流小孔是否畅通,如不畅通应清洗使之畅通。
三、冷冻离心机冷冻效果异常故障现象排除方式
电源不通是导致冷冻机启动及制冷效果差的原因之一,与电机不转的故障相同,应分别检查电源及保险丝。电压过低,安全装置故障也可使冷冻机不能启动,电压过低可能是电网电压低;配电板配线过多;电源线过长(理想长度为3米)等。电源线容量不够,不仅使电压降低,还会造成意外事故。当电源电压降到180—190VJ时,冷冻机不能启动,影响制冷效果。通风性能不好,如仪器安装在日光直射或通风不良处,散热器效果差,或散热器盖满灰尘,也中会影响制冷效果。离心管重量不平衡,放置不对称;转子孔内有异物,使负荷不平衡;转轴上端固定螺帽松动,转轴磨擦或弯曲;电机转子不在磁场中心会产生噪音;转子本身损伤等都可导致机体震动剧烈、响声异常。
台式低速常温离心机4-5N 一,产品概述 主要针对于生物化学科研,医疗检验,环保,质量检验检疫,食品药品制造企业等领域设计并制造实验仪器与部分生产用设备,以及相关器具与耗材产品。 二,产品特点: ◎微机控制、交流变频电机驱动,运行平稳,宁静。 ◎大液晶显示转速、离心率、温度与时间等参数,运行中可随时更改参数,无需停机。 ◎可分别设置离心力、RCF值,可相互换、可随时观察。 ◎设有短时离心专用点动键。 ◎10档加减速控制,9档自由停车时间可达540s以上,满足特殊分离品使用要求. ◎时间小于一分钟时以秒显示。 ◎采用电子门锁,全钢制内腔保护套。 ◎适用于放射免疫、生物化学、生物制药、血液制品的分离与提纯。 三,工作原理 离心机是利用离心力,分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械。离心机主要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开,或将乳浊液中两种密度不同,又互不相溶的液体分开(例如从牛奶中分离出奶油);它也可用于排除湿固体中的液体,例如用洗衣机甩干湿衣服;特殊的超速管式分离机还可分离不同密度的气体混合物;利用不同密度或粒度的固体颗粒在液体中沉降速度不同的特点,有的沉降离心机还可对固体颗粒按密度或粒度进行分级。 技术参数: 型号 4-5N 高转速 5500rpm 支持电源 AC 220±22V 50Hz 大相对离心力 5010×g 总功率 750W 大容量 4×750ml 整机噪声 < 65dB(A) 定时范围 1min~99min59sec 离心腔直径 420mm 温度设置范围 / 外形尺寸 (长×宽×高) 540×460×400(mm) 温度精度 / 外包装尺寸 (长×宽×高) 640×560×500(mm) 短加/ 减速时间 30s/30s 净重 50kg 转速精度 ±20r/min 毛重 55kg 可选配转子: 编号:角转子AR0650/F 容量:6×50ml/尖底 转速:5500rpm 离心力:5010×g 编号:水平转子SR6250 容量:6×250ml 转速:4000rpm 离心力:3500×g 编号:水平转子SR4250 容量:4×250ml 转速:4000rpm 离心力:3500×g 编号:水平转子SR2296 容量:2×2×96孔 转速:4000rpm 离心力:2300×g 编号:水平转子SR4750 容量:4×750ml 转速:4000rpm 离心力:3580×g 编号:SR4750/4296 容量:4×2×96孔 转速:4000rpm 离心力:3550×g 编号:水平转子SR4500 容量:4×500ml 转速:4000rpm 离心力:3580×g 编号:SR4500/4245 容量:4×24×5ml管架 转速:4000rpm 离心力:3580×g 编号:水平转子SR3215 容量:32×15ml 转速:4000rpm 离心力:2810×g 编号:SR3215/4100 容量:4×50/100ml 转速:5000rpm 离心力:4390×g 编号:SR3215/850 容量:8×50ml 转速:4000rpm 离心力:2810×g 编号:SR3215/725 容量:72×5ml 转速:4000rpm 离心力:2830×g
由于样品组分的密度和沉降系数不同,离心分离后的样品沉淀物会形成层状结构。只需要通过上清液倾出就可以实现离心过程。离心设备实验室离心机8000转每分钟。近些年出现的超速离心是超过万转/分钟,它们被广泛应用于生物化学、医学研究(医用离心机)、实验室研究(实验室离心机)、化验室研究(化验室离心机)、血液分离测试(血液离心机),可以从血浆中的分离出红细胞和白细胞。
离心机在高速旋转的过程中,由离心力所导致的运动使悬浮于液体中的固体物质形成沉淀,也就是悬浮体液中质量或体积较大的物体向转头半径大的方向移动,而质量或体积较小的部分沉积在转头半径较近的地方。在离心过程中,乳浊液或悬浮液样品被放置在一个厚壁离心管中,而离心管放置在离心机转子上。其特征在于通过转子带动离心管快速旋转产生的离心力的作用,样品中的密度较高的成分会加速向离心管的底部沉降。
离心管成对放置,且容量不超过一半左右。这可以防止形成不平衡和样品溢出。
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