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高效液相色谱法的应用 液相色谱操作规程

时间:2020-06-21    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
【导读】   高效液相色谱法的应用远远广于气相色谱法。它广泛用于合成化学、石油化学、生命科学、临床化学、药物研究、环境监测、食品检验及法学检验等领域。   一. 在食品分析中的应用   

  高效液相色谱法的应用远远广于气相色谱法。它广泛用于合成化学、石油化学、生命科学、临床化学、药物研究、环境监测、食品检验及法学检验等领域。

  一. 在食品分析中的应用

  1.食品营养成分分析:蛋白质、氨基酸、糖类、色素、维生素、香料、有机酸(邻苯二甲酸、柠檬酸、苹果酸等)、有机胺、矿物质等;

  2.食品添加剂分析:甜味剂、防腐剂、着色剂(合成色素如柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝等)、抗氧化剂等;

  食品污染物分析:霉菌毒素(黄曲霉毒素、黄杆菌毒素、大肠杆菌毒素等)、微量元素、多环芳烃等。

  二. 在环境分析中的应用

  多环芳烃(特别是稠环芳烃)、农药(如氨基甲酸脂类,反相色谱)残留等。

  三. 在生命科学中的应用

  HPLC技术目前已成为生物化学家和医学家在分子水平上研究生命科学、遗传工程、临床化学、分子生物学等必不可少的工具。其在生化领域的应用主要集中于两个方面:

  1. 低分子量物质,如氨基酸、有机酸、有机胺、类固醇、卟啉、糖类、维生素等的分离和测定。

  2. 高分子量物质,如多肽、核糖核酸、蛋白质和酶(各种胰岛素、激素、细胞色素、干扰素等)的纯化、分离和测定。

  过去对这些生物大分子的分离主要依赖于等速电泳、经典离子交换色谱等技术,但都有一定的局限性,远远不能满足生物化学研究的需要。因为在生化领域中经常要求从复杂的混合物基质,如培养基、发酵液、体液、组织中对感性趣的物质进行有效而又特异的分离,通常要求检测限达ng级或pg级,或pmol,fmol,并要求重复性好、快速、自动检测;制备分离、回收率高且不失活。在这些方面,HPLC具有明显的优势。

  四. 在医学检验中的应用

  体液中代谢物测定;药代动力学研究;临床药物监测:

  1. 合成药物:抗生素、抗忧郁药物(冬眠灵、氯丙咪嗪、安定、利眠宁、****等)、黄胺类药等。

  2. 天然药物生物碱(吲哚碱、颠茄碱、**碱、强心甙)等

  五.在无机分析中的应用

  阳、阴离子的分析等。



    液相色谱柱是实验室一种常用的色谱配件,也是液相色谱仪的必不可缺的一部分,那么,我们在做样品分析的时候,如果色谱柱出现柱子柱流失怎么办呢?下面为大家讲讲。
    首先明白液相色谱柱柱流失是不可避免的。柱流失程度与什么因素有关?
    1、柱流失程度与固定相种类和色谱柱规格有关,一般固定相的量越多,柱流失则相对较高。
    2、柱流失与柱温以及载气中氧气的浓度有关。高温下,固定相的分解会加快,因此,高温时的流失会比低温时高。氧气是许多固定相分解的催化剂,特别是在高温时段,强调载气的纯度和液相色谱柱安装的气密性,一方面就是出于氧气会加剧柱流失的考虑。
    3、此外,液相色谱柱随着使用次数和时间的增加,固定相的稳定性最终也会发生不可逆的变化,导致柱流失的增加。液相色谱柱柱流失严重情况多出现在进样的溶液类型,5MS的柱子是非极性的,当使用极性溶剂时,就会发生反应而导致大量柱流失,在做测试时一定要留意样品的性质。







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