X
你好,欢迎来到仪多多。请登录 免费注册
仪器交易网
0我的购物车 >
购物车中还没有商品,赶紧选购吧!

色谱柱的使用及维护 色谱柱操作规程

时间:2020-06-21    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
【导读】色谱柱的平衡和使用 反向色谱柱在经过出厂测试后是保存在甲醇(或乙睛)/水中的。请一定确保您所使用的流动相和甲醇(或乙睛)/水互溶。由于色谱柱在运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用

色谱柱的平衡和使用

反向色谱柱在经过出厂测试后是保存在甲醇(或乙睛)/水中的。请一定确保您所使用的流动相和甲醇(或乙睛)/水互溶。由于色谱柱在运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍的体积的甲醇或乙睛平衡色谱柱:如果您所使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用含水量很高(约95%)的流动相过渡,样品分析完后,冲洗柱子是亦然。过去传统的方法使用纯水冲洗,对于非极性柱,如C8或C18,由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链,造成柱效下降。另外,分析样品时,由于纯水在填料表面不能浸润形成水膜,出现样品不保留而分不开,重现性差,所以对一般的C18和C8,有机溶剂不能低于5%。硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水或甲醇或乙睛的流动相,请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡。

平衡过程中,将流速缓慢地提高用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂浓度如果较低,则需要较长的时间平衡)

色谱柱的再生

建议用来冲洗的溶剂体积

 

 色谱柱规格

柱体积 

溶剂体积 

 150*4.6

2.50ml 

50ml

 250*4.6

 5.0ml

100ml

 250*10

 20ml

400ml 

 

请根据下表选择您的再生方法:

极性固定相(如Si,NH2,Diol色谱填料)的再生:正庚烷-氯仿-乙酸乙酯-丙酮-乙醇-水

非极性固定相(如反向填料C18,C8等)的再生:水-乙睛-氯仿(或异丙醇)-乙睛-水

0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱

色谱柱的维护:

  1、使用保护柱

  2、大多数柱的PH稳定范围是2-7.5,尽可能在此范围内使用

  3、避免流动相组成及极性有剧烈变化

  4、流动相使用前必须经脱气和过滤处理

  5、如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,要在实验完毕将柱子冲洗干净

  6、压力升高时更换保护柱

 


仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。

相关热词:

等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。

  尺寸排阻色谱柱通过优化填料的粒径和细孔容积,实现了色谱柱性能的提升,和色谱柱操作压强的降低。特别是对单克隆抗体三聚体/二聚体/单体的分离性能有很大的提高,对单体/片段也有很好的分离效果。
  尺寸排阻色谱柱采用单分散、球形、表面键合了一层纳米厚度中性亲水性薄膜的3 ?m硅胶作为填料。3μm的粒径结合大的孔体积使其成为目前国际上分辨率优良的体积排阻柱。成都摩尔科学仪器有限公司独有的表面键合技术保证了填料表面键合的很大化,使其具有高的化学稳定性及小的非特异性吸附。尺寸排阻色谱柱体积排阻柱有100、150及300三种孔径选择,广泛的应用于生物分子及水溶性聚合物的分离与分析。
  尺寸排阻色谱柱的保存:日常使用中,Sepax SEC色谱柱建议保存在150mM磷酸盐缓冲液中(pH7.0)。如长期不用时,可将色谱柱保存至20%乙醇中,以防止菌体污染。(注:可根据具体使用条件选择保存方式,如实验条件为缓冲盐体系,建议保存在150mM磷酸盐缓冲液中,pH 7.0。若实验条件为有机溶剂体系,建议保存在20%乙醇中。)
  尺寸排阻色谱柱的清洗:多次使用后某些样品可能会吸附到入口筛板或填料上,当积累至一定程度时会出现压力升高并伴随峰型展宽的现象,此时需要清洗色谱柱。一般流程为:断开检测器,反接色谱柱,在低于50%较大推荐流速下用清洗液冲洗10-15倍柱体积。
  尺寸排阻色谱柱是7.8 mm ID X 30 cm通用尺寸的高性能SEC色谱柱。采用以亲水性乙烯基聚合物为基材的高亲水性填料充填,因此适合用于分析水溶性聚合物。对于分子量较小的肽、蛋白质聚合物、DNA片段和病毒的分析,TSKgel PL 色谱柱具有很好的分离效果。
  尺寸排阻色谱柱由亲水性球形聚甲基丙烯酸酯颗粒填充。尺寸排阻色谱柱的主要应用范围在于分析水溶性聚合物,如纤维素、丙烯酰胺、二醇、葡聚糖、聚乙烯醇和低聚糖等。化学修饰的尺寸排阻色谱柱提高了阳离子型聚合物的回收率。



    气相色谱柱除用于定量和定性分析外,还能测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数,是一种对混合气体中各组成分进行分析检测的仪器。广泛应用于石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面。

 


    高性能色谱柱特点:柱效高,价格高,通用性好,使用寿命长,pH范围宽,一般这类色谱柱可用于解决一些疑难杂症,并不是平时经常使用的色谱柱。


    低流失色谱柱:在色谱柱生产过程中我们采用自己特殊工艺合成的低流失固定相。色谱柱在出厂前都经过了严格的钝化、键合和老化处理,使色谱柱的流失降低到很低水平,完全能够满足痕量物质分析和MS检测的要求。


    色谱柱的安装


    1、请将液相色谱装置中的流动相完全置换后再连接色谱柱。并且完全排出流路内的空气。


    2、装置内的液体和所使用的流动相不能相溶的情况下,请使用双方都能相溶的液体做过渡。比如从水置换到氯仿的情况,就需要使用丙酮做过渡,才能完全置换。


    3、将盐溶液置换成有机溶剂的时候,需要通过纯水、丙酮的顺序来进行置换。相反,从有机溶剂转换成盐溶液的情况下,需要通过丙酮、纯水的顺序置换。


    4、不仅仅是泵,流动相流动的所有流路都必须进行置换。例如,注入样品的情况,软管内的液体也需要置换。另外,如果使用压力计等别的软管的情况,取下来的管子也必须由流动相洗净后才能继续使用。


    色谱柱的清洗:


    样品中的杂质吸附在色谱柱内,会造成色谱柱性能的劣化。这种情况下,需要对色谱柱进行清洗。色谱柱严重污染无法再生时,建议更换新的色谱柱。然而,即使可以再生也有可能性能不能完全恢复。再生后,一定要使用色谱柱出厂时的溶液进行保存。


    分离原理是基于不同物质在两相间具有不同的分配系数,Vm与Vs之比成为相比以β表示它反映各种色谱柱柱型及结构的重要特性。


    为了避免由于吸附杂质造成色谱柱性能降低,建议使用保护柱。在分析柱前连接保护柱,杂质会被保护柱吸附,预防分析柱的劣化。清洗保护柱的时候,一定要取下分析柱后再洗净,因为如果连接着分析柱就洗净保护柱,保护柱里面的杂质可能会转移到分析柱中。







上一篇:快速粘度分析仪在谷物品质分析中...

下一篇:恒温水浴的操作使用及注意事项

  • 手机多多
  • 官方微信订阅号
商品已成功加入购物车!