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紫外可见分光光度计使用说明 光度计是如何工作的

时间:2020-06-30    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
【导读】紫外可见分光光度计来自于美国,产品包含光源,单色器,吸收池,检测器和显 示器等,它是一款对物质进行定性,定量以及结构分析的仪器。这款仪器和人们常 用的



 

    紫外可见分光光度计来自于美国,产品包含光源,单色器,吸收池,检测器和显 示器等,它是一款对物质进行定性,定量以及结构分析的仪器。这款仪器和人们常 用的可见光光度计有有很大的区别,除了波长范围,使用光源都不一样等,价格也 是后者要要贵一些;平时的使用和注意事项不一样的,今天就先来学习一下紫外可见分光光度计使用方法:
    1.试验中所用的量瓶、移液管均应经检定校正、洗净后使用。
    2.使用的石英吸收池必须洁净。用于盛装样品、参比及空内溶液的吸收池,当装 入同一溶剂时,在规定波长测定吸收池的透光率,如透光率相差在0.3%以下者可配 对使用,否则必须加以校正。
    3.取吸收池时,手指拿毛玻璃面的两侧。装盛样品溶液以池休积的4/5为度,使用 挥发性溶液吋应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无残留溶剂。 为防止溶剂挥发后溶质残留在池子的透光面,可先用蘸有空白溶剂的擦镜纸擦拭, 然后再用干擦镜纸拭净。吸收池放入样品室时应注意每次放入方向相同。使用后用 洗液及水冲洗干净,晾干防尘保存,吸收池发现污染不易洗净时可用硫酸发烟硝酸(3 :1V/V)混合液稍加浸泡后,洗净备用。如用重铬酸钾清洁液清洗时,吸收池不贫在 清洁液中长时间浸泡,否则清洁液中的重铬酸钾结晶会损坏吸收池的光学表面,并 应充分甩水冲洗,以防重铬酸钾吸附于吸收池表面。
    4.测定前应先检查所用的溶剂在测定供试品所用的波长附近是否符合要求,可用 lcm石英吸收池盛溶剂以空气为空白(即参比光路中不放置任何物质)测定其吸收度 ,应符合规定。
    5.称量应按药典规定要求。配制测定溶液时稀释转移次数应尽可能少,转移稀释 时所取容积一般应不少于5cm。含量测定供试品应称取2份,如为对照品比较法,对 照品一般也应称取2份。吸收系数检查也应称取供试品2份,平行操作,每份结果对 平均值的偏差应在±0.5%以内。作鉴别或检查可取样品1份。
    6.供试品测定溶液的浓度,除各该品种项下已有注明者外,供试品溶液的吸收度 以在0.3~0.7之间为宜,吸收度读数在此范围误差较小,并应结合所用仪器吸收度线 性范围,配制合适的读数浓度。
    7.选用仪器的狭缝谱带宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度值 会偏低,狭缝宽度的选择应以减小狭缝宽度吋供试品的吸收度不挥增加为准,对于 紫外测定的部分品种,可以使用2nm缝宽,但对某些品种如青霉素钾及钠的吸收度 检查则需用lnm缝宽或更窄,否则其264nm的吸收度会偏低。
    8.测定时除另有规定者外,应在规定的吸收峰±2nm处,再测几点的吸收度,以核 对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸收度最大的波长作为测定波长,除另有规 定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的波长±lnm以内,否则应考虑试样的同一 性、纯度以及仪器波长的准确度
    9.除另有规定外,比色法所用的空内系指用同休积的溶剂代替对照品或供试品溶 液,然后依次加入等量的相应试剂,并用同样方法处理。
    10.当吸收度和浓度关系不呈线性关系时,应取数份梯度量的对照浓度,用溶剂补 充至同一休积,显色后测定各份溶液的吸收度,然后以吸收度与相应的浓度绘制标 准曲线,再根据供试品的吸收度在标准曲线上求出其含量。





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双光束紫外可见分光光度计广泛应用于食品、药品、电力、生物研究、教学科研、化学化工、质量监督、水质环保和商检等各大领域。
 
双光束紫外可见分光光度计的工作原理:
 
1.基本工作原理和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。
2.紫外可见光的范围内,对于一个特定的波长,吸收的程度正比于试样中该成分的浓度,因此测量光谱可以进行定性分析,而且根据吸收与已知浓度的标样的比较,还能进行定量分析。
 
双光束紫外可见分光光度计使用注意事项:
 
1.在开机前将样品室内的干燥剂取出,仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2.笔试PH计测定时,禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上,如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏,要尽可能及时清理干净。
3.比色皿内溶液以皿高的2/3~4/5为宜,不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁,池壁上液滴应用擦镜纸擦干,切勿用手捏透光面。测定紫外波长时,需选用石英比色皿。
4.实验结束后将比色皿中的溶液倒尽,然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净,倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内,盖上防尘罩,做好使用登记,得到管理老师认可方可离开。

紫外可见分光光度计故障问题解决方案

  1、紫外可见分光光度计噪音较大

  原因:光源灯泡使用时间超过寿命期

  处理方法:更换光源灯泡

  2、在使用过程中,出现数字显示不能归零,同时伴有图线记录基线位置偏高

  ①光电倍增等老化,性能降低

  ②信号处理板可能发生故障

  ③前置放大版出现故障,引起反馈量增大

  处理方法:

  ①开机通电,先做记录故障曲线,再与原始记录的标准曲线对照,找出异同点,并作一下定性定能分析。然后用一只同型号规格的新光电倍增管替换机上的光电管,再开机实验,结果记录出来的图线并没有什么变化,由此证明光电倍增管没有老化变质。

  ②进一步检查信号处理板,未发现信号处理板各元器件损坏,对影响灵敏度有关的电位器检测,结果测得数据正常,这说明信号处理板没有故障。

  3、自检时提示波长自检出错

  原因:

  自检过程中可能打开过仪器样品室的盖子

  处理方法:

  关上仪器样品室盖子,重新自检

  4、仪器自检时提示通讯错误

  原因:

  仪器与电脑之间的数据线没有连接好

  处理方法:

  连接好数据线,重新打开仪器和软件,重新自检

  5、测试过程中提示能量太低

  原因:

  ①光源灯泡使用时间超过寿命期

  ②样池中有不透光的东西挡住了光

  处理方法:

  更换光源灯泡;拿走挡光的物品

标签: 紫外可见分光光度计
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