移液器是实验室的必备常规设备,是每一位科研工作者,特别是生物、药物、化学等行业科研工作者每天都使用的工具,它的耐用性和精确度是大部分使用者最关心的,为了帮助大家选择适合的移液器、正确使用移液器、延长移液器使用寿命、确保移液精度,莱贝此文从介绍移液器最基础的知识开始,将会对移液器做一系列介绍。俗话说简单的也是重要的,此篇虽简短,对后面知识的理解具有“地基”的作用,希望大家耐心看完。
工作原理:移液器的工作原理非常简单——通过弹簧的伸缩力量使活塞上下活动,排出或吸取液体。
移液器的结构:一般包括控制按钮(不同厂家设计不同,通常也通过此按钮进行吸液体积调解)、吸头推卸按钮、体积显示窗、套筒、弹性吸嘴、吸头。
移液模式:随着移液操作的广泛应用,可移取液体范围不断扩大,对精度要求越来越高,目前主要有2种移液器技术,以满足不同液体精确移液的需求:
1. 内置活塞式移液模式——常规液体顾名思义,活塞位于移液器套筒内,液体与活塞之间有一段空气隔离,活塞与液体不接触。这是实验室常见的移液器,使用时需注意不要让样品污染活塞,否则会造成样品的交叉污染。优点很多,例如吸头一般通用等等;不足也不少,例如不适宜移取高粘稠度液体、挥发性较大的液体、易发生交叉污染、错误的使用习惯易造成移液器精度不准甚至移液器内部腐蚀等等。
2. 外置活塞式移液模式——粘稠度较大的液体顾名思义,活塞位于移液器套筒外,位于吸嘴内部,活塞与液体之间没有空气段,活塞为一次性的,对于粘稠度较大的液体,也能实现精确移液,由于无空气间隔,避免了样品于空气接触可能发生的气雾交叉污染,因此也非常适合是珍贵的试剂、生物样品的移取。
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移液器也叫移液枪是在一定量程范围内,将液体从原容器内移取到另一容器内的一种计量工具。被广泛用于生物、化学等领域。
工作原理
临床常用的微量移液器的设计依据是胡克定律:
即在一定限度内弹簧伸展的长力与弹力成正比,也就是移液器内的液体体积与移液器内的弹簧弹力成正比。
微量移液器加样的物理学原理有两种:使用空气垫加样和使用无空气垫的活塞正移动(positivedisplacement)加样。
这两种不同原理的微量移液器有其不同的特定应用范围。
使用方法
1.选择合适的移液器
移取标准溶液(如水、缓冲液、稀释的盐溶液和酸碱溶液)时多使用空气置换移液器,移取具有高挥发性、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm的液体或者在临床聚合酶链反应(PCR)测定中的加样时使用正向置换移液器。
如移取15ul的液体,zui好选择zui大量程为20ul的移液器,选择50ul及其以上量程的移液器都不够准确。
2.设定移液体积
调节移液器的移液体积控制旋钮进行移液量的设定。
调节移液量时,应视体积大小而旋转刻度至超过设定体积的刻度,再回调至设定体积,以保证移取的zui佳精确度。
3.装配吸头
使用单通道移液器时,将可调式移液器的嘴锥对准吸头管口,轻轻用力垂直下压使之装紧。
使用多通道移液器时,将移液器的第一排对准第一个管嘴,倾斜插入,前后稍微摇动拧紧。
4.移液
保证移液器、吸头和待移取液体处于同一温度;然后用待移取吸液体润洗吸头1-2次,尤其是黏稠的液体或密度与水不同的液体。
移取液体时,将吸头尖端垂直浸入液面以下2-3mm深度(严禁将吸头全部插入溶液中),缓慢均匀地松开操作杆,待吸头吸入溶液后静置2-3秒,并斜贴在容器壁上淌走吸头外壁多余的液体。
5. 移液器的放置
使用移液器完毕后,用大拇指按住吸头推杆向下压,安全退出吸头后将其容量调到标识的最大值,然后将移液器悬挂在专用的移液器架上;长期不用时应置于专用盒内。
移取方法
前进移液法
按下移液操作杆至第一停点位置,然后缓慢松开按钮回原点;
接着将移液操作杆按至第一停点位置排出液体,稍停片刻继续将移液操作杆按至二停点位置排出残余液体,最后缓慢松开移液操作杆。
反向移液法
先按下按钮至第二停点位置,慢慢松开移液操作杆回原点,排出液体时将移液操作杆按至第一停点位置排出设置好体积的液体,继续保持按住移液操作杆位于第一停
注意事项
在调节移液器的过程中,转动旋钮不可太快,也不能超出其最大或最小量程,否则易导致量不准确,并且易卡住内部机械装置而损坏移液器。
在装配吸头的过程中,用移液器反复强烈撞击吸头反而会拧不紧,长期如此操作,会导致移液器中零件松散,严重时会导致调节刻度的旋钮卡住。
当移液器吸头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流而腐蚀活塞弹簧。
对移液器进行高温消毒时,应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后在进行处理。