移液器常规的使用流程,只要是做过实验的都知道,一个完整的移液循环包括下面六个步骤:
移液循环6步骤
但为什么精准移液仍然是一个难题呢?接下来就要从每个步骤详细说说了,如何每一步做到标准操作,实现 0 误差!
1、吸头安装 - 旋转安装法
使用合适移液器量程的吸头,为保证良好的密封性,将移液器垂直插入吸头,左右旋转半圈,上紧即可,建议移液量在吸头的 35%-100%量程范围内。(多道移液器建议使用进口吸头)
吸头安装 - 旋转安装法
2、容量设定:粗调/细调
从大量程调节至小量程为正常调节方法,逆时针旋转刻度即可。
从小量程调节至大量程时,应先调至超过设定体积刻度,再回调至设定体积。
(不要将按钮旋出量程范围,否则会卡住机械装置,损坏移液器。)
3、润洗吸头
在安装了新的吸头或增大了容量值以后,液体吸取、排放两到三次,吸头内壁表面吸附达到饱和,确保移液工作的精度和准度;
4、吸液
不同量程移液器吸液时吸头浸液深度
0.1-2.5ul/0.5-10ul ≤ 1mm
2-20ul/10-100ul/20-200ul ≤ 2mm
100-1000ul ≤ 3mm
1000-5000ul/2-10ml ≤ 4mm
正向移液(密度低的溶液)
1. 按下按钮到停点;
2. 轻缓松开按钮到起始点完成吸液;
3. 轻按按钮至停点,排除液体;稍停片刻,继续按按钮,排空液体;
4. 松开按钮,回到原点。如果需要,更换吸头后继续移液。
反向移液(适用于粘稠液体或易挥发性液体)
1. 按下按钮至第二停点吸液,轻缓松开按钮到起始点完成吸液。吸取多于设定容量的液体;
2. 轻按按钮至第一停点,排除设定容量的液体;
3. 残留在吸头内的多余液体随吸头丢弃。
5、排液
吸头紧贴容器壁,先将排放按钮按至第一停点,稍微停顿,再按至第二停点,这样可保证吸头内无残留液体。如果仍然有残留,需要更换吸头。
6、卸去吸头
除去枪头后,将移液器调至最大量程。
在移液器操作的最后,还有几个 TIPS 务必要记得:
不要用大量程的移液器移取小体积的液体;
使用与移液器匹配的枪头;
吸液太快产生气泡,液体浸入移液器腐蚀内部;
所设量程不可超出移液器有效量程范围,损坏移液器;
吸有液体的移液器不可平放,吸头内的液体容易污染移液器内部;
移液器在每次实验后应将刻度调至最大,让弹簧回复原型以延长移液器的使用寿命;
使用时检查是否有漏液现象。吸取液体后悬空垂直放置几秒钟,看看液面是否下降。如果漏液,则检查吸头是否匹配和弹簧活塞是否正常;
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移液器是一种在一定容量范围内可随意调节的精密取液装置,产品具有性能稳定、使用灵活、可靠性高、维护简便等优点。下面就来具体介绍一下移液器的使用方法,希望可以帮助到大家。
移液器的使用方法
设定移液体积:从大量程调节至小量程为正常调节方法,逆时针旋转刻度即可;从小量程调节至大量程时,应先调至超过设定体积刻度,再回调至设定体积,这样可以保证移液器的精确度。
2.装配移液枪头:将移液枪垂直插入吸头,左右旋转半圈,上紧即可。
3.垂直吸液:吸头尖端浸入液面3mm以下,吸液前枪头先在液体中预润洗2~3次确保移液的精度和准度(因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差。)。
使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。
如果漏液,则检查吸液嘴是否匹配和弹簧活塞是否正常。
4.放液:如果量很小则应将吸头尖端靠在容器内壁。慢吸慢放,以防突然松开溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
移液器使用注意事项
1.浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
2.可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL蒸馏水20℃时重0.9982g。
3.移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的,长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。
4.移液器未装吸头时,切莫移液。
5.在设置量程时,不要将按钮旋出量程,否则会卡住机械装置,损坏了移液器。
6.移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如,浓酸、浓碱、有机物等)。
7.不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。
8.如长时间不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧;
9.定期清洁移液器外壁,可以用95%酒精或60%的异丙醇,再用蒸馏水擦拭,自然晾干;如果消毒可以用紫外照,或者用75%酒精擦拭;或使用可高压灭菌的移液器。
以上便是今天关于移液器正常的调节方法及注意事项指南的全部分享了,希望对大家今后使用本设备能有帮助。
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液体操作中常用的移液器,在使用过程中有些错误的操作会给操作本身带来误差,有时会造成机器的损坏等,这里捷配仪器仪表网小编简单整理如下:
第一,装吸头。在移液器使用频繁的实验室里,常常可以听到敲击吸头的声音此起彼伏,颇有为枯燥的实验室生活增添点音乐的味道。走进细看,原来是使用者怕吸头不能装紧,在吸头装到移液器上之后,在吸头盒里再敲击几次,希望通过这种冲击力来保证移液的密封性。
那这种操作错在哪里呢?
*在撞击的作用下,吸头可能会变形而影响移液精度;
*移液器套柄接触吸头的部分经过多次强力的摩擦,会逐渐变得粗糙而难以保证密封性,而为了达到良好的密封性就需要更大的撞击力,恶性循环就此开始;
*小量程的移液器的套柄都比较细,在不断撞击的摧残下,很有可能变成钓鱼钩;
*有时这种冲击力比移液器掉在地上承受的力还要大,移液器里的部分精密部件随时有不堪重负而罢工的可能。
第二,吸液角度。很多使用者为了在吸液过程中便于观察样品在吸头中的状况,会让移液器在吸液过程中保持45o倾角甚至更接近水平的角度。但这又错了。
*在移取接近或达到吸头容积的样品时,移液器大角度倾斜很容易让液体溜到移液器的套柄里面,从而污染甚至腐蚀移液器的活塞,同时也容易造成样品的交叉污染;
*移液器的大角度倾斜同时也会让吸头外壁与液体的接触面增大,这样吸头离开液面时外壁残留的液体也更多,很容易在排液时随吸头内的液体一起离开吸头,从而降低移液的精度,而这些残留的液体对于微小量程(如2ul和10ul)的移液器而言,其对精度的破坏很可能是致命的!
第三,吸液速度。在实验室里经常可以看到,使用者为了“提高效率”,在吸液时拇指迅速松开,这就使液体迅速冲到吸头里面。殊不知,这样就迫使液体在进入吸头后形成湍流的状态,从而对中小量程的移液器而言会产生肉眼不可见的汽雾进入移液器的内部,对大量程的移液器而言则会看到液体直接冲到移液器的内部。最终的结果就是污染甚至腐蚀移液器的活塞,容易造成样品的交叉污染,对精度也有影响。
第四,存放。相当多的用户在移液器使用完毕后会直接把移液器平放在实验台上,爱好整洁的则可能把移液器放在抽屉里。这样其实也不好!在移液操作过程中,难免会有液体进入移液器的内部,在平放的状态下,这些液体就会一直滞留在活塞等部件上,日积月累之后污染活塞甚至腐蚀活塞。
在以上罗列的问题中,经常会提到腐蚀活塞的情况。有人可能会说:我用的移液器的活塞是耐腐蚀的!但我还是不得不提醒两点:
*除了少数低端的移液器会用全塑料配件外,大多数移液器的活塞组件中都有金属部件;
*只要是污染了活塞,无论活塞是何种材质,都可能有移液器内部气密性降低以及样品交叉污染
需要自我保养的部位:活塞在清洁或拆卸后要用硅脂涂抹上一层;多道移液器的的O型环也需要经常涂抹硅脂,然后用软布轻拭,如果有损坏,要更换;移液器内部被液体污染,可自行部分拆卸清洗。
总之,各实验室有必要建立和完善移液器使用的SOP(标准操作规程),严格移液器操作的管理。
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