超微量紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器，是应用液体的表面张力特性,样品体积只需要1ul,在侦测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速,微量,高浓度,免石英管,免毛细管等耗材侦测吸收值的优点。无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域，还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理行业，紫外可见分光光度计都获得了日益广泛的应用。
超微量紫外分光光度计的特点：
1、检测只需1 微升的样本，节省消耗品费用;
2、直接使用加样器将待检测样本加在检测的表面上，无需使用比色皿和毛细管;
3、测试多样品的时候不需要不停的更换比色皿，减少工作量;
4、样本无需进行稀释，即可进行快速、简便的检测;
5、配套软件具有开放式数据库，可自行添加标样数据，自定义计算公式;
6、样品检测范围广，只要有标样，可对所有有紫外吸收的样品进行微量检测。
超微量紫外可见分光光度计注意事项：
1、该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2、使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，甲醛检测仪以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。超微量紫外分光光度计可提供200~850nm的全光谱侦测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度CCD array侦测器,侦测吸收值可高达300Abs(dsDNA浓度2~15000ng/ul),大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可侦测。
超微量紫外可见分光光度计工作原理：
超微量分光光度计进行浓度测定的原理是根据朗伯-比尔(Lamber-Beer)定律，A=K·C·L 式中，A为吸光度;K为吸(消)光系数;C为溶液的浓度;L为液层厚度。此公式说明：在入射光一定时，溶液的吸光度与溶液的浓度及液层厚度成正比。此式就是光的吸收定律的数学表达式，又叫朗伯-比尔定律。
核酸的定量是超微量分光光度计使用频率最大的功能。可以定量测定溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA以及RNA含量。这是由于核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键，具有紫外吸收的特性，最大的吸收波长在260nm，吸收波谷在230nm。
除了核酸浓度，分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度，如A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。
这种方法是在280nm波长，直接测试蛋白。蛋白质直接定量方法，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。紫外直接定量法相对于比色法来说，速度快，操作简单;但是容易受到平行物质的干扰，如DNA的干扰;另外敏感度低，要求蛋白的浓度较高。
蛋白质通常是多种蛋白质的化合物，比色法测定的基础是蛋白质构成成分：氨基酸(如酪氨酸，丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应，产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关，从而反应蛋白质浓度。
比色方法一般有BCA，Bradford，Lowry 等几种方法。与传统分光光度计相比，超微量分光光度计要求的样品体积小，不需要比色皿，比色杯清洗方便，只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可。除此之外，实验过程也更为简单，不需预热，可随时检测，检测结果显示吸光度值的同时，程序直接给出浓度值。超微量分光光度计与传统相比，体积更小，更方便使用。
下一篇：恒温水浴的操作使用及注意事项
449717568