使用的气相色谱仪特点不同,提高检测器灵敏度的有效手段不同。那么如何提高产品的灵敏度呢?
1、在不分流进样和直接进样时使用:
这种方法需要调节柱温箱,与前者不同的地方是溶剂和分析化合物必须同时在进样时在较冷的色谱柱上冷却凝结;
这些凝结的样品在色谱柱表面形成“样品泛滥带”(floodedzone);
当溶剂逐渐挥发时,样品泛滥带的面积就逐渐缩小,“样品泛滥带”分析物的浓度就渐渐增加。
等到溶剂完全挥发后,分析物就在很小的柱表面范围上凝结。
2、当不分流进样时,液体的样品挥发后,在较冷的色谱柱上冷却凝结:
载气的体积比液体大很多,所以,当样品冷凝结时,样品就浓缩在色谱柱的一个小范围内。
所以说不论哪种方法,分析物或是溶剂和分析物必须在柱子的小面积上凝结。
影响样品在色谱柱上凝结速度的因素有:
色谱柱的初始柱温,溶剂的挥发性,还有就是色谱柱固定相的比例。
色谱柱柱温的初始温度:
1.基本是最容易也是较快做到的方法,一般说来初始温度愈低的话,分析物凝结的愈好。
2.建议初始温度可以设在比较快出峰分析物的沸点低摄氏50度左右,温度保持的时间可以就是非分流的保持时间。
第二个重要的因素:
色谱柱“固定相比例”(phaseratio):
愈低的固定相比例,意味着越厚的膜厚,膜越厚样品和溶剂越容易溶解在固定相。要改变此因素,也只能试试不同的柱子。这是当改变初始温度不可能达到的时候使用的方法。
最后一个可以改变的因素就是样品本身:
大部分时候,样品本身没法改变,但是,可以使用不同的溶剂以增加其效果,例如,溶剂的沸点与初始温度的差别愈大愈好,例如,柱温初始温度是摄氏30度时,样品使用的溶剂是乙酸乙酯(沸点摄氏77.1度)会比使用二氯甲烷溶剂好(沸点摄氏39度)。
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色谱柱是高效液相的心脏,在液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透性,延长柱子的使用寿命是非常重要。色谱柱压力过高、过低都属于柱压问题。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质,造成流体阻力加大所致。以下是专业技术人员总结的几个方面:
1、流动相的前处理:流动相或杨平中杂质堵塞色谱柱进口滤片,导致压力升高。这是由于流动相可能没有过滤,或过滤不彻底,使固体杂质滞留于滤板上所致。另一个方面也可能没有使用预保护柱所致。
2、样品的沉淀:当流动相与溶解样品的溶剂不一致时,样品进入色谱柱时,可能因溶解度降低而沉淀出来吸附于柱内,造成压力升高。
3、晶体的析出:使用含有缓冲液的流动相时,缓冲液中的无机盐可能会残留在体系之中,它们会因在新流动相中的溶解度降低而析出阻塞而压力升高。
4、细菌或霉菌孳生:流动相中、管路中或柱子进口处繁殖、生长霉菌堵塞滤板,导致压力升高。所以在使用磷酸盐缓冲液时一般要现配现用。
5、溶质吸附:一些溶质在色谱柱上有较强大的吸附力,洗脱时流动相也难以清除掉,累积的未洗脱溶质也会造成阻力增大从而造成压力升高。
6、流动相更换过度较快:当改变流动相体系时,不彻底的更换使不同性质、互不混溶的流动相存在于同一个体系之中,也会造成压力升高。
7、压力脉冲:运行过程中,有时会产生整个液相色谱仪系统内压力的突然升降。如泵压力变化,此所形成的压力脉冲会造成多孔填料的崩坏和柱床结构的微小变化,填料微屑的长期积累也可能会使柱床阻力增大,造成压力升高。
以上几种色谱仪柱压升高的原因,希望能给您一定的帮助。
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