高效液相色谱仪安装调试说明 液相色谱如何操作

高效液相色谱仪是大型精密仪器，其安装调试过程相对严格，对操作人员和使用环境也有相应的要求。安装、调试及培训作为启动程序，对于仪器性能的充分发挥和仪器的使用寿命都有极大的源头影响。安装、调试及培训过程的顺利进行对双方都是十分有利的。为了使该过程顺利进行，特提供此文件。

一．  接受培训的人员具有电脑操作基础。

二．  接受培训的人员具有化验基本知识与技能

三．  在工程师到达之前，培训现场的准备工作一定要准备到位。

准备工作包括：

A.  合格的承重台、电源及插座。

(1)STI500系列液相色谱仪重量较轻，承重台必须能够承受50KG以上的重量，支撑点稳定牢固无震感，周围不应有磁场和强对流空气，尺寸在长1.5M宽80CM高80CM左右较为合适。

(2)仪器适用电源：交流电220V/50HZ，最大允差5%，电压一定要稳定，不得有大于2V以上的波动，本仪器的最大功率约500W，请注意电源线的负载能力。

(3)电源插座需要至少有7以上三芯插孔，分别配给泵、检测器、电脑主机、电脑显示器、超声波清洗机和真空过滤装置，另请考虑预留其它设备，如柱温箱等附属仪器的接插位置。所有电源及插座均应质量优良，且地线接触良好（建议单独设置地线，并检查零线和地线之间的电压小于5V）。电源电压不稳定时，请配备工业用电源稳压器，建议功率配置在2KW以上。由于电源电压、电源插座或地线不良引起的任何损失，本公司概不负责。

B．安装调试所需的设备及试剂应该准备齐全。

(1)液相色谱仪的安装调试必需以下设备：电脑、打印机、贵公司产品的前处理设备等。电脑建议选配台式机，电脑主机至少必配一个COM串口（九针梯形标准接口），打印机推荐使用针式或喷墨打印机，如一定要用激光打印机，那也应避免采购较新款，同时不建议采购惠普（HP）和兄弟（brother）牌。贵公司产品的前处理设备也请准备到位，并提前试机，以保证正常使用。

(2)调试用试剂一般指色谱级的甲醇或乙腈（500ml/瓶的两瓶）、重蒸馏水（如果没有，可购买红色标签的娃哈哈纯净水替代）。高效液相色谱仪调试用的标准品由工程师自行携带。

 四．  参考业内通行作法，我公司提供的安装、调试和培训的时间为两天。如果以上条件具备，我公司工程师能够在两天之内完成全过程。因此，敬请贵公司在以上条件具备之后，再向我公司工程师预约上门时间，如果工程师到达现场后，因以上条件未满足而造成该过程延误的，超出的天数按照500元/天计算，由此产生的费用在整个过程全部结束时应予付清。

 五．  有部分客户在安装、调试和培训的过程中，要求我公司工程师在现场对客户的产品进行含量检测（非本公司标准品），我公司工程师可根据实际情况自行当场决定，或与公司领导、销售经理共同商讨决定（业内通行做法是不提供此项服务的，如果提供也需收取一定费用），即使同意做样，总的时间也不能超出两天，超出的天数按500元/天计算（由于工程师或仪器等其它因素造成的延期，不得收取费用）。注：我公司免费提供售前来样检测。

    不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体，而不能输送空气。相比之下，另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样，整个色谱柱干涸的情况不太容易发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了，也不一定就不可救药了。可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被彻底浸润，恢复到正常状态。

    2. 使用PEEK(polyetheretherketone)管路和接头需要注意什么问题？

    如果经常需要改变流路或更换不同品牌的色谱柱，使用PEEK材料制成的管路和接头会非常方便。PEEK管路容易连接；PEEK接头不仅无需工具，手拧即可固定，而且容易调节锥箍之外的管路长度，方便与不同品牌或规格的色谱柱相连接。

    使用此类材料的管路需要注意的是：PEEK对卤代烷烃和四氢呋喃的兼容性不好。虽然未观察到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象，但PEEK遇到上述溶剂会变脆。另一个西药考虑的因素是压力限。不锈钢管可耐受6000psi的压力，但PEEK管只能耐受近4000psi(但多数HPLC应用系统压力不会超过3000psi)。

    使用PEEK接头时则无需担心接头耐溶剂性能，因为接头几乎或很少与溶剂直接接触。但手拧固定的PEEK接头压力限低于不锈钢管，因而压力太高时，可能会使接头在管路上滑动而产生死体积或漏液。

    3. 如何预防液相泵的故障:

    要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施:

    1)、用高质量试剂和HPLC级溶剂；

    2)、过滤流动相和溶剂；

    3)、脱气；

    4)、每天开始使用时放空排气，工作结束后从泵中洗去缓冲液；

    5)、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中；

    6)、定期更换垫圈；

    7)、需要时加润滑油；

    8)、查阅有关泵操作手册中的其它建议。

    处于良好操作状态的泵，应该能使色谱图上的基线平稳；保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。

    为了使故障发生后尽快排除，平时应常备密封、单向阀(入口与出口)、泵头装置、各式接头、保险丝等部件，以及更换工具。