X
你好,欢迎来到仪多多。请登录 免费注册
仪器交易网
0我的购物车 >
购物车中还没有商品,赶紧选购吧!

高效液相色谱在分析领域的展望 液相色谱常见问题解决方法

时间:2020-07-03    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
【导读】高效液相色谱法(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是70年代迅速发展起来的一种分离分析技术,是目前各种色谱模式中应用广泛的一个领域,据估计,

高效液相色谱法(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是70年代迅速发展起来的一种分离分析技术,是目前各种色谱模式中应用广泛的一个领域,据估计,世界上几百万种化合物中除20%宜用其相色谱分离分析外,其余80%的化合物,包括大分子化合物、热不稳定化合物以及有生物活性的化合物都可以用不同模式的HPLC进行分离分析。

 自80年代以来,HPLC以成为国际分析化学界发展较快的一个分支。随着高效液相色谱设备的不断更新换代,功能和分析手段的逐渐增加,高效液相色谱仪在生物化学、生物工程、医药研究、食品分析等各个领域中被广泛应用;是分析化学家、生物化学家等用以解决他们面临的各种实际分离分析课题必不可缺少的工具。高效液相具有简便、快速、分辨率高、检测限低、重复性好,定量精度高等特点的同时,还必将会在提高检测质量和速度上有更大的发展前景。

仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。

相关热词:

等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。

  液相色谱仪是一种常见的液相色谱仪,这种仪器具有“四高一广”的特点,既高压、高速、、高灵敏、应用范围广。作为常见的科研分析仪器,在确保检验的准确性的同时,液相色谱做到了色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,是科研人员进行研究的有利工具。
 
  当然作为一款精密仪器,液相色谱仪对于操作具有一定的要求,而在使用时,难免可能发生一定的问题,今天我们就来讲讲面对柱压问题,使用液相色谱仪应该注意的要点。
 
  对于液相色谱仪来说,柱压的稳定与色谱图峰的好坏、柱效、分离效果及保留时间等都有所关联。一般来说,柱压问题主要集中在压力过高、压力过低两方面。
 
  压力过高
 
  压力过高一般指液相色谱仪使用时压力突然升高的问题。
 
  原因1:流路中存在堵塞
 
  解决方法:进行分段检查。首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。处理方法用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。
 
  打开Purge阀,使流动相不经过柱子,如果压力没有明显下降,则是过滤白头堵塞。处理方法将过滤白头取出,用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100PSI以下,过滤白头正常。
 
  把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。处理方法:如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上,用流动相冲洗柱子。这时,如果柱压仍不下降,只有换柱子入口筛板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以尽量少用。问题无法解决可考虑更换色谱柱。
 
  原因2:流速设定不正确
 
  解决方法:重新设定正确流量。
 
  原因3:流动相配比不正确
 
  解决方法:不同配比的流动相其黏度系数不相同,较高黏度的流动相相应的系统压力也大,如果可能可更换黏度较小的溶剂或重新设定配比。
 
  原因4:系统压力零点漂移
 
  解决方法:调节压力传感器的零点。
 
  压力过低
 
  原因1:系统泄漏
 
  解决方法:寻找各个接口处,特别是色谱柱两端的接口,把泄漏的地方旋紧即可。拆下柱子加适当力拧紧或衬四氟薄膜。
 
  原因2:泵里进混入空气,此时表现的往往是压力不稳,忽高忽低,更严重一点会导致泵无法吸上液体
 
  解决方法:打开Purge阀,用3~5ml/min的流速冲洗,如果不行,则要用专用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。
 
  原因3:无流动相流出
 
  解决方法:检查储液瓶中有无流动相,沉子是否浸在流动相中,泵是否运行。
 
  原因4:参比阀未关闭
 
  解决方法:将流速降低后关闭参比阀。一般降至0.1~0.2mL/min后关闭参比阀。

日常维护和保养
贮液器:清洁是保持流动相贮液器正常使用的关键,要尽可能使用HPLC级的溶剂和试剂含有缓冲盐和非HPLC级的流动相一定要通过0.5μm的过滤器以除去其中的微粒物质。改变流动相时应防止交叉污染,陈旧的流动相和用久了的试剂瓶应定期废弃,防止生长微生物和组分改变。贮器内壁定期清洗,里面的附件要经常更换。

泵:泵的密封圈是最易磨损的部件,密封垫圈的损坏可引起系统的许多故障。有人建议3个月换一次垫圈。但也不能一概而论,要看垫圈的材料质量,使用压力大小、保养以及缓冲液的情况而定。采取下列措施可以延长垫圈的寿命:

1 每天要把泵中的缓冲液体洗干净,防止盐沉积,泵要浸在无缓冲液的溶液或有机溶剂中;

2 用HPLC级试剂;

3 用烧结不锈钢沉子。要注意防止因泵阻塞造成压力过高而损坏柱塞杆或烧坏电机。

进样器:停机后要用溶剂冲洗干净进样器内残留的样品和缓冲盐,防止无机盐沉积和样品微粒造成阀转子面磨损或阻塞,严禁用气相色谱那样的尖针头进样。

色谱柱:防止柱性能下降有以下几方面的措施:

1 溶剂的化学腐蚀不能太强;

2 避免微粒在柱头沉降;

3 泵上要装压力限制器,防止压力过高冲击大;

4 流动相PH>7时用大粒度同种填料作预柱;

5 柱头加烧结片不锈钢滤片,需要时加保护柱;

检测器:要保持检测器清洁,每天用后连同色谱柱柱一起冲洗。提倡不定期用强溶剂反向冲洗检测池(拆开柱)。用脱过气的流动相,防止空气泡卡在池内。检测器灯有一定的寿命,不用时不要打开灯。

操作极限:每台泵都有压力上限,系统达到预定值时会自动停泵,这样能保护柱和其他硬件。上限压力设在20MPa以下,泵垫圈和进样阀耐用,但压力上限设定过低会延长分析时间。根据检验设定压力上限在15~20MPa为宜。新柱的压力比较低,随着使用时间加长而压力上升,所以设定的压力上限也应变化。在梯度洗脱中应考虑因流动相的变化而引起的压力变化,避免上限压力过低造成中途停泵。带有微机的系统还需设定压力下限,一般在0.5~1MPa,在贮器中流动相被抽干或严重渗漏时会自动停泵。有时下限压力设在0也会自动停泵。



上一篇:电流互感器的使用是怎样的呢 互...

下一篇:2021全站仪快速架设技巧,详...

  • 手机多多
  • 官方微信订阅号
商品已成功加入购物车!