荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等很多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范200~800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。
荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点,可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。
荧光分光光度计使用说明:
开机时,请先开氙灯电源,再开主机电源。每次开机后请先确认一下一起两边排热风扇工作正常,以确保仪器正常工作,发现风扇有故障,应停机检查。
主机工作时顶部排热器温度很高,切勿触摸,以免受伤.氙灯点亮后需一定时间稳定,故进行精密测试应在30分钟以上。当氙灯未能触发,并连续发生“吱吱”高频声或“叭叭”打火声时,请立即关掉氙灯电源,稍后数秒重新触发。请尽量减少不必要的氙灯触发次数,避免氙灯在高压下反复触发。
封闭氙灯电源后,若要重新使用,请等待60秒以后重新触发。运行未知浓度的样品测试时,灵敏度设置请从低位向高围(0-7)逐步设置,当灵敏度较高时(>3),为了保护光电倍增管,请拥护勿将强光置进样品室内。当(仅当)操纵者错误操纵或其他干扰引起微机错误时,应该立即关断主机电源,重新启动,但无须关断氙灯电源。单色器内用螺丝紧固处不得松动,光学器件和仪器运行环境需保护清洁。清洁仪器外表时,请勿使用乙醇乙MI等有机溶剂,请勿在工作中清洁,不使用时请加防尘罩.比色皿保持清洁。
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紫外可见分光光度计的日常维护和对主要技术指标的简易测试方法,经常对仪器进行维护和测试,以保证仪器工作在较佳状态。
一、温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。
他们可以引起机械部件的锈蚀,使金属镜面的光洁度下降,引起仪器机械部分的误差或性能下降;造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀,产生光能不足、杂散光、噪声等,甚至仪器停止工作,从而影响仪器寿命。维护保养时应定期加以校正。应具备四季恒湿的仪器室,配置恒温设备,特别是地处南方地区的实验室。
二、环境中的尘埃和腐蚀性气体也会影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性,也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一。因此必须定期清洁,保障环境和仪器室内卫生条件,防尘等。
三、紫外可见分光光度计使用一定周期后,内部会积累一定量的尘埃,可以由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作,同时将各发热元件的散热器重新紧固,对光学盒的密封窗口进行清洁,必要时对光路进行校准,对机械部分进行清洁和必要的润滑,最后,恢复原状,再进行一些必要的检测、调校与记录。
紫外可见分光光度计注意事项和问题处理
1.开机前将样品室内的干燥剂取出,仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2.比色皿内溶液以皿高的2/3~4/5为宜,不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁,池壁上液滴应用擦镜纸擦干,切勿用手捏透光面。测定紫外波长时,需选用石英比色皿。
3.测定时,禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上,紫外可见分光光度计如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏,要尽可能及时清理干净。
4.实验结束后将比色皿中的溶液倒尽,然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净,倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内,盖上防尘罩,做好使用登记,得到管理老师认可方可离开。
紫外可见分光光度计问题处理:
1、如果仪器不能初始化,关机重启。
2、紫外可见分光光度计如果吸收值异常,依次检查:波长设置是否正确(重新调整波长,并重新调零)、测量时是否调零(如被误操作,重新调零)、比色皿是否用错(测定紫外波段时,要用石英比色皿)、样品准备是否有误(如有误,重新准备样品)
紫外可见分光光度计引用新型技术,其功能强大,采用单色器技术,波长范围190-1100nm,是各种涉及水和废水分析领域的通用仪器,应用范围包括市政和工业废水,饮用水,加工过程用水,地表水,冷却水和锅炉补给水等。 1、单光束UV:最传统的紫外,单光源发射单光束,全程密闭,通过光栅,照射样品,最后由光电倍增管监测器检测。 缺点:测完空白再测试样品,全波段分析时间较长(一般2min)。 2、比例双光束UV:单光源单光束,全程密闭,通过光栅,加入棱镜,把光分为两束,分别照射样品与空白,再合并光,进入光电倍增管检测器,通过差减法计算结果。 好处:空白样品同时检测。 缺点:灵敏度下降,全波段分析时间较长。 3、双光束UV:单光源单光束,全程密闭,通过棱镜分出两道光,分别通过一光栅,分别进入各自的光点倍增管检测器。 好处:加强灵敏度,同时测量空白与样品。 缺点:全波段分析时间较长。 4、全波段UV:单光源单光束,样品与空白暴露在空气中,照射样品,开始进入密闭箱,通过光栅,进入DAD检测器。 好处:空白只需要检测一次,如果你愿意一辈子检测这一次都可以。检测样品不密闭,外界光线对其无影响,使用方便且精确。分析任何波段或全波段不到1s。 缺点:贵(25W)。