紫外分光光度计就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
紫外可见分光光度计详细操作流程及校准方法:
一、紫外可见分光光度计光度测量
在模式选择屏幕中选择<1.Photometric光度>选项，将显示参数配置屏幕;
用GOTOWL键设定测量波长;
按F2键设定进样控制;
按START/STOP键时，测量开始，显示测量屏幕;
如需做空白校正，应在测量前先设置空白样品，然后，按AUTO-ZERO键，将测量值置为OABS(100%);
二、紫外可见分光光度计校正
开机预热10分钟足矣;
放入黑块和标样(没有的自己配)，关闭盖子;
校0;
把灯光对着黑块，把透光度调0;
把灯光对标样，将吸光度调到100%;
三、参比溶液介绍
参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。通常，用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时，基体中，虽不含被测物质，但含有别的物质，这时必须保证其不影响测试。经常碰到的是试剂空白中含有被测物质，此时必须经过纯化将其除去。否则将影响测定结果。
四、紫外可见分光光度计使用注意事项
1.开机前应先预热15分钟，然后开机自检;
2.湿度要控制在75%左右，温度在5～30度之间;
3.仪器要稳压电源，接地要好。并且避免阳光直接照射;
5.常见故障及处理方法：
光门不能完全关闭：修复光门部件，使其完全关闭;
透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮;
仪器严重受潮：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂;以上为紫外可见分光光度计的具体操作方法及使用注意事项，希望能给予您帮助。
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分光光度计是一种利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器，能够将成分复杂的光线分解成光谱线，在各种科学实验以及实地测量中发挥着重要的作用。
分光光度计检定(测试)主要项目对分析结果的影响
1)波长准确度
分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。由于仪器的制造和调整误差，单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度，对波长准确度要求允许宽些。但是，当吸收峰宽度较小，而且吸收峰两侧边缘比较陡直，此时波长准确度的影响就必须引起注意。
2)透射比(吸光度)准确度
很显然，透射比或吸光度的误差越大，测试结果的可信性越差，从而影响到测试数据的准确性。
3)杂散光
杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光，随着样品浓度的增加，杂散光的影响也随之增大，将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱，杂散光的影响更不能忽视。因此，杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。
使用与维护：
1)若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。
2)指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。
3)比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。
4)操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯，以免影响光效率。
5)WFZ800-DA、756型等分光光度计，由于其光电接收装置为光电倍增管，它本身的特点是放大倍数大，因而可以用于检测微弱光电信号，而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移，灵敏度下降。针对其上述特点，在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下，因此在预热时，应打开比色皿盖或使用挡光杆，避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。
6)放大器灵敏度换挡后，必须重新调零。
7)比色皿的配套性问题。比色皿必须配套使用，否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下;分别向被测的两只比色皿里注入同样的溶液，把仪器置于某一波长处，石英比色皿：220nm、700nm装蒸馏水，玻璃比色皿：700nm处装蒸馏水，将某一个池的透射比值调至100%，测量其他各池的透射比值，记录其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范围内则可以配套使用，若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。
故障及其排除方法
1)仪器不能调零。可能原因：
a)光门不能完全关闭。解决方法：修复光门部件，使其完全关闭。
b)透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮。
c)仪器严重受潮。解决方法：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂。
d)电路故障。解决方法：检修电路。
2)仪器不能调“100%”。可能原因：
a)光能量不够。解决方法：增加灵敏度倍率档位，或更换光源灯(尽管灯还亮)。
b)比色皿架未落位。解决方法：调整比色皿架使其落位。
c)光电转换部分老化。解决方法：更换部件。
d)电路故障。解决方法：调修电路。
3)测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因：
a)比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解决方法：用擦镜纸擦干净比色皿表面，然后将其安放在比色槽的左边，上面用定位夹定位。
b)电路故障(电压、光电接收、放大电路)，解决方法：送修。
4)数显不稳。可能原因：
a)预热时间不够。
解决方法：延长预热时间至30分钟左右(部分仪器由于老化等原因，长时间处于工作状态时，也会工作不稳)。
b)光电管内的干燥剂失效，使微电流放大器受潮。
解决方法：烘烤电路，并更换或烘烤干燥剂。
c)环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法：改善工作环境。
d)光电管、电路等其它原因。
操作?注意事项：
1)比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题：
有些使用者对这个问题不够重视，因操作不当造成偶然误差，严重影响分析结果。首先，应保证比色皿不倾斜放置。稍许倾斜，就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致，还可能使入射光不能全部通过样品池，导致测试比准确度不符合要求。其次，应保证每次测试时，比色皿架推拉到位。若不到位，将影响到测试值的重复性或准确度。最后,还应保证比色皿的清洁度,延长其使用寿命。
2)干燥剂的使用问题。干燥剂失效将导致：
a)数显不稳、无法调“0”点或“100%”点(电路或光电管受潮)。
b)反射镜发霉或沾污，影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因，分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。
3)仪器的工作环境
应避免阳光直射、避免强电场、避免与较大功率的电器设备共电、避开腐蚀性气体等。
现今，国内大部分的可见分光光度计，紫外可见分光光度计有所改良。随着行业的进步，技术改良，部分厂家对于灯源更换问题的重视程度也越来越高，灯源更换也越来越方便简捷。很多新机型甚至不需要拆下整机外壳，只要打开灯源不为的盖子就能更换灯源。
分光光度计使用过程中的注意事项：分光光度计使用过程中，在不使用紫外光的情况下可以关闭氘灯（国内很多机型现在都使用的进口氘灯，用的贺利氏的氘灯较多，一般使用寿命在2000小时，国产的氘灯一般寿命在1000小时左右），关闭氘灯的话可以降低氘灯的能量损耗
分光光度计更换过程中的注意事项：
1、 关闭电源
2、 拔除电源线
3、 打开盖子到灯源部位
4、 如果是分光光度计刚使用结束，要等10分钟后在进行更换灯源（灯源刚使用完，温度比较高，防止烫到手）
5、 放电，将电路残余电压释放掉（可以接两根线到地表完成放电操作）
老款机型钨灯的更换（主要讲国产的）：
1、*点很重要，就是带上手套，否则会污染钨灯，如果没有条件的话也要把手洗干净，防止手上的污迹污染钨灯
2、需要量取钨灯灯丝距离底座的立体位置（简单的说，距离分光光度计内三个面的位置），可以用游标卡尺量
3、部分钨灯是可以直接拔的，还有些钨灯需要用螺丝刀拆卸，也有需要通过扳手旋松的，简单讲述，就是拆下钨灯，在带手套的情况下可以直接接触灯源，未带手套的情况下，尽量避免接触灯源，拿的时候可以钨灯底座的两个触角
4、装钨灯，先把钨灯装上，起初不要把螺丝旋太紧，因为还需要调整位置
5、接下来，第二步做的工作就能用到了。根据第二步测量的位置调整钨灯，上下左右移动，直到把钨灯调整到预先测量的位置
说明
氘灯原本在可见区是没有能量的，但是却在656.1nm处出现一条氘灯的特定谱线，当氘灯的发射光束达到zui佳位置时，这条特殊的谱线峰值也会达到zui高，仪器正是利用这个峰值变化来监控氘灯是否调整到zui佳位置的。
6、略微紧固螺丝（切记不要太紧）接入电源，打开开关，看下光斑是否打在了狭缝上，如果未打在狭缝，可以通过紧固左右螺丝来微调光斑的位置
7、钨灯更换完毕
老款机型氘灯的更换（主要讲国产的）：
1、 跟更换钨灯一样，就是带上手套，否则会污染氘灯，如果没有条件的话也要把手洗干净，防止手上的污迹污染氘灯，手指避免接触光源中心发射空位置
2、 量取发射孔的立体位置
3、 松开氘灯底座三根引线
4、 旋松螺钉，收向上推氘灯底部
5、 根据之前量取角度拜访氘灯位置，将放射孔位置调整至之前量取位置
注意事项：
(1) 光源镜背部的螺钉A为灯光束垂直方向的调整螺钉，该螺钉调整时要兼顾两个灯的能量，但主要照顾氘灯的能量，因为氘灯的能量是钨灯的1/5。
(2) 虽然大多情况下仅仅更换一只光源灯，但调整时两只灯的情况均要兼顾检查。
(3)调整后要做仪器基线平坦度及噪声水平的测试，以检验调整的效果。
(4)不同的分光仪器的灯室构造可能有所不同，但调整思路基本是一通百通的，本文仅能起到抛砖引玉的作用。
6、 开启电源，点亮氘灯，调至度数zui高，旋紧螺钉即可
新款机型钨灯的更换不带灯座的步骤同上，带灯座的，直接安装，安装后只要调整螺丝松紧就能调节光斑，氘灯也是如此 。
光源灯更换后为何要调整？
分光光度计有一个技术指标，称为“基线噪声”，也就是“信噪比”，英文表示为S/N；简单地讲信噪比越大测量的结果精度越高。要想达到zui佳信噪比，光源的调 整就凸现重要了；关于这个调整的物理意义，用仪器术语解释：就是让光源灯发出的实际光束与光路理论光轴完全重合。用形象语言解释：就是让光源发出的光束的 zui强点完全照射到仪器单色器的入口狭缝的中央处。
由于安装光源灯的灯座一般是固定式的，加之每支灯的构造的微小差异，致使其发射出的光束在三维空 间中的位置也不尽相同；所以更换光源灯后，很难保证光束的zui强点照射到狭缝的中央处，这是客观存在。为此、*可以补偿这一缺憾的办法就是调整光源镜的反 射角度。但是对于许多使用者而言，往往不清楚这个调整步骤的重要性。一般来讲、含有氘灯和钨灯两种光源的仪器的光源镜均可以调整。
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