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凝胶色谱仪概念 色谱仪常见问题解决方法

时间:2020-07-05    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
【导读】  凝胶色谱属于液相色谱,它是按被分析混合物不同组分分子大小的不同进行分离的,多用于高聚物的分析。它以液体做流动相,以多孔固体做固定相,其中孔是有一定尺寸限制的,而且大小不一。   它的分离过程是

  凝胶色谱属于液相色谱,它是按被分析混合物不同组分分子大小的不同进行分离的,多用于高聚物的分析。它以液体做流动相,以多孔固体做固定相,其中孔是有一定尺寸限制的,而且大小不一。

  它的分离过程是在装有多孔固定相的色谱柱中进行的。当尺寸大小不同的分子通过色谱柱时,可占据的窨体积也不同
对流动相分子而言,填料孔的尺寸大得多,因些,流动相可以自由扩散出入;而大小不同的样品分子则要渗透到不同的孔中,较大的分子只能进入较大的孔中,较小的分子不仅能进入大孔、中孔,还能进入较小的孔。 医学教 育网收集整理

因此,较小分子在柱内流经的路程和时间比大分子长得多,这样,当不同尺寸的高聚物分子流经多孔色谱柱时,大分子先被淋出,而小分子后淋出,因而高聚物分子便按照尺寸大小分开了,用检测器对其分别进行测量就可以获得样品的组分信息。

凝胶色谱仪由溶剂贮存器、输液泵、进样器、色谱柱、检测记录系统以及一些附属电子仪器所组成。其中检测器又可以分为浓度检测器和分子量检测器。

总的来说,凝胶色谱技术非常广泛的应用于高聚物的分析,广泛应用于高分子材料、糖类、脂肪烃类的分离分析,尤其是聚合物生产及使用过程的监测。

生产工艺
选择什么样的工艺流程会直接影响产品的分子量及其分布。因此分析不同工艺流程的分子量分布为选择较佳的工艺提供依据。

聚合过程
在聚反应过程中不断取样,可以通过凝胶色谱监测来确定聚合条件对产物分子量分布的影响。

加工过程
聚合物在加工过程中由于受热氧及机械作用而降解。用凝胶色谱研究挤出成型过程中高分子的降解,实验简单快速,可以细致地观察不同挤出条件下试样柱条的中心和表面的分子量及其分布的差别,这在凝胶色谱出现以前是不可能做到的。

使用过程
聚合物材料在使用过程中由于光、热、氧的作用而逐渐老化,凝胶色谱不公可以检测老化过程分子量的变化而且还可能为老化机理的研究提供数据。

产品质量检验
一些高聚物的性能和其分子量分布有关,因而通过测量分子量分布,可以对产品的质量进行检验。

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    薄层色谱又叫薄板层析,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱;


    它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;


    另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大;


    因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。

 


    此外,薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。


    薄层色谱是在被洗涤干净的玻板(10×3cm左右)上均匀的涂一层吸附剂或支持剂;


    带干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上;


    凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm。


    待展开剂前沿离顶端约1cm附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色。


    薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。


    是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。


    一方面适用于小量样品(几到几十微克,甚至0.01μg)的分离;


    另一方面若在制作薄层板时,把吸附层加厚,将样品点成一条线,则可分离多达500mg的样品。


    因此又可用来精制样品。


    故此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物资。


    此外,在进行化学反应时,常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。







    高效毛细管电泳色谱仪对进样技术要求很高,进样时应注意以下事项:

    一、毛细管插入样品溶液后,应立即开始进样操作,完成后迅速移至缓冲液中开始电泳。否则会产生毛细作用和虹吸现象,引起误差并使谱带展宽。

    二、电极不要和毛细管接触,样品贮器和缓冲液贮器液面的高度应保持平衡。

    三、进样区带越小越好,否则会使柱效和分离度降低。故进样时间以短为宜。

    四、温度会影响进样量的恒定,因温度直接影响粘度。

    五、样品溶液中的溶剂必须与缓冲液互溶,前者的离子强度应低于后者。

    六、防止溶液和缓冲液的蒸发、损耗。








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