1、泵正常工作时,在流动相和流速不变的前提下柱压应该是稳定的,当然在换流动相时压力变化是正常的,正常情况下如果柱压升高基本上都是由色谱柱使用时间长引起的(只有更换色谱柱),如果正常情况下压力突然降低有可能是(1)接头处有漏液的地方,采取的方法是有滤纸检查,如有漏液的地方用扳手拧紧即可。如果没有漏液则可能是(2)白色的管子里面有气泡从而导致流动相进不到泵里面去,采取的方法是排气泡。排气时:先STOP停泵--打开排气阀--按PURGE(快冲)键--等气泡排完后先STOP停泵--拧紧排气阀,其先后步骤不要搞反了。
2、泵正常工作时zui高压力不要超过200KG,所以打开泵以后可以将泵的zui大压力调到200KG,这样如果压力超过上限则会自动报警停机,流速不用超过1ML/MIN,如果使用时压力超过200KG,建议将流速调低点以降低压力(在色谱柱正常的情况下),如果是因为色谱柱长时间使用造成压力升高则建议更换色谱柱(因为色谱柱属于耗材长时间使用就需要更换,更换的主要依据色谱柱出峰不正常或者柱压力过高)。
3、泵正常工作时平均每15天左右向注油孔加润滑油2-3滴。
4、流动相里面如果有盐或酸类,做完实验后要先用95%二次蒸馏水与5%甲醇洗色谱柱40分钟左右,然后用纯甲醇洗30分钟左右才可以关机。第二天如果继续做实验流动相里面仍旧有盐或酸类,先用95%二次蒸馏水与5%甲醇过渡20分钟,再用流动相。如果流动相里面只有甲醇,水,乙腈,做完实验后就不用95%二次蒸馏水5%甲醇冲洗,可直接用纯甲醇洗30分钟即可关机。
5、C18色谱柱的耐酸PH值范围3-8使用时不要超出。
6、仪器长期不用时一定要将滤头泡在甲醇里半月开机一次,如果开机时泵抽不上液可以打开排气阀按PURGE快冲。
7、调反压器时要注意等液体流出来以后才能调,一般调8--10KG,比如现在泵显示屏显示柱压50KG那再增加10KG显示屏上显示柱压60KG然后拧紧锁紧螺母。
8、关机顺序:清洗液路时可以把检测器直接关机,清洗结束后先按STOP让泵停止后再关电源,不允许直接关机
流动相脱气是液相色谱仪提高检测性能和保护色谱柱的有效措施。
一、液相色谱仪液相色谱仪流动相脱气的目的:
1、使色谱泵输液均匀准确,减小脉动。
2、提高保留时间和色谱峰面积的重现性。
3、防止气泡引起尖峰。
4、使基线稳定,提高信噪比。
5、降低溶剂的紫外吸收本底。
6、减少死体积。
7、防止填料氧化。
二、液相色谱仪流动相常用的脱气方法:
1、吹氦脱气法:
利用液体中氦气的溶解度比空气低的特性,连续吹氦脱气,效果较好,适合所有溶剂。但成本高,使用较少。
2、加热回留法:
脱气效果比较好,但操作复杂。
3、超声波脱气法:
操作简单,但脱气效果不理想。
4、抽真空脱气法:
利用真空泵降压至0.05~0.07MPa,可除去溶剂中的气体。但抽真空会引起混合溶剂组分的变化,从而影响实验的重现性,多用于单一溶剂体系。
5、在线真空脱气法:
利用膜渗透技术,在线真空脱气,智能控制,成本低,脱气效果明显优于以上几种方法,并适用于多元溶剂体系。
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