工作原理
临床常用的微量移液器的设计依据是胡克定律:即在一定限度内弹簧伸展的长力与弹力成正比,也就是移液器内的液体体积与移液器内的弹簧弹力成正比。
微量移液器加样的物理学原理有两种:使用空气垫加样和使用无空气垫的活塞正移动(positivedisplacement)加样。这两种不同原理的微量移液器有其不同的特定应用范围
1.选择合适的移液器
移取标准溶液(如水、缓冲液、稀释的盐溶液和酸碱溶液)时多使用空气置换移液器,移取具有高挥发性、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm的液体或者在临床聚合酶链反应(PCR)测定中的加样时使用正向置换移液器。如移取15ul的液体,选择zui大量程为20ul的移液器,选择50ul及其以上量程的移液器都不够准确。
2.设定移液体积
调节移液器的移液体积控制旋钮进行移液量的设定。调节移液量时,应视体积大小而旋转刻度至超过设定体积的刻度,再回调至设定体积,以保证移取的zui佳度。
3.装配吸头
使用单通道移液器时,将可调式移液器的嘴锥对准吸头管口,轻轻用力垂直下压使之装紧。使用多通道移液器时,将移液器的排对准个管嘴,倾斜插入,前后稍微摇动拧紧。
4.移液
保证移液器、吸头和待移取液体处于同一温度;然后用待移取吸液体润洗吸头1-2次,尤其是黏稠的液体或密度与水不同的液体。移取液体时,将吸头垂直浸入液面以下2-3mm深度(严禁将吸头全部插入溶液中),缓慢均匀地松开操作杆,待吸头吸入溶液后静置2-3秒,并斜贴在容器壁上淌走吸头外壁多余的液体。
5. 移液器的放置
使用移液器完毕后,用大拇指按住吸头推杆向下压,安全退出吸头后将其容量调到标识的大值,然后将移液器悬挂在专用的移液器架上;长期不用时应置于专用盒内。
前进移液法
按下移液操作杆至停点位置,然后缓慢松开按钮回原点;接着将移液操作杆按至停点位置排出液体,稍停片刻继续将移液操作杆按至二停点位置排出残余液体,后缓慢松开移液操作杆。
反向移液法
先按下按钮至第二停点位置,慢慢松开移液操作杆回原点,排出液体时将移液操作杆按至停点位置排出设置好体积的液体,继续保持按住移液操作杆位于停
在调节移液器的过程中,转动旋钮不可太快,也不能超出其大或小量程,否则易导致量不准确,并且易卡住内部机械装置而损坏移液器。
在装配吸头的过程中,用移液器反复强烈撞击吸头反而会拧不紧,长期如此操作,会导致移液器中零件松散,严重时会导致调节刻度的旋钮卡住。
当移液器吸头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流而腐蚀活塞弹簧。
对移液器进行高温消毒时,应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后在进行处理。
移液器具有具有多种规格、多种体积变化,可满足常规的需要,同时精度和误差较高。采用独特的单按钮操作,防止气溶胶污染,确保移液安全,移液器的下半部能够高温灭菌,只要将下半部轻轻旋开,即可卸下进行灭菌。因此可以在进行一些有生物危险性或无菌要求比较高的工作。移液管内预装有自封闭微孔过滤塞可有效阻止样品气雾进入取液管内造成损害或交差污染。移液器还可与塑料及两种移液管相连接并用有搞腐蚀能力,适用于酸、碱及部分有机溶剂处理操作。定期校准是保证移液器准确性的重要手段
移液器使用方法(步骤)和保养维护注意事项:
1.设定移液体积:从大量程调节至小量程为正常调节方法,从小量程调节至大量程则应先调至超过设定体积刻度,再回调至设定体积,以保证移液器的精确度。
2.装配移液枪头:将移液枪垂直插入枪头,左右旋转半圈,上紧即可。严禁移液器撞击枪头,长期这样操作会导致移液器的零件损坏。
3.吸液及放液:枪头尖端垂直浸入液面 3mm以下,吸液前枪头先在液体中预润洗三次左右,吸排液时慢吸慢放,排液时如果量很小枪头尖端需贴在容器内壁。
4.吸有液体的移液枪不要平放,枪头内的液体很容易回流到移液器内污染腐蚀活塞等部件。
5.移液枪使用完毕后应将刻度调至zui大,让弹簧回复原形。
6.吸取液体时要缓慢平稳地松开拇指,突然松开会将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
7.由于吸头内壁会残留一层”液膜”产生误差,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液。
8.可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g。
9.zui好定期清洗移液枪,可以用肥皂水或60%的异丙醇,再用蒸馏水清洗,自然晾干。
实际实验中移液器在使用过程中因多种原因会造成偏差,定期校准是保证其准确性的重要手段。
1、化学消毒。 简单说来,就是用酒精等擦拭移液器的外表面,然后晾干即可。这对于所有移液器品牌而言都应该是可以做到的,否则其外壳的材质也太差了! 2、紫外线消毒。 用紫外线照射移液器的表面,通过破坏细胞的DNA结构来达到消毒的目的。紫外线消毒的时间取决于辐射强度和细菌对紫外线的抵抗力的强弱。多数品牌的移液器是可以用紫外线消毒的,但需要事先与供应商进行确认。 3、移液器高温高压灭菌。 通常来说,移液器高温高压灭菌的工作条件是:102.9kPa(1.05kg/cm2),121℃,20分钟。移液器的高温高压灭菌分为整支灭菌和半支灭菌,绝可以大多数品牌的移液器都可以半支灭菌,但是否能整支灭菌,使用者一定要与供应商确认。市场上,手动移液器等产品可以整支灭菌。不过这里需要提醒几点:第一,除了个别应用,如传染性病毒研究,多数客户并不需要整支灭菌;第二,对于同品牌的产品,往往整支灭菌的贵于半支灭菌的,客户需根据自己的需要作出决定。移液器是如何灭菌和消毒?