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超微量分光光度计如何使用有哪些注意事项 光度计是如何工作的

时间:2020-07-11    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     

超微量分光光度计如何使用,有哪些注意事项?

  一:超微量分光光度计是精密光学仪器,出厂前经过精细的装配和调试,如果能对仪器进行恰当的维护和保养,不仅能保证仪器的可靠性和稳定性,也可以延长仪器使用寿命。

  二:超微量分光光度计常用于定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。

  三:超微量分光光度计的工作原理是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域 ,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理部门 ,紫外可见分光光度计督有广泛而重要的应用。

  四:超微量分光光度计是精密光学仪器,正确安装、使用和保养对保持仪器良好的性能和保证测试的准确度有重要作用。下面分享一些超微量分光光度计不可不知的保养常识。

  (1)仪器工作环境的要求

  分光光度计对工作环境的要求如下。

  ①仪器应安放在干燥的房间内,使用温度为5~35℃.相对湿度不超过85%。

  ②仪器应放置在坚固平稳的工作台上,且避免强烈的振动或持续的振动。

  ③室内照明不宜太强,且应避免直射日光的照射。

  ④电扇不宜直接向仪器吹风,以防止光源灯因发光不稳定而影响仪器的正常使用。

  ⑤尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。

  ⑥供给仪器的电源电压为AC 220V±22V,频率为50Hz±1Hz,并必须装有良好的接地线。推荐使用功率为1000w以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器,以加强仪器的抗干扰性能。

  ⑦避免在有硫化氢等腐蚀性气体的场所使用。

  (2)仪器的日常维护和保养

  ①光源。光源的寿命有限,为了延长光源使用寿命,在不使用仪器时不要开光源灯,应尽量减少开关次数。在短时问的工作间隔内可以不关灯。刚关闭的光源灯不能立即重新开启。仪器连续使用时间不应超过3h。若需长时间使用,好间歇30min。如果光源灯亮度明显减弱或不稳定,应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置,不要用手直接接触窗口或灯泡,避免油污沾附。若不小心接触过,要用无水乙醇擦拭。

  ②单色器。单色器是仪器的核心部分,装在密封盒内,不能拆开。选择波长应平衡地转动,不可用力过猛。为防止色散元件受潮生霉,必须定期更换单色器盒干燥剂(硅胶)。若发现干燥剂变色,应立即更换。

  ③吸收池。必须正确使用吸收池,应特别注意保护吸收池的两个光学面。

  ④检测器。光电转换元件不能长时间曝光,且应避免强光照射或受潮积尘。

  ⑤当仪器停止工作时,必须切断电源。

  ⑥为了避免仪器积灰和沾污,在停止工作时,应盖上防尘罩。

  ⑦仪器若暂时不用要定期通电,每次不少于20~30min,以保持整机呈干燥状态,并且维持电子元器件的性能。

   原子吸收分光光度计根据物质基态原子蒸汽对特征辐射吸收的作用来进行金属元素分析。它能够灵敏可靠地测定微量或痕量元素。一般由四大部分组成,即光源(单色锐线辐射源)、试样原子化器、单色仪和数据处理系统(包括光电转换器及相应的检测装置)。
 
  工作原理:
  当空心阴极灯通过内部的低压气体在两个电极之间产生放电现象时,阴极会受到大量电子、加速冲向电极表面的带电气体离子(也就是充入气体的离子)的轰击。
 
  这些离子的能量非常强,以至于可以促使阴极材料的原子从表面脱离或“溅射”进入等离子区。
 
  溅射的离子在此处还会与其它高能的物质相互碰撞。碰撞的结果导致能量转移,金属原子跃迁至激发态。由于激发态不稳定,原子会自发回到基态,同时发射出特定波长的共振线。
 
  很多元素都具有多条共振线供分析使用。
 
  原子吸收分光光度计的主要特点:
  1、高度的自动化功能,程度地满足了使用者的需求;
 
  2、内置优化参数,便于用户快速掌握;
 
  3、波长自动扫描、自动寻峰,自动切换光谱带宽,自动调整负高压、灯电流等,系统化设置或单项设置,操作灵活;
 
  4、乙炔气泄漏报警、火焰实时监控、熄火自动保护,出现其他异常时自动断电保护,确保操作人员和仪器的安全;
 
  5、优异的可扩展性,可简捷应对分析样品的多样化和复杂化,轻松满足多种分析需求;
 
  6、采用六灯架自动切换装置,满足多种元素测试需求;
 
  7、采用半透半反装置,氘灯扣背景时,样品光束和背景光束能量自动平衡;
 
  8、采用经典设计的雾化器和全钛燃烧头,燃烧稳定、原子化效率高,保证了分析准确度。



    分光光度计是利用物质对光的选择性吸收的特性,以较纯的单色光作为入射光,测定物质对光的吸收,从而对物质进行定性或定量分析的仪器。在使用过程中常常会出现测量误差,这些误差又是如何产生的呢?下面小编为大家介绍分光光度计测量误差产生原因。
    1、复色光对比耳定律的偏离
    比耳定律成立的前提条件是人射光是单色光,但是精度再高的仪器,即使是双单色器的分光光度计,也只能获得近乎单色的光,无法获得纯单色光,它仍然含有狭窄光通带,具有复色光的性质。而复色光会导致比耳定律的正或负偏离。
    固定狭缝的紫外分光光度计光谱带宽一般为1nm或2nm,可调狭缝的可以做到0、1nm;可见分光光度计带宽6nm、snm,甚至十几纳米。
    光谱带宽应该是越小越好,但是,随着光谱分辨率的提高,仪器的灵敏度降低,所以,选择仪器时要综合考虑各种条件的影响。当溶液浓度较小且单色光较纯时,可近似认为符合比耳定律。
    2、杂散光的影响
    杂散光是指进人检测器的处于待测波长光谱带宽范围外的其他波长组分,它是光谱测量中误差的主要来源。
    产生原因有:
    分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色器内壁灰尘等。在分光光度计工作波段边缘波长处,由于单色器透光率、光源辐射强度、检测器灵敏度都较低,杂散光的影响更为显着。
    杂散光限制仪器的分析上限可引起严重的测量误差,实际工作中,在定量分析时,一般在吸收峰或其附近处测量样品吸光度,如果在分析波长处含有杂散光,这时样品的透光率较小,而杂散光大部分透过,使测量吸光度低于真实吸光度。
    3、仪器噪声对测t的影响
    仪器噪声也是仪器的一个重要指标,它表征仪器做稀溶液的能力。是叠加在待测量的分析信号中的不需要的信号,扫描100%T和0%T线,可观察到分光光度计的绝对噪声水平,如果仪器噪声较大,会掩盖较小的测量信号,一般用噪音的二倍来表示仪器的灵敏度。
    4、波长和吸光度准确度
    样品的每一个值都是在一定的波长下测得的,如果,波长误差很大,测出的值肯定不准。吸光度准确度也是用户对仪器的直接要求,更应引起足够的重视。
    国家计量检定规程规定双光束紫外可见分光光度计透射比准确度为A级士0、6%,B级土1、0%。







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