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安装色谱柱时你应该知道什么 色谱柱如何操作

时间:2020-07-12    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
 

    液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。

 色谱柱的安装:

    1.将液相色谱装置中的流动相完全置换后再连接色谱柱,并完全排出流路内的空气。装置内的液体和所使用的流动相不能相溶的情况下,使用双方都能相溶的液体做过渡。。将盐溶液置换成有机溶剂的时候,需要通过纯水、丙酮的顺序来进行置换。相反,从有机溶剂转换成盐溶液的情况下,需要通过丙酮、纯水的顺序置换。

    2.色谱柱保存方法不对或者长期不使用的情况下,色谱柱的出入口可能会有空气残留。这种情况下,必须先把空气完全排出后才连接到装置中。避免快速加热,加热温度不要超过色谱柱的Z高负荷温度。把柱子入口侧的螺栓打开,然后加温(一般加温到手心感到温暖的程度就足够了),等液体满出来以后接到装置上。然后,打开出口处的螺栓,用泵送液,等确认出口处有液体流出后,连接到装置中。这样操作,就算后面再连接一根色谱柱也能完全除去空气。

    3.在泵运作的时候连接色谱柱。确保能让流动相按照色谱柱上箭头的方向流动的状态连接色谱柱。

    4.色谱柱加温使用的时候,先用0.2~0.3mL/min的低流量一边送液一边升温。达到所定温度后,再渐渐的增加流量至测定流量。

色谱柱安装时需要注意的事项

   色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。下面介绍色谱柱安装时需要注意的事项。

  色谱柱的安装:

  1)将液相色谱装置中的流动相完全置换后再连接色谱柱,并完全排出流路内的空气。

  装置内的液体和所使用的流动相不能相溶的情况下,使用双方都能相溶的液体做过渡。比如从水置换到氯仿的情况,就需要使用丙酮做过渡,才能完全置换。

  将盐溶液置换成有机溶剂的时候,需要通过纯水、丙酮的顺序来进行置换。相反,从有机溶剂转换成盐溶液的情况下,需要通过丙酮、纯水的顺序置换。

  不仅仅是泵,流动相流动的所有流路都必须进行置换。例如,注入样品的情况,软管内的液体也需要置换。另外,如果使用压力计等别的软管的情况,取下来的管子也必须由流动相洗净后才能继续使用。

  2)色谱柱保存方法不对或者长期不使用的情况下,色谱柱的出入口可能会有空气残留。这种情况下,必须先把空气完全排出后才连接到装置中。

  避免快速加热,加热温度不要超过色谱柱的最高负荷温度。

  把柱子入口侧的螺栓打开,然后加温(一般加温到手心感到温暖的程度就足够了),等液体满出来以后接到装置上。然后,打开出口处的螺栓,用泵送液,等确认出口处有液体流出后,连接到装置中。这样操作,就算后面再连接一根色谱柱也能完全除去空气。

  3)在泵运作的时候连接色谱柱。确保能让流动相按照色谱柱上箭头的方向流动的状态连接色谱柱。

  4)色谱柱加温使用的时候,先用0.2~0.3mL/min的低流量一边送液一边升温。达到所定温度后,再渐渐的增加流量至测定流量。

  5)色谱柱需要安定时间。连接到装置中立即进行测试的情况下,第一次很难得到好的分析结果。

标签: 色谱柱
色谱柱 色谱柱安装时需要注意的事项_色谱柱



    阳离子色谱柱是高效液相色谱的一种,是分析阴阳离子的一种液相色谱方法,该方法具有选择性好、灵敏、快速、简便等优点,并且可以同时测定多种组分。


    阳离子色谱柱的进样系统


    离子色谱的进样主要分为3种类型:即气动、手动和自动进样方式。


    手动进样阀


    手动进样采用六通阀,其工作原理与HPLC相同,但其进样量比HPLC要大,一般为50μL。样品首先以低压状态布满定量管,当阀沿顺时针方向旋至另一位置时,即将贮存于定量管中固定体积的样品送进分离系统。


    气动进样阀


    气动阀采用一定氦气或氮气气压作动力,通过两路四通加载定量管后,进行取样和进样,它有效地减少了手动进样因动作不同所带来的误差。


    自动进样


    自动进样器是在色谱工作站控制下,自动进行取样、进样、清洗等一系列操纵,操纵者只须将样品按顺序装进贮样机中。圆盘式自动进样的工作步骤如下:


    (1)电机带动贮样盘旋转,待分析样品置于取样针正下方。


    (2)电机正转,丝杆带动滑块向下移,把取样针插进样品塑料盖,滑块继续下移,将瓶盖推进瓶内,在瓶盖挤压下样品经管道流进进样阀定量管,完成取样动作。


    (3)进样阀切换,完成进样。


    (4)电机反转,丝杆带动滑块上移,取样针恢复原位。


    自动进样可以达到很宽的样品进样量范围的目的。







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