分光光度计的使用步骤主要有哪些?下面本生(天津)健康科技有限公司工程师做如下绍:
一、把分光光度计电源线连接好,仪器的电源具备接地功能;
二、接通电源后,按动开机开关,然后让仪器预热至少20分钟,仪器会自动校正,然后显示546.0nm 0.000A说明自检结束,就可以开始测试;
三、使用“方式”键测试的方式,再根据自己要测量的结果选透光率、吸光度、和浓度的测试;
四、要对波长进行分析,选择按键6,然后按提示依次进行;
五、把样品溶液和要测定的溶液各自倒入比色皿中后,然后打开样品盖,把盛着溶液的比色皿插入另一个比色皿中,后盖好样品盖;
六、把参比的溶液拉到光路中按住“OABS/100%T”键,这时的显示器会显示出BLANKING,,直到后显示出“100%T”或者是“0.000A”为止;
七、后仪器显示出“100%T”或者是“0.000A”即可结束测试。这时被测样品的透光度、吸光度等参数就可直接读出;
八、分光光度计使用完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。
分光光度计的使用注意事项:
1、分光光度计应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定;
2、分光光度计使用前,使用者应该首先了解分光光度计的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关;
3、在分光光度计尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。
注:分光光度计的使用方法步骤暂时有以上几点,如有疑问,请及时咨询本生科技分光光度计工程师!
紫外可见分光光度计可达到检测质量与成分的目的。在对不同的仪器进行分析时,紫外可见光光度计是常规的分析仪器之一,原理就是紫外可见光度法。
紫外可见光光度计有很多的特点:
如第一,由于选择性好而且灵敏度较高,维护管理很方便,所以在使用中更为常见;
第二,它的结构较为简单,可以很方便地进行操作而且在成本上又不是非常贵。
以光路设计为基础,对紫外可见分光光度计进行分类,可以依据光路设计分为三种类型:单光束分光光度计、双光束分光光度计以及双波长分光光度计。
鉴于此,本文主要分析紫外可见分光光度计主要技术指标及其检定方法。
1.紫外可见分光光度法工作原理以及相关应用
紫外可见分光光度法的工作原理就是利用不同物质的分子在紫外可见光谱区上的辐射吸收的不同,利用分子的这一特性来进行有效地区分辨别。
紫外可见分光光度法在物质的定性定量分析以及物质纯度分析物质结构分析等多种方面都有着广泛的应用,起着不可或缺的作用。
例如:此种检测方法在食品行业中的运用,可以对食品的质量进行有效地安全监测。而对于生活质量方面来说,食品卫生及质量是较为重要的一点,只有确保食品不会出现安全问题,才能够有效地促进国民健康生活。
现阶段,我国出现的食品安全问题有以下几种:食品造假;在食品添加对人体有害的添加剂;一些非法添加物的滥用;除了这些主要问题之外还存在食品残留农(兽)药、微生物或者重金属等有害物质的情况,以上情况都会造成食品出现质量安全问题,因此必须对食品进行安全分析、检测,确保食品不会出现质量安全问题。
2.紫外可见分光光度计主要技术指标
波长准确度及其检定方法
波长的实际测定值和理论值相减,就是紫外可见分光光度计的波长的准确度。它在测试不同的仪器时,作用非常大,是非常关键的技术指标。
在我国,计量检定工作,波长准确度是很重要的。检定紫外可见分光光度计的波长准确度有很多的方式,下面将通过两种方法进行寿命说明:汞灯和氖灯的利用。
汞灯
我国在对紫外分光光度计波长准确度进行检定时,很多的生产厂一般都广泛利用汞灯进行测试。具体的操作流程就是:
将原光源拆下来,采用标准灯,对标准光源灯各条的特征谱线进行测试,波长准确度就是测量值和理论值做差。
自利用汞灯进行测试的过程中,能量测量作为测量的方式,波段的范围设置在245-560nm范围之内,空气作为样品的参考系,光谱带的宽设置为2nm,再通过波长扫描。波长准确度就是汞灯的各特征波长的测量值和其相应的理论值之差。为了确保准确度,可以重复进行3次,波长准确度就选择3次的平均值。
氖灯
在对紫外可见分光光度计的波长准确度进行检测时,通常人们在选用标准灯时用氖灯。在仪器紫外区,由于氖灯的连续光谱优势,就会在紫外区作为光源。
在可见区,由于光谱中波长为656.1nm和为486.0nm是很容易分离的,而且具有高的强度,谱线特征非常明显,所以对仪器波长准确度进行检定时可以利用谱线。在我国,对于仪器进行计量检定都会用波长准确度较为高的标准灯-氖灯。
波长重复性及其检定方法
多次测试波长之后数据符合程度,也就是多次测试波长的数据离散性就是波长的重复性(WavelengthRepeatability)。检定波长的重复性方法,操作简单。第一种方法,测试波长的准确度之后,测试三次取平均值,波长重复性就是通过和3次测试中最小值或者最大值做的差;第二种,测试波长的准确度,要经过3次测试,波长重复性就是最大值与最小值之差。
光度准确度及其检定方法
光度的实际测定值和理论值之差就是光度准确度(PhotoMtricAccuracy)。它俩之间的差越小,测量就会更准确,光度的准确度就会更高。一般,表示紫外可见分光光度计光度的准确度有以下两种方式:
①透射比误差或者透射比准确度(TransmittanceAccuracy),表示用TA(或AT);②吸光度误差(AbsorbanceError)或者是吸光度准确度(Absorbd-nceAccuracy),在表示用AA(或AA)时,要注意测量时具体的吸光度情况。
3.紫外可见分光光度法的合理化运用
溶液中物质含量的测定
应用紫外可见分光光度计测定标准溶液和未知液的吸光度进而进行比较;也可先测出不同浓度标准液的吸光度,绘制标准曲线,在一定浓度范围内标准曲线为直线,然后测定出未知液吸光度,即可从标准曲线上查到其对应浓度。
化合物的鉴定
用不同波长的单色光分别通过某一浓度溶液,测定每一种单色光的吸光度,之后分别以波长和分光度作为横坐标和纵坐标,绘制得到吸收光谱曲线。
不同食品有其特定的吸收光谱曲线,借此可以鉴定食品种类。紫外吸收光谱分析主要用于已知物质定量分析,测定化合物中含有微量的具有紫外吸收的杂质。
反应动力学研宄
借助于分光光度法可得出特定化学反应速度常数,借此从两个或两个以上温度条件下的速度数据得出反应活化能。
络合物组成和稳定常数的测定金属离子可与有机物形成络合物且在紫外可见区有吸收,据此可利用分光光度法来研宄其组成。
总之,紫外可见分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析,这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁。
朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律,是分光光度法定量分析的依据和基础。紫外可见分光光度计在食品检验中应用广泛,主要包括定量、定性和结构分析以及反应动力学和溶液平衡研宄。
紫外可见分光光度计具有灵敏度高、准确度高、选择性好、适用浓度范围广等优点,广泛地应用于化工、冶金、地质、医学、食品、 制药等部门及环境监测系统。
紫外可见分光光度计的原理:
物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同;
因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。
紫外可见分光光度计的使用方法:
(1)接好线路后,先检查各开关是否在“关”处,光路闸门放在黑点处,再将电源插头插入220V交流电源上,打开电源开关和光源开关,将光路闸门放在红点处。
(2)取出比色皿,将其中一只装空白溶液,其余三只装待测溶液,放在定位盒内,盖上暗箱盖,装溶液前比色皿用蒸馏水洗净;
并用溶液荡洗数次后,再盛至体积,池外应赶紧,若有水滴,应用镜头纸吸干,取用时用手捏住比色皿的毛玻璃面。
(3)用波长调节器调到所需的波长,将空白溶液正对光路,调光量调节器,使检流计上光点准线对准透光率为100的位置;
拉动拉杆,使待测溶液进入光路,读取微电计标尺上的透光率,测定完毕,及时关闭光路闸门,检查电计的零点位置,保护硒光电池。
(4)紫外可见分光光度计应安放在清洁、干燥、无腐蚀气体和较暗的室内;
仪器使用完毕后应擦拭干净,各开关关闭,紫外可见分光光度计连续使用时间不应超过4h。