分光光度计的使用步骤主要有哪些?
以下相关工程师做如下介绍:
1.把分光光度计电源线连接好,仪器的电源具备接地功能;
2.接通电源后,按动开机开关,然后让仪器预热至少20分钟;
仪器会自动校正,然后显示546.0nm 0.000A说明自检结束,就可以开始测试;
3.使用“方式”键测试的方式,再根据自己要测量的结果选透光率、吸光度、和浓度的测试;
4.要对波长进行分析,选择按键6,然后按提示依次进行;
5.把样品溶液和要测定的溶液各自倒入比色皿中后;
然后打开样品盖,把盛着溶液的比色皿插入另一个比色皿中,最后盖好样品盖;
6.把参比的溶液拉到光路中按住“OABS/100%T”键;
这时的显示器会显示出BLANKING,,直到最后显示出“100%T”或者是“0.000A”为止;
7.最后仪器显示出“100%T”或者是“0.000A”即可结束测试。
这时被测样品的透光度、吸光度等参数就可直接读出;
8.分光光度计使用完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。
分光光度计的使用注意事项:
1、分光光度计应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。
热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定;
2、分光光度计使用前,使用者应该首先了解分光光度计的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。
在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固;
通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3、在分光光度计尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上;
若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。
分光光度计计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
分光光度计的基本工作原理
分光光度计的基本工作原理是基于物质对光(对光的波长)的吸收具有选择性,不同的物质都有各自的吸收光带,所以,当光色散后的光谱通过某一溶液时,其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下,溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系,即符合比尔定律。
T=I/Iolg(Io/I)=εcb
式中,T为透过率,Io为入射光强度,I为透射光强度,A为消光值(吸光度),ε为吸收系数,b为溶液的光径长度,c为溶液的浓度。从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时,透光率是根据溶液的浓度而变化的。
在使用分光光度计时,我们必须要注意一些使用后的维护,保养,和一些基本使用注意事项,才能达到更好的使用效果。
分光光度计的使用维护:
1、使用的吸收池必须洁净,并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。
2、取吸收池时,手指应拿毛玻璃面的两侧,装盛样品以池体的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净,晾干防尘保存。
3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之间为宜。
4、测定时除另有规定外,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用1cm石英吸收池,在规定的吸收峰±2nm以内,测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定,以核对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸收度最大的波长作为测定波长,除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。
5、供试品应取2份,如为对照品比较法,对照品一般也应取2份。平行操作,每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。
6、选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度值会偏低,狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准,对于大部分被测品种,可以使用2nm缝宽。
7、单色器是仪器的核心部分,装在密封盒内不能拆开,为防止色散元件受潮发霉,必须经常更换单色器盒干燥剂。
8、光电转换元件不能长时间曝光,应避免强光照射或受潮积尘。
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