葛根是一种常用中药,具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻之功效,葛根素是葛根中的主要活性成分之一。呈白色针状结晶,能溶于水,但溶解度小,其水溶液为无色或微黄色。具有改善心脑血管循环、降低心肌耗氧量,降低血糖,防止高血压及动脉硬化,提高机体免疫力,抗菌,抗病毒等多种药理作用。葛根素因毒性小,安全范围广,疗效好而临床应用价值。
目前市场上葛根素有多种剂型,但是其剂型和标准各不相同,本文比较了两种葛根素注射液的外观质量和内在质量,并用HPLC测定了其主要有效成分葛根素的含量,具有方便、准确,便于控制产品的质量等优点。
仪器准备
仪器简介
LC-600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等,实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。
应用领域
化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析
色谱条件:
色谱柱 | SymmetryC18柱(3.9mm×150mm,5μm) |
流动相 | 甲醇-水(体积比为35:65) |
检测波长 | 250nm |
进样量 | 10μL |
流速 | 1.0ml/min |
谱图分析:
当样品定量管经过充分的冲洗后,可以将旋柄转回取样位置(Load),也可以继续保持在进样位置,到下次取样前才切换回取样位置。在切换回取样位置时,将样品进样针或微量样品进样针从进样阀中拔出。
为防止交叉污染,正常情况下不必每次进样后都冲洗进样阀注射针导入口。进样阀内根据专利设计的直接连接进样孔,可以使注射针头的前端直接连接到样品定量管的末端,没有其他空间供样品残留。这样在下一次进样时,就不会有上一次残留的样品进入样品定量管。
但是在进样针头插入或拔出过程中,会有痕量的样品沉积在针头密封区域。精密的测定显示这种残留有1nL ~ 10nL。这表明进20μL样品,会残留0.005% ~ 0.05%。每次进样后冲洗注射针导入口可以将此残留冲洗干净。冲洗注射针导入口的过程为:设定流动相的流速为0.1mL/min ~ 1mL/min,将注射针导入口冲洗头(Rheodyne部件号7125-054)连接到一只体积相对较大的注射器上,用大量的流动相只在进样位置清洗注射针导入口。这样进入进样阀中的液体绕过样品定量管由样品溢出管5# 口排出。这一过程可以将注射针导入口、引导管、注射针导入管和注射针密封圈彻底清洗。而采用注射器完全插入式的冲洗方式,则不能全部清洗上述部分的表面。在取样位置将注射针插入注射针导入口时,针头推动注射针密封圈内少量样品液体(上一次冲洗注射针导入管留下的)进入样品定量管。当该样品液体与所用的流动相组成不同,且同时采用部分充满定量管进样方式时,在高灵敏度的检测器上可能出现怪峰。所以冲洗注射针时可以用流动相冲洗。