第1期 | 色谱柱使用一段时间后出现肩峰,怎么处理?
在流出曲线或吸收曲线的峰上出现的不成峰形的小曲折(deflection),形状类似肩膀,故称为肩峰,这是对于曲线形状的一种描述。
Question:
色谱柱使用一段时间后出现肩峰,怎么处理?
Lubex:
多种原因可导致出现肩峰,可从以下方面考虑。
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检查色谱柱是否虚接,虚接后会造成锋均展宽且拖尾等现象。
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个别峰出现肩峰,考虑是否色谱条件不合适导致,调节流动相增大保留能力,提高分离度。反相的话基本上是减小一下流动相中有机相比例,正相的话就要增大流动相中弱极性成分的比例了。
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谱图中所有峰均出现肩峰,考虑污染导致。可加大洗脱强度冲洗色谱柱,对于反相柱:甲醇-乙腈-异丙醇-甲醇冲洗;另外考虑到柱头污染,还可反冲,需注意应断开检测器小流速冲起。
时间久的关系会影响色谱峰的峰型和状态。
Agilent液相色谱仪是一种应用十分广泛的有机多组分化学分析仪器。它具有分离效能高, 分析速度快, 样品用量少, 可进行多组分测量等优点。Agilent液相色谱仪在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面应用很广。它除用于定量和定性分析外,还能测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。一种对混合气体中各组成分进行分析检测的仪器。但是由于人员素质 样品的性质以及仪器本身等方面的原因, 常常出现这样那样的分析故障严重影响了正常的生产分析。所以掌握一种准确、快速的排除Agilent液相色谱仪故障的方法非常重要。
安捷伦液相色谱仪1260
1 、如何成为真正的液相高手
(1)、一定要珍惜仪器厂商提供的各种培训,因为他们的培训很有针对性,而且很专业。
(2)、要多做,液相是一个比较复杂的系统,在做样的过程中,总会遇到各种问题,通过自己的大脑解决问题,慢慢积累就会穴道很多东西。其次要敢于动手,不要总担心会把仪器弄坏,拆仪器的时候细心一点就好了,记着各个部件的顺序,连接方式。动手次数多了,成功的机会就多了,也就更有信心了。
(3)、要看一些相关理论的书籍,要了解一些关于液相的分离原理,如何优化色谱系统和峰形,能够自己解决一些分离的问题。这样才是一个液相高手。
如果只是会很熟练的使用工作站和维修仪器,排除故障,我觉得这只是一个操作高手,而不是一个真正的液相高手。
2、新装82341 GPIB 板,如何与ChemStation 通讯?
在 LC ChemStation CD-ROM 中有安装说明,还包括驱动程序安装信息。请在 Windows® Explorer 中查看子目录: ManualsInstallationLC Systems。您在此处可找到《安装手册》,其中包含有关如何安装 GPIB 板以及如何调用驱动程序的逐步操作说明。
3、为什么进样后在工作站在线图谱上看不到红色开始线?
ChemStation 软件有一个“在线图谱”窗口,在此窗口中可显示从所连接的检测器接收到的所有信号。当进样样品时,会在“在线图谱”窗口中显示一条竖直的红色“开始线”。这条红色线标志着启动该软件进行原始数据的收集。如果不显示这条红色线,则不会收集数据。 如果不显示“开始线”,请检查检测器上的遥控电缆(如果是 1050 或 1090 系列液相色谱仪的话)。如果缺少遥控电缆,则需要进行安装。如果安装了模-数转换箱或板 (35900 ADC),则需要从模-数转换设备到液相色谱仪拉一根遥控电缆。检查所有的 CAN 电缆,确保它们都连接到 1100 系列液相色谱仪上
4、的波长如何选择
做一个新的方法,关键是选择好的仪器条件,更关键的是波长正确。但是怎样的波长才算是的那,比如说我已经作了全扫描,那么怎么去选择波长哪???一般选择zui大吸收波长为检测波长,当然也要结合自己的实际情况来中和一下如果要达到zui大检测灵敏度,zui大吸收波长是首位选择。如果你使用的是DAD,那么建议你将Sample WL设定为zui大吸收波长,Bandwidth不能低于你设定的slit的值。默认推荐的Bandwidth为半峰宽。如果你在一次分析中有zui大吸收波长不同的物质需要同时检测,可以使用检测器的Timetable进行波长的切换避免选用低波长,波长越长越容易做
5、柔性不锈钢毛细管线外面的彩色标记是什么意思?
安捷伦柔性不锈钢管线外部的彩色标记表示管的内径 (ID): 红色 表示内径为 0.12mm 或 0.005 英寸。 绿色 表示内径为 0.17mm 或 0.007 英寸。 蓝色 表示内径为 0.25mm 或 0.010 英寸。 橙色 表示内径为 0.50mm 或 0.020 英寸。
6、更换活塞密封圈后,建议采用什么磨合程序?
注意这个程序适合于反相密封圈,但不适合于正相密封圈。还会损坏正相密封圈。 安装新的密封圈后,进行zui初的“磨合”期。在至少 350bar 的反压下泵入异丙醇 15-30 分钟。这要通过使用原来的色谱柱或阴尼管线来产成压力.。
液相色谱仪是一种常用的分析仪器,主要由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成,被广泛用于生物医学、环境化学、石油化工等领域中。 1、柱压高原因 (1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内; (2)样品污染沉积。处理对于第一种情况先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。 2、气泡溢出 流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0~3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。 3、既无压力指示,又无液体流过 (1)泵密封垫圈磨损; (2)大量气泡进入泵体。处理对于第一种情况,更换密封垫圈;对于第二种情况,在泵作用的同时,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。 4、压力波动大,流量不稳定 原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。处理工作中注意观察流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物,拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。 5、出峰不佳,峰分叉 (1)色谱柱被污染; (2)柱头填料塌陷。处理对于第一种情况,先用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳,则考虑第二种情况。对于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料),装入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,再填平,滴甲醇,再压紧反复几次,直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净,擦净柱外壁的填料,拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。