原因
①漏液。
②流动相污染、变质或由低质溶剂配成
③流动相各溶剂不相溶
④检测器/记录仪电子元件的问题
⑤系统内有气泡
⑥检测器内有气泡
⑦流通池污染(即使是极少的污染物也会产生噪音。)
⑧检测器灯能量不足
⑨色谱柱填料流失或阻塞
⑩流动相混合不均匀或混合器工作不正常
解决方法
①检查接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换密封。检查流通池是否漏液。
②检查流动相的组成。
③选择互溶的流动相
④断开检测器和记录仪的电源,检查并更正。
⑤用强极性溶液清洗系统
⑥清洗检测器,在检测器后面安装背景压力调节器
⑦用1N的硝酸(不能用磷酸)清洗流通池
⑧更换灯
⑨更换色谱柱
⑩维修或更换混合器,在流动相不走梯度时,建议不使用泵的混合装置
安捷伦液相色谱仪是利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。
安捷伦液相色谱仪的常见故障及解决方法:
1、柱压高
可能原因以及解决办法:
(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内。先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟。
(2)样品污染沉积。由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子,再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
2、指示
可能原因以及解决办法:
(1)泵密封垫圈磨损。更换密封垫圈
(2)大量气泡进入泵体。在泵作用的同时,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。
3、不稳定
原因:系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。
解决办法:处理工作中注意观察流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物,拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。
4、峰分叉
可能原因以及解决办法:
(1)色谱柱被污染。先用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
(2)柱头填料塌陷。拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料),装入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,再填平,滴甲醇,再压紧反复几次,直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净,擦净柱外壁的填料,拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。
5.重复性差
可能原因以及解决办法:
(1)进样阀漏液。更换进样阀垫圈
(2)加样针不到位。保证加样针插到底,注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态,以保证进样量的准确。
(3)液量不足。