(1)紫外分光光度计样品信号重现性不良;
原因:排除仪器本身的原因外,最大的可能是样品溶液不均匀所致;在简易的单光束仪器中,样品池架一般为推拉式的,有时重复推拉不在同一个位置上;
检查:更换一种稳定的试样判定;
解决办法:采取正确的试样配置手段;修理推拉式样品架的定位碰珠;
(2)紫外分光光度计做基线扫描或样品扫描时,基线或信号有一个大的负脉冲;
原因:扫描速度设置得过快,信号在读取时,误将滤光片或光源镜的切换当做信号读取了;
检查:改变扫描速度;
(3)紫外分光光度计做基线扫描或样品扫描时,基线或信号有一个长时间段的负值或满屏大噪声;
原因:滤光片饲服电机“失步”,造成档位错位,国产电机尤甚;
检查:重新开机有可能回复,或打开单色器对照波长与滤光片的相对位置来检查(注意:打开单色器时要保护检测器不被强光刺激);
解决办法:更换饲服电机;
(4)紫外分光光度计样品出峰位置不对;
原因:波长传动机构产生位移;
检查:通过氘灯的656.1nm的特征谱线来判断波长是否准确;
解决办法:对于高档仪器而言处理手段相对简单,使用仪器固有的自动校正功能即可;而对于相对简单的仪器,这种调整则需要专业人员来进行了;
(5)紫外分光光度计信号的分辨率不够,具体表现是:本应叠加在某一大峰上的小峰无法观察到;
原因:狭缝设置过窄而扫描速度过快,造成检测器响应速度跟不上,从而失去应测到的信号;按常理,一定的狭缝宽度要对应一定范围的扫描速度;或者狭缝设置得过宽,使仪器的分辨率下降,将小峰融合在大峰里了。
检查:放慢扫描速度看一看或将狭缝设窄;
解决办法:将扫描速度、狭缝宽窄、时间常数三者拟合成一个优化的条件;
(6)当紫外分光光度计波长固定在某个波长下时,吸光值信号上下摆动,特别是测量模式转换为按键开关式的简易仪器;
原因:开关触点因长期氧化所致造成接触不良;
检查:用手加重力量按琴键时,吸光值随之变化;
解决办法:用金属活化剂清洗按键触点即可;
导读:
紫外可见分光光度计对于我们来说熟悉却也比较难读懂理解的。天天有人提起他的名字却没多少人知道他的工作原理。下面我们来浅谈一下。
光谱工作原理:
分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。
根据Lambert-Beer定律说明光的吸收与吸收层厚度成正比,比耳定律说明光的吸收与溶液浓度成正比;如果同时考虑吸收层厚度和溶液浓度对光吸收率的影响,即得朗伯-比耳定律。即A=εbc,(A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,b为液池厚度,c为溶液浓度)就可以对溶液进行定量分析。
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确,精密度高,且测定条件要相同。
实验证明,不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同,这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度,以确定选择哪一种溶剂。
紫外可见分光光度计的工作环境:
1)分光光度计安放在干燥的房间内,使用温度为5-35℃,相对湿度不超过85%
2)仪器应放置在坚固平稳的工作台上,且避免强烈的震动或持续的震动
3)室内照明不宜太强,且应避免直射日光的照射
4)电扇不宜直接向仪器吹风,以防止光源灯因发光不稳定而影响仪器的正常使用
5)尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电气设备
6)避免在有硫化氢等腐蚀性气体的场所使用
二、减除紫外可见分光光度计因素误差的措施
1、减除入射光束单色性不纯的影响
各种不同的分光光度分析仪器除了本身的质量决定其单色光的纯度不同外,使用或操作也会影响单色光的纯度,例如对同一台分光光度计,由于出射狭缝调节不当就会使单色光纯度差。因此除了应该根据分析的要求选择适当的仪器外,还必须正确的使用仪器。
2、减除杂散光的影响
杂散光的主要来源是仪器的光学元件保护不好,例如透镜或反射镜上有尘埃或指纹印。分光光度计光学系统的暗箱中的黑体被划伤或脱落,在操作时样品室盖未盖好等。因此要消除杂散光应注意以下几点。
1)做好分光光度计(特别是光学系统)的防潮和防霉工作。不允许用手或其他硬物摸碰光学元件和暗箱的黑体
2)保护好吸收池架,并应经常保持其清洁和干燥
3)测定时,必须盖好样品室盖
3、减除吸收池误差
吸收池的质量(主要是精度)不好或使用不当都会给测定结果带来误差。即使是同一组的数个同规格的吸收池,也不能保证其光程长度相等,只是其误差在一定的范围之内。为了减除由此而产生的误差,使用时应对吸收池进行校正。
希望对大家有帮助。
赛默飞紫外分光光度计GENESYS 10S描述:
GENESYS 10S在传统分析中具有的可靠性,操作简单、性能可靠。能满足实验室常规分析的要求。赛默飞紫外分光光度计GENESYS 10S配置的附件和软件,能够为QA/QC或教学实验室定制专门的方案。
赛默飞紫外分光光度计GENESYS 10S特点:
一、可靠性和高精度,的光学设计提供了高性能的系统。扫描设备活动件少、氙灯寿命长且可提供所有波长范围内的紫外-可见光。配备了内部参比探测器的双光束系统极大的提高了设备的稳定性。使用三长光程样品池架,可以提高自动检测的精度和效率。
二、软件灵活,内置大屏幕图形显示器和灵敏的软键,能zui大限度的方便用户使用。
三、设计直观、方便实用
四、简洁的设计节约了更多的工作空间,内置打印机能打印出高质量数据和图谱而不需增加系统接口。
五、维护成本低。氙灯在190-1100 nm的整个波长范围内提供的性能,无需切换光源。可保证连续使用3年,无需维护。由于仅在测试时灯才开启,所以仪器可能永远不需换灯。
六、样品池自动转换,节约时间。6池转换器可以内部自动换样,转换器能自动与本地控制及PC软件相互作用还可以与其它附件轻松替换。微量样品池可以检测体积小到1μl的液体,也可检测较高浓度的溶液。
七、综合型本机控制软件,为常规检测和教学提供了一套全面应用系统。
内置软件可实时显示:
1.吸光度、透光率或浓度
2.吸光度比值/吸光度差值
3.15个标准下的定量分析
4.31个波长值下固定多波长分析
5.动力学
6.波长扫描
八、性能验证。内置性能验证可以自动检测仪器性能,内置光源或外部校准标准可进行波长精度测试。经济有效的氙灯提
供的波长,保证了重复、准确的测试。其它内置检测可以监控设备的性能指标。
九、其它软件。
1.标准仪器控制软件VISIONlite可进行波长扫描、固定多波长分析、定
量分析和动力学分析。
2.对于食品和饮料行业客户,EnzLab分析软件可进行食品酶分析。
3. VISIONlite ColorCalc 软件可用于药品的色度计算和日常CIE色度计算。
4. VISIONlite MaserialsCalc软件测试太阳镜和其它光学材料的透光率。