一、开机
开机前将样品室内的干燥剂取出,确认电源是否连接。打开仪器电源开关,等待仪器自检通过,自检过程中禁止打开样品室。
二、使用
仪器自检结束后(7个自检项目均出现OK字样),按[MAINMENU]键(主菜单),屏幕显示如下5个功能项:
1、Phtometry(定量运算);
2、WavelengthScan(波长扫描模式);
3、TimeScan(时间曲线扫描);
4、System(系统校正);5、Datadisplay(光度直接测量模式)。按相应选项前的数字键,即可进入该选项的下一级子菜单。
1、Phtometry(定量运算)
1)按[MAINMENU]键,再按数字[1]键进入Phtometry子菜单下,选中对应的数字来选择所需的测定方式:
①%T/ABS(透过率/吸光度测定模式);
②Ratio(比例测定模式);
③Concentration(浓度测定模式或标准曲线模式);
2)按数字[1]键进入%T/ABS(透过率/吸光度测定)子菜单,选中对应的数字键来设定测定条件:①NUMWL(设定测试波长的数目,较多可设定6个不同波长);
②WLSetting(设定测试波长具体数值)③DataMode(选择测定吸光度或透光率),设定完毕后点击[Enter]键确定,所有项目设定完毕后按数字[0]键确定,等待仪器调整至准备状态,此时屏幕上出现AUTOZERO,将盛有空白溶液的比色皿放入样品室中,按[Start/Stop]键进行零点的自动调整,自动调零完成后,将样品置于光路中,再按[Start/Stop]键进行测量,仪器的显示屏自动给出对应波长的数值。
3)按数字[3]键进入③Concentration(浓度测定模式或标准曲线模式),选中对应的数字来设定条件(波长数目,波长数值,标准溶液数目及浓度),设定完毕后点击[Enter]键确定,所有项目设定完毕后按数字[0]键确定,等待仪器调整至准备状态,此时屏幕上出现AUTOZERO,将盛有空白溶液的比色皿放入样品室中,按[Start/Stop]键进行零点的自动调整,自动调零完成后,将标准溶液置于光路中,按照浓度从低到高顺序依次按[Start/Stop]键进行测量,测量完毕后仪器将自动给出标准曲线,标准曲线下方有三项供选择:①Process(更改标准曲线的坐标和观察浓度回归曲线的数据);②Measure(直接进入样品的测量);③Print(打印浓度回归曲线谱图和数据),选中对应的数字就可执行相应的功能。
4)如果希望返回上一级菜单,按[CLEARRETURN]键返回,返回主菜单直接按[MAINMENU]键。
2、WavelengthScan(波长扫描模式)
1)参数修改:按[MAINMENU]键,再按数字[2]键进入②WavelengthScan(波长扫描模式)子菜单下,选中对应的数字来选择所需修改的内容,修改扫描的起始波长,测量模式,图谱坐标的上下限,扫描速度等等。修改完毕按数字[0]键确定。
2)波长扫描:分别将两个比色皿装上空白溶液和样品溶液,放入比色槽中,按[Start/Stop]键进行谱图扫描(如想终止扫描再次按按[Start/Stop]键),待仪器自动进行基线校正,提示拉入样品自动测试,测试完毕后有扫描图谱出现,下方有相应的数据处理选项①Process②Baseline③Print;
3)数据处理:按数字[1]键进入①Process(数据处理),可以读峰谷值,修改坐标,显示所有数据,求一阶倒数等等功能。
3、TimeScan(时间曲线扫描)
同上(二)操作。
4、System(系统校正)
一般不做。
5、Datadisplay(光度直接测量模式)
同上(二)操作。
三、关机
将比色皿中的溶液倒尽,然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净;关电源将干燥剂放入样品室内,盖上防尘罩,做好使用登记,得到管理人员认可方可离开。
双光束紫外-可见分光光度计(以下简称仪器),系指从单色器发出的单色光经光束开关(斩光器)分成为样品和参比两条光束结构的仪器。
它能消除光源不稳和放大器增益变化的影响,并能自动记录和扫描物质的吸收光谱图。
仪器在开机后通常会做一些自检,但仍应按本规程进行检定。仪器的波长范围包括195~800nm,狭缝为0.1~5nm可调。
工作原理
紫外可见分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析方法。
这种分子吸收光谱产生于价电子能级的跃迁,它广泛用于无机和有机物质的定性和定量分析。
朗伯一一比耳定律(Lambet-Beer)是光吸收的基本定律,俗称光吸收定律,是分光光度法定量分析的依据和基础。
当入射光波长一定时,溶液的吸光度是吸光物质的浓度c及吸收介质厚度(吸收光程)的函数。
其常用表达式如下(式中ε为系数):
A=ε·c·l
紫外见分光光度计是基于紫外可见分光光度法的原理工作的常规分析仪器。根据光路设计的不同,紫外可见分光光度计可以分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。
制定依据
本规程主要参照国家计量检定规程《JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计》、《JJF1641-2017紫外可见分光光度计型式评价大纲》及《中国药典》2015年版四部指导通则“0401紫外-可见分光光度法”拟定。
项目及技术要求
波长准确度≤±1.0nm(紫外光区),≤±2.0nm(500nm附近);
波长重复性≤0.5nm。
基线平直度≤0.01吸光度。
0%线噪声≤0.1%,100%线噪声≤0.5%.
吸光度准确度应符合规定。
杂散光<0.8%。
光谱带宽≤标示带宽±20%。
吸收池配对误差≤0.5%。
检测结果处理
自检结果全部符合技术要求者,即为合格,可以使用。若检测结果不符合规定,应重新调试仪器再进行自检,符合规定后方可使用。
分光光度法是根据被测物质分子对紫外、可见波段范围单色辐射的吸收或反射强度来进行物质的定性、定量或结构分析的一种方法。
可见分光光度计的维护:
1、保护光源:光源灯有一定的寿命,仪器不工作时不要开灯,若工作间歇时间短,可不关灯。 一旦停机,则要待灯冷却后再重新启动,并预热15min。
灯泡发黑或亮度明显减弱或不稳定时,就及时更换。 经经紫外光照射后形成结痕可用无水乙醇去除。
2、保证合适的工作环境温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。
不适宜的温度和湿度可引起机械部件的锈蚀,使金属镜面的光洁度下降,引起仪器机械部分的误差或性能下降;造成光栅、反射镜、聚焦镜等光学部件的铝膜锈蚀,产生光能不足、杂散光、噪声等;甚至使仪器停止工作,从而影响仪器寿命。维护保养时应定期加以校正温度和湿度。
3、定期清洁,保障环境和仪器内卫生条件,防尘。
仪器使用一定时间后,内部会积累一定量的尘埃,建议由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作,同时将各发热元件的散热器重新紧固,对光学盒的密封窗口进行清洁,必要时对光路进行校准,对机械部分进行清洁和必要的润滑,最后恢复原状,再进行一些必要的检测、调校和记录。
4、正确使用比色皿拿比色皿时,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
清洗比色皿时,先用水冲洗,再用蒸馏水洗净。若被比色皿被有机物沾污,可用盐酸-乙醇混合洗涤液(1:2)浸泡片刻,再用水冲洗。
每次做完实验应立即洗净比色皿。比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干,以保护透光面。
可见分光光度计是一种结构简洁、使用方便的单光束分光光度计,基于样品对单色光的选择吸收特性可用于对样品进行定性和定量分析。
广泛应用于医药卫生、临床检测、生物化学、石油化工、环保监测、食品生产和质量控制等部门作定性、定量分析,还可作为大、专院校和中学相关课程的教学演示和实验仪器。
下一篇:恒温水浴的操作使用及注意事项