想要色谱柱有更好的使用寿命那就必须这样做 色谱柱是如何工作的

　　想要色谱柱有更好的使用寿命 那就必须这样做 色谱柱主要特点：高纯度球形硅胶，高度统一的粒径分布，高超的化学键合技术，端基封尾处理技术，严格的生气工艺。 色谱柱的正确安装才能保证发挥其较佳的性能和延长使用寿命。正确的安装请参考以下步骤： 步骤1.检查气体过滤器、载气、进样垫和衬管等检查气体过滤器和进样垫，保证辅助气和检测器的用气畅通有效。如果以前做过较脏样品或活性较高的化合物，需要将进样口的衬管清洗或更换。 步骤2.将螺母和密封垫装在色谱柱上，并将色谱柱两端要小心切平 步骤3.将色谱柱连接于进样口上色谱柱在进样口中插入深度根据所使用的GC仪器不同而定。正确合适的插入能zui大可能地保证试验结果的重现性。通常来说，色谱柱的入口应保持在进样口的中下部，当进样针穿过隔垫完全插入进样口后如果针尖与色谱柱入口相差12cm，这就是较为理想的状态。具体的插入程度和方法参见所使用GC的随机手册避免用力弯曲挤压毛细管柱，并小心不要让标记牌等有锋利边缘的物品与毛细柱接触摩擦，以防柱身断裂受损。将色谱柱正确插入进样口后，用手把连接螺母拧上，拧紧后用手拧不动了用扳手再多拧几圈，保证安装的密封程度。因为不紧密的安装，不仅会引起装置的泄漏，而且有可能对色谱柱造成损坏。 步骤4.接通载气当色谱柱与进样口接好后，通载气，将色谱柱的出口端插入装有己烷的样品瓶中，正常情况下，我们可以看见瓶中稳定持续的气泡。如果没有气泡，就要重新检查一下载气装置和流量控制器等是否正确设置，并检查一下整个气路有无泄漏。等所有问题解决后，将色谱柱出口从瓶中取出，保证柱端口无溶剂残留，再进行下一步的安装。 步骤5.将色谱柱连接于检测器上其安装和所需注意的事项与色谱柱与进样口连接大致相同。如果在应用中系统所使用的是ECD或NPD等，那么在老化色谱柱时，应该将柱子与检测器断开，这样检测器可能会更快达到稳定。 步骤6.确定载气流量，再对色谱柱的安装进行检查注意如果不通入载气就对色谱柱进行加热，会快速且性的损坏色谱柱。 步骤7.色谱柱的老化安装和系统检漏工作完成后，就可以对色谱柱进行老化了。

在液相色谱的使用中，我们会发现很多实验室会面临色谱柱频繁损坏的问题。所以，这次我们就来讨论一下色谱柱的预防措施吧。

影响色谱柱使用的因素

1.流动相pH

不同基质的填料具有不同的pH适用范围。其实，在工作过程中大多数的颗粒物堵塞导致的色谱柱背压升高问题是体现在柱头堵塞。当流动相pH超出碱性范围时，会加速硅胶的溶解而释放出絮状物堵塞柱子;当流动相pH值超出酸性范围时，键合相易发生水解而流失，这两种反应均是不可逆反应，特别是在温度较高(>40℃)的环境下，会使柱效迅速降低而报废。

而样品的易吸附机制也可能会和柱前端的硅胶表面游离的硅醇基发生作用导致色谱柱背压升高。但是这种情况在较低的PH系统中会有所改善，因为较低的PH系统会降低硅胶表面的硅醇基发生解离。

 

2.流动相变质

当前使用为广泛的是硅基键合相填料，当以水溶液作为流动相或流动相中含有一定浓度的磷酸盐缓冲液时，水溶液中或缓冲盐溶液中会滋生出一些细菌或霉菌，从而堵塞固定相颗粒间的空隙。特别是对于多元自动比例混合的液相色谱仪来说,水相或缓冲盐相独立存贮，因存放时间较长而容易发生此类问题。

3. 流动相纯度

目前，广泛使用的填料颗粒粒径范围在3～10μm,孔径在6～10nm,色谱柱在使用中会有大量的流动相通过,如流动相含有微量不溶性杂质颗粒,则很容易在柱头部位被截留,久而久之,造成色谱柱机械性堵塞,引起柱压升高而无法正常使用。

4.其它因素

影响色谱柱寿命的因素很多，除流动相和样品因素外，还有其它一些外在因素，如，柱压的影响，温度的影响，色谱柱的正确冲洗，色谱柱的正确安装等。

 

预防措施

 

为了降低色谱柱的损伤问题，大家在使用色谱柱时可以做一些预防。例如：

1在液相系统中加入在线过滤器

在线过滤器的内部颗粒空隙一般是0.5微米，对于UHPLC会选择0.2微米空隙的在线过滤器。这个空隙尺寸和柱头的过滤筛板尺寸接近或者略小。

所以，在线过滤器能够有效的阻隔来自样品、泵头密封垫、自动进样器的转子密封垫的颗粒物，以防止柱头过滤筛板的堵塞。

 

2在柱子前端使用保护柱

保护柱有很多种，通用型、一体式、卡套式，但是它其实是一个和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。

因为它具有和分析柱相同的内部填料，所以保护柱不仅可以阻隔颗粒物，还可以阻隔易吸附的样品基质组分。

 

3对样品进行净化处理

有一些液相的分析方法没有明确标注样品的净化，但希望大家在做分析时都能够考虑样品的净化，常用的方案是对样品进行过滤。

 

 

色谱柱损坏的简单消除方法

 

由于化学损坏多发于色谱柱的前端，因此把色谱柱的前端修整或切割掉1/2-1 米通常可以消除所有色谱方面的故障。在更为严重的情况下，可能需要切割掉5 米或更长的一段。使用保护柱或保留间隙柱会将对色谱柱的损坏降至小，但是，需要经常修整保护柱。酸或碱常常会破坏熔融石英管线的脱活表面，从而引起活性化合物的峰形变坏。

保存

     实验结束后，色谱柱的合理保存也是保护色谱柱的关键，同时也是影响色谱柱使用寿命的关键。

1、短期保存

     应保存在接近常用的流动相条件下，并且移除系统中的缓冲盐、酸等。

2、长期保存

     将色谱柱按照说明书保存在对应的溶剂中，并且将色谱柱从系统中去下，两头用堵头密封。

1.安装拆卸色谱柱必须在常温下。 2.填充柱有卡套密封和垫片密封，卡套分三种，金属卡套，塑料卡套，石墨卡套，安装时不易拧的太紧。垫片式密封每次按装色谱柱都要换新的垫片。 3.色谱柱两头是否用玻璃棉塞好。防止玻璃棉和填料被载气吹到检测器中。 4. 毛细管色谱柱 安装插入的长度要根据仪器的说明书而定，不同的色谱汽化室结构不同，所以插进的长度也不同。需要说明的如果你用 毛细管色谱柱 采用不分流，汽化室采用填充柱接口这时与汽化室连接毛细管不能探进太多，略超出卡套即可。氢气和空气的比例对FID检测器的影响氢气和空气的比例应1：10，当氢气比例过大时FID检测器的灵敏度急剧下降，在使用色谱时别的条件不变的情况下，灵敏度下降要检查一下氢气和空气流速。氢气和空气有一种气体不足点火时发出“砰”的一声，随后就灭火，一般当你点火电着就灭，再点还着随后又灭是氢气量不足。
 

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