阿司匹林栓－阿司匹林－高效液相色谱法
应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定阿司匹林栓中阿司匹林的含量。
本方法适用于阿司匹林栓。
方法原理： 供试品在40~50℃水浴上微温熔融，在不断搅拌下冷却至室温，精密称取适量，置50mL量瓶中，精密加内标溶液与乙醇适量，在40~50℃水浴中充分振摇使供试品溶解，用乙醇稀释至刻度，置冰浴中冷却1小时，取出迅速滤过，精密量取续滤液用乙醇稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长280nm处检测阿司匹林的峰面积，计算出其含量。
试剂： 1. 乙醇
2. 甲醇
3. 0.1%二乙胺水溶液
4. 冰醋酸
仪器设备： 1. 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按阿司匹林峰计算应不低于2000。
1.3 紫外吸收检测器
2. 色谱条件
2.1 流动相：甲醇 0.1%二乙胺水溶液 冰醋酸=40 60 4，用磷酸调节pH值至3.3~3.4
2.2 检测波长：280nm
2.3 柱温：室温
试样制备： 1. 内标溶液的制备
取咖啡因，加乙醇制成每1mL中含4mg的溶液，即得内标溶液。
2. 对照品溶液的制备
精密称取阿司匹林对照品约0.15g，置50mL量瓶中，精密加内标溶液5mL，用乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2mL，置50mL量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。
3. 供试品溶液的制备
取供试品5粒，精密称定，置小烧杯中，在40~50℃水浴上微温熔融，在不断搅拌下冷却至室温，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.15g），置50mL量瓶中，精密加内标溶液5mL与乙醇适量，在40~50℃水浴中充分振摇使供试品溶解，用乙醇稀释至刻度，置冰浴中冷却1小时，取出迅速滤过，精密量取续滤液2mL，置50mL量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤： 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长280nm处测定阿司匹林（C9H8O4）的峰面积，计算出其含量。
参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，二部，p.286。
高效液相色谱仪（HPLC）现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样，在食品分析中，无论是残留分析还是成分分析，HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样，你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据，首先你要保养好它，使它处于一个良好的待机状态，这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获得理想的结果。 流动相脱气对于避免HPLC系统出问题，顺利得到一个理想的数据是一个很有效的措施。HPLC系统内是不能够有气泡存在的。HPLC泵在输送液体时要产生很大的压力，由于气体的压缩比与液体相比大的多，因而当气泡存在时，你将观察到瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大，液相泵将不能输送任何溶剂，而且如果压力低于预先设定的压力低限，泵将停止工作。有些泵设计可以很好地排除气泡，而也有一些泵设计当气泡存在时将停止运转。 常用的脱气方法有如下几种： 1、吹氦脱气法。 利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性，在0.1MPa压力下，以约60 mL/min流速通入流动相储液容器中10～15min，可以很有效地从流动相中排除溶解的空气，能排除接近80%的氧气。采用一个高效分布式喷射流装置，一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。这意味着1L氦气通过1L流动相就可完成排气这个工作。这种脱气方法虽然好，但我们国内氦气价格较高，很少有实验室采用此方法。 2、加热回流法。 此法的脱气效果较好。在操作时要注意冷凝塔的冷却效率，否则溶剂会丢失，混合流动相的比例会有变化。 3、抽真空脱气法。 此法可使用真空泵，降压至0.05～0.07MPa即可除去溶解的气体。但是由于真空脱气会使混合溶剂组成发生变化，从而影响到实验的重现性，因此多用于单溶剂体系的简单分析。 4、超声波脱气法。 将欲脱气的流动相置于超声波清洗器中，用超声波震荡10～20min。此法的脱气效果最差。 5、在线脱气法。 现在商品的HPLC仪器，均可配在线脱气机。在线脱气使用简单，低故障，有效。建议购买仪器时一定要购买，有的公司是作为选购件，所以与仪器公司谈配置时应与公司确认。
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液相色谱柱是实验室一种常用的色谱配件，也是液相色谱仪的必不可缺的一部分，那么，我们在做样品分析的时候，如果色谱柱出现柱子柱流失怎么办呢？下面为大家讲讲。
首先明白液相色谱柱柱流失是不可避免的。柱流失程度与什么因素有关?
1、柱流失程度与固定相种类和色谱柱规格有关，一般固定相的量越多，柱流失则相对较高。
2、柱流失与柱温以及载气中氧气的浓度有关。高温下，固定相的分解会加快，因此，高温时的流失会比低温时高。氧气是许多固定相分解的催化剂，特别是在高温时段，强调载气的纯度和液相色谱柱安装的气密性，一方面就是出于氧气会加剧柱流失的考虑。
3、此外，液相色谱柱随着使用次数和时间的增加，固定相的稳定性最终也会发生不可逆的变化，导致柱流失的增加。液相色谱柱柱流失严重情况多出现在进样的溶液类型，5MS的柱子是非极性的，当使用极性溶剂时，就会发生反应而导致大量柱流失，在做测试时一定要留意样品的性质。
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