实验中所使用的玻璃仪器及塑料器皿清洁与否,直接影响实验结果,往往由于器皿的不清洁或被污染而导致较大的实验误差,甚至会出现相反的实验结果。因此,实验用器皿洗涤清洁工作是十分重要的基本操作,是做好实验的前提及实验成败的关键之一。
一、玻璃器皿的清洗
1.初用玻璃器皿的洗涤
新购置的玻璃器皿表面常附着有游离的碱性物质,可先用去垢剂(0.5%水溶液)或肥皂水洗刷,再用自来水洗净。然后浸泡1%~2%盐酸溶液中过夜(不少于4h),再用自来水充分冲洗,最后再用蒸馏水漂洗2~3次,置于100~130℃烘箱内烘干或倒置晾干备用。
2.使用过的玻璃器皿的洗涤
① 一般玻璃器皿洗涤(如试管、烧杯、锥形瓶等)
先将器皿中的残渣清除去,用自来水冲洗至无污物,如有油脂,先用吸水纸将其擦去,然后置于洗衣粉溶液中浸泡10~15min,再用大小合适的毛刷反复刷洗,用自来水充洗干净,然后用蒸馏水漂洗2~3次。热的肥皂水去污能力更强,可有效地洗去器皿上的油污。洗衣粉与去污粉较难冲洗干净而常在器壁上附有一层微小粒子,故要用水多次冲洗,或用稀盐酸摇洗一次,再用水冲洗,最后置于烘箱(或微波炉)中烘干或倒置在清洁处晾干备用。凡洗净的玻璃器皿,其壁上不沾有水珠,否则表示尚未洗净,应按上述方法重新洗涤。
② 移液管、吸量管、滴定管、量筒等的洗涤
移液管每次使用后须及时用流水冲洗或浸泡于冷水中,特别是吸取粘滞性较大的液体(全血、血浆、血清等)后应立即用流水充分冲洗,以免物质干涸和堵塞移液管。通常使用过的移液管经自来水冲洗后,可浸泡于0.5%去垢剂溶液中或铬酸洗液中过夜(不少于4h),然后分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗,晾干备用。量具玻璃器皿不能烘烤,只能晾干或风干。
③ 玻璃比色皿和石英比色皿的清洗
比色皿使用后应立即用蒸馏水充分冲洗,倒置在清洁处晾干备用。所有比色皿均可用0.5%去垢剂溶液洗涤,必须用脱脂棉小心地清洗,然后用大量蒸馏水充分漂洗干净,倒置晾干。但不能用氢氧化钾的乙醇溶液及其他强碱洗涤液清洗比色皿,因这样导致比色皿的严重腐蚀。
④ 载玻片和盖玻片
载玻片和盖玻片不能用力洗,清水冲洗,铬酸洗液浸泡2~4h或稀铬酸洗液煮沸0.5h,取出清水冲洗,贮藏在95%乙醇中。
⑤ 高灵敏度分析及检测用器皿的洗涤
对于进行高灵敏度分析及检测实验所用的器皿,除用上述方法清洗外,还需采用其它特殊洗涤方法彻底清除污染物。一般是把玻璃器皿浸泡于铬酸洗液中4~6h或过夜,再分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗,烘干或晾干备用。通过洗液处理的玻璃器皿,在其器壁上的有机污物会被完全清除。如有必要还可用浓硝酸洗涤及处理玻璃器皿,最后用双蒸馏水充分漂洗,这样将使器壁上污染的金属离子得以清除。
⑥ 有毒器皿的洗涤
具有传染性样品的容器,如病毒、传染病患者的血清等沾污的容器,应先进行消毒处理后再进行清洗。盛过毒物的容器,特别是剧毒药品和放射性同位素物质的容器,必须经过专门处理,确知没有残余毒物或放射性存在方可进行清洗。装有固体培养基的器皿应先将其刮去,然后洗涤。
二、塑料器皿的洗涤
一般用合成洗涤剂洗涤,冲洗时应反复多次,最后蒸馏水冲洗。
新购买的塑料器皿一般先用自来水清洗后,应以8mol·L-1尿素溶液(pH1.0)洗涤,再用蒸馏水漂洗。随后用1mol·L-1 KOH溶液洗涤,再用蒸馏水漂洗。然后用10-3mol·L-1 EDTA溶液洗涤,以除去污染的金属离子,最后用蒸馏水充分漂洗,倒置晾干备用。
经过上述洗涤步骤处理的器皿,每次使用后可以0.5%去垢剂溶液洗涤,再分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗,晾干后即可使用。如果必要也可按碱→尿素→EDTA洗涤顺序处理,以除去器皿上的污染物。
多数塑料器皿可在烘箱中干燥,但温度不宜过高,硝酸纤维制品离心管不能置烘箱中干燥,因硝酸纤维是一种易爆物。
三、金属用品的洗涤
一般不宜用各种洗涤剂洗涤,需要清洗时,一般用乙醇擦洗,并保持干燥。
四、洗涤液的种类和配制方法
1.洗衣粉
洗衣粉是碱性去污剂,易溶于水,去油脂力较强,常用于三角瓶、果酱瓶、烧杯以及金属器械的洗涤,由于价格低廉,使用方便,是洗涤液。
2.铬酸洗液
又称重铬酸钾(或钠)——浓硫酸洗涤液,简称洗液或清洁液,铬酸洗液是强氧化剂,去污力很强,但对油脂类物质无效,不能用于金属器皿的洗涤,广泛用于移液管、容量瓶、滴定管等口径较小的玻璃器皿以及载玻片、盖玻片等物品的洗涤。
配制方法:重铬酸钾:水:硫酸=1:2:20的配方去污效果建议。用重铬酸钾(K₂Cr₂O₇)25g溶解在50ml 60℃热水中,然后向溶液中缓慢加入浓硫酸(H₂SO₄)450ml,边加入边搅拌,待全部溶解后,冷却并贮存于带玻璃塞的试剂瓶中备用。当洗液用久后变为黑绿色,即说明洗液无氧化洗涤能力。
新配制的铬酸洗液呈棕红色,有均匀的红色小结晶。铬酸洗液可多次使用,但使用前必须将待洗涤的玻璃器皿先用水冲洗多次,除去肥皂液、去污粉或各种废液。若仪器上有凡士林时,应先用软纸擦去,然后再用乙醇或乙醚擦净。否则会使洗涤液迅速失效。例如肥皂水、有机溶剂(乙醇、甲醛等)及少量油污物均会使铬酸洗液变绿,降低洗涤能力。
3.浓盐酸(工业用)
常用于洗去水垢或某些无机盐沉淀。
4.1%~2%盐酸溶液
用于洗去新购置的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质。
5.浓硝酸(HNO₃)
常用于洗涤除去金属离子。
6.硫酸及发烟硝酸(98%的硝酸)混合物
适用于特别油污、肮脏的玻璃器皿。
7.1∶1的硝酸水溶液
用于洗涤二氧化碳测定仪器及微量滴定管。
8.乙醇与浓硝酸混合液
比较适合于洗净滴定管,在滴定管中加入3ml乙醇,然后沿管壁慢慢加入4ml浓硝酸(相对密度1.4),盖住滴定管管口。利用所产生的氧化氮洗净滴定管。
9.8mol·L-1尿素洗涤液(pH1.0)
适用于洗涤盛蛋白质溶液及血样的器皿。(新购买的塑料器皿)
10.1mol·L-1 KOH溶液
新购买的塑料器皿。水溶液加热(可煮沸)使用,其去油效果较好。
11.100~150g/L氢氧化钠(钾)溶液
除去玻璃器皿上的碳质残渣。
12.5%草酸溶液
称取5~10g草酸溶于100ml水中,加入2ml浓盐酸,可洗去高锰酸钾的痕迹。
13.10-3mol·L-1 EDTA溶液
用于除去塑料容器内壁污染的金属离子。
14.10g/L EDTA的20g/L氢氧化钠溶液
用此溶液浸泡洗净的玻璃器皿,能除去容器表面吸附的一些微量金属离子。
15.5%~10%磷酸三钠溶液
可用于洗涤油污物。为除去玻璃器皿上的碳质残渣,可将器皿在此溶液里浸泡几分钟,然后用刷子除去残渣。
16.高锰酸钾的碱性溶液
取44g高锰酸钾溶于少量水中,再缓慢加入100ml 10%的氢氧化钠(NaOH)溶液中,混匀,贮存在橡皮塞玻璃瓶中。适于洗涤带油污及有机物沾污的玻璃器皿,但余留的二氧化锰沉淀物需用盐酸或盐酸加过氧化氢洗去。属于强碱性洗涤液,对玻璃器皿的侵蚀性很强,清除容器内壁污垢,洗涤时间不宜过长。使用时应小心谨慎。
17.氢氧化钠(钾)的乙醇溶液
把约1L 95%的乙醇加到含120g氢氧化钠(钾)的120ml水溶液中,就成为一种去污能力很强的洗涤剂,适用于清除容器内壁污垢。属于强碱性洗涤液,对玻璃仪器的侵蚀性很强,故洗涤时间不宜过长,使用时应小心慎重。
18.盐酸乙醇溶液
1份盐酸和2份乙醇的混合物,用于洗涤有机试剂染色的器皿。
19.碱性乙醇溶液
将25g氢氧化钾溶于少量水中,再用乙醇稀释至1L。此溶液适用于洗涤玻璃器皿上的油污。
20.5%~10%乙二铵四乙酸二钠溶液
加热煮沸,利用乙二铵四乙酸(EDTA)和金属离子的强配位效应,可除去玻璃器皿内壁钙镁盐类的白色沉淀物和不易溶解的重金属盐类。
21.碘—碘化钾洗液
1g碘和2g碘化钾溶于水中,用水稀释至100ml。洗涤用过硝酸银滴定液后留下的黑褐色沾污物,也可用于擦洗沾过硝酸银的白瓷水槽。
22.有机溶剂
如丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗脱油脂、脂溶性染料等污痕。二甲苯可洗脱油漆类污垢。
23.洗消液
检验致癌性化学物质的器皿,为了防止对人体的侵害,在洗刷之前应使用对这些致癌性物质有破坏分解作用的洗消液进行浸泡,然后再进行洗涤。
在食品检验中经常使用的洗消液有:1%或5%次氯酸钠(NaClO) 溶液、20% HNO₃和2% KMnO₄溶液。
1%或5% NaOcl溶液:用1% NaOcl溶液对污染的玻璃仪器浸泡半天或用5% NaOcl溶液浸泡片刻后,即可达到破坏黄曲霉毒素的作用。配法:取漂白粉100克,加水500ml,搅拌均匀,另将工业用Na₂CO₃80克溶于温水500ml中,再将两液混合,搅拌,澄清后过滤,此滤液含NaOcl为2.5%;若用漂粉精配制,则Na₂CO₃的重量应加倍。
20% HNO₃溶液和2% KMnO₄溶液对苯并(a)芘有破坏作用,被苯并(a)芘污染的玻璃仪器可用20% HNO₃浸泡24小时,取出后用自来水冲去残存酸液,再进行洗涤。被苯并(a)芘污染的乳胶手套及微量注射器等可用2% KMnO₄溶液浸泡2小时后,再进行洗涤。
五、注意事项
1.铬酸洗液氧化性强,使用时必须注意安全,保护皮肤。
第一次用少量水冲洗刚浸洗过的仪器后的废液主要成分是硫酸铬(Cr2(SO4)3·nH2O)、硫酸和水等。为避免造成环境污染,应集中储存在废液瓶中,首先在废液中加入硫酸亚铁,使残留有毒的六价铬还原成无毒的三价铬,再加入废碱液或石灰使三价铬转化为Cr(OH)₃沉淀,埋于地下。废水不要倒在水池里和下水道里,长久会腐蚀水池和下水道,应倒在废液缸中,缸满后倒在垃圾里。
洗液倒入要洗涤的仪器中,应使仪器周壁全浸洗后稍停一会再倒回洗液瓶,铬酸洗液氧化反应时间长,可反复使用,直至洗液呈黑褐色为止。如无备用的k2cr2o7加入,可加一些工业用的KMnO₄,可起部分恢复作用。
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