高效液相色谱仪是分析检测工作中常用的仪器之一。它可以同时开展样品中多种成分的检测,也可以针对某种成分进行单独检测。高效液相色谱仪使用的检测器主要有紫外检测器、二极管阵列检测器、示差检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器、质谱检测器,广泛应用在各个行业的分析工作之中。
一、高效液相色谱仪的使用注意事项
1、使用人在使用前一定要确认当前系统是处于哪种色谱状态;
2、要对流动相系统、进样器等进行排气操作,避免有气泡干扰;正式进样前,要将流动相、色谱柱、检测器等设置好,并进行预平衡,待仪器处于稳定的初始条件下,再开始进样检测;
3、待检测的样品根据仪器的要求一定要保证澄清透明,可选择高速离心或者过滤膜等方式进行净化;
4、进样的顺序建议按照试剂空白、标准系列溶液、试剂空白、样品空白、质控样品、待测样品、试剂空白的顺序进行,以便确认仪器中是否存在干扰待测成分的物质、质控效果等,若待测样品较多,建议在待测样品中间插入质控样品,以确保检测质量;
5、采用梯度洗脱条件检测时,一个样品检测完成之后,一定要确保柱压等条件恢复到初始状态再进行下一个样品的检测;
6、所有检测工作完成后,要对液相系统进行溶剂替换,反相系统建议用甲醇或乙腈保存,包括进样器和液相管路部分,如果使用缓冲盐作为流动相,要用大比例水相将盐冲出,再用纯有机相替换。
二、高效液相色谱仪的维护
1、检测机构应安排专人定期对仪器进行期间核查,核查的频率和项目可依据该仪器使用频率和检测项目制定,以保证仪器使用期间状态正常。
2、根据仪器易出故障情况的不同,对仪器重点部分进行定期维护,如流动相系统(如流路入口端过滤器、储液瓶)、进样系统(如进样针、进样针针座、进样器)、废液(废液定期处理、放挥发)等。
3、高效液相色谱仪就如同我们的身体,各部分相互配合,共同开展工作。在实际工作中,要像爱护我们的身体一样,去爱护仪器。密切关注仪器的细微变化,如泵运转的声音、等度条件下柱压的变化、同一条件下相同检测成分保留时间变化情况等,通过这些情况来判断仪器的状态是否发生变化,是否有维护或维修的必要,只有这样,仪器才会保持良好的状态,保证运行通畅。
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