紫外分析仪是利用紫外光源发出并滤去其中残留可见光后的紫外辐射,均匀辐照待分析的荧光样品的仪器。按照观测荧光方式不同,紫外分析仪分为反射式和透射式。反射式紫外分析仪常用波长为254nm和365nm,适用于各种不透明材料的荧光检测与分析;透射式紫外分析仪常用280nm~320nm中的辐射,适用于DNA、RNA电泳凝胶等透明样品的观察与拍摄。紫外分析仪由紫外光源、滤光片、操作台组成。
一、峰值波长示值误差
首先开启光谱仪,然后打开紫外分析仪的被测光源。待光源稳定后,把光谱仪的探测器置于光源投射方向进行测试,获得的相对光谱功率分布最大值对应的波长为该光源的峰值波长,重复测量3次,按以下公式得出峰值波长的示值误差。
式中:
∆λp,一紫外分析仪光源峰值波长示值误差,nm;
λo一紫外分析仪光源峰值波长标称值,nm;
λp一紫外分析仪光源峰值波长3次测量结果的平均值,nm。
二、紫外辐射照度
反射式紫外分析仪,放置在暗室中或用黑布遮去周围亮光(样品台带有暗箱除外)。调节紫外分析仪的光源发光面与样品台平行。接通电源,打开任意其中一光源稳定10min后,使用紫外辐射照度计,将探测器受光面正对光源发光面,并根据使用情况放在距离发光面几何中心下方250px~500px处并记录下实际距离。如光源发光面为固定距离,则把探头放在样品台中间位置,同时屏莜杂散光。
透射式紫外分析仪,放置在暗室中或用黑布遮去周围亮光(样品台带有暗箱除外)。使用紫外辐射照度计,将探测器放置在光源平面紫外滤光片的中心位置,探头受光面垂直朝下正对光源。
测量时人员须带上紫外线防护装备,每种光源重复测量3次紫外辐射,取平均值为该光源的紫外辐射照度值。
式中:
Ei一第i次测量的紫外辐射照度值,i=1,2,3;μW/cm2;
E一3次测量的紫外辐射照度平均值,μW/cm2。