TSKgel SW系列色谱柱维修保养

TSKgel SW系列色谱柱主要用于水相高效凝胶过滤色谱(GFC)。该类色谱柱的设计适用于各类水溶性物质，如蛋白质、酶以及核酸等的分析或制备。我们同时提供不锈钢色谱柱和玻璃色谱柱。特别是玻璃色谱柱，不但是生物相容型的，而且还配有一个拥有塑料末端接头的高精度玻璃管。

一、故障排除

使用TSKgel色谱柱时，按照以下说明可以避免大部分问题的发生。但是，有些问题(如由色谱柱寿命、吸附物质、产生的气泡、填料干燥或溶剂凝固等引发的问题)一旦发生就无法清除，因此使用色谱柱时应非常小心。

1、末端接头堵塞

如果压降增加或流速降低，应该从色谱柱逆向进液清洗末端接头。如果无法清除堵塞，则必须替换新的接头。

2、替换末端接头

准备一个新的末端接头，并从色谱柱上取下旧的末端接头。注意不要碰到填料表面。如果发现柱头发生塌陷，该处空间应按照12.3节的说明使用TSKtop-off gel填充。然后，请参照4.4节清除进口侧的空气。

3、柱头塌陷

压力上升过快、使用的流速大于设定的限值、脉动式进液、频繁替换溶剂等都会引发柱头塌陷。柱头塌陷会剧烈降低理论塔板数(N)(这类色谱柱的塔板数一般只有普通色谱柱的70%以下)，而且比较容易导致拖尾峰。发生此类现象时，请从色谱柱的进口侧取下末端接头，如果发现空隙，请用TSKtop-off gel填充。此时，特别是玻璃色谱柱，必须使用扭矩扳手以2.9 N・m的力道拧紧末端接头。这样，应该可以恢复到更高的分离度。如果由于某些特殊原因，使用该方法无法恢复分离度，请替换为新的色谱柱。

4、色谱柱杂质吸附严重

长时间重复使用色谱柱后，洗脱时间有时会发生剧烈变化。此时，选择其他溶剂清洗色谱柱比较有效。以下为几种典型的清洗方法。

①　离子性吸附(清除离子性杂质)

通过提高清洗液的盐浓度(通常0.5 mol/L)进行过柱清洗。

使用酸性水溶液，如磷酸盐缓冲液(pH 2.5)过柱清洗。

②　疏水性吸附(清除疏水性杂质)

在清洗液中添加甲醇、乙腈(10-20%)等水溶性有机溶剂进行过柱清洗。本法请注意缓冲液中盐的析出。

③　氢键吸附(清除难溶的蛋白质或其他物质)

在清洗液中添加6-8 mol/L的尿素或0.2-0.3%的中性表面活性剂(Triton、Tween、Brij等)后进行过柱清洗。但需要注意尿素及表面活性剂的柱中残留。

注：色谱柱的清洗方法非常重要，而且经常替换溶剂可能会老化色谱柱。因此，应仅在必要的情况下清洗柱子。一般来说，清洗时间可选择为过柱5-10个柱体积便可。在吸附成分其吸附力极强时，即使进行过清洗，柱性能也有可能得不到恢复。另外，请充分考虑清洗液的pH值，以避免损坏色谱柱。

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