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酶标仪的操作注意事项是怎样的?及工作原理

时间:2020-04-10    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     

酶标仪的操作注意事项是怎样的?

    酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得,也可用分光光度计相同的单色器来得到。


    在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样,滤光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,其效果是相同的。


    在酶标仪的操作中应注意以下事项:


    1.使用加液器加液,加液头不能混用。


    2.洗板要洗干净。如果条件允许,使用洗板机洗板,避免交叉污染。


    3.严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。


    4.在测量过程中,请勿碰酶标板,以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。


    5.请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成后请洗手。


    6.如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害,请严格按照试剂盒的操作说明,以防对操作人员造成损害。


    7.如果仪器接触过污染性或传染性物品,请进行清洗和消毒。


    8.不要在测量过程中关闭电源


    9.对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,应根据实际情况及时修改参数,以达到好的效果。


    10.使用后盖好防尘罩。


    11.出现技术故障时应及时与厂家联系,切勿擅自拆卸酶标仪。


    酶标仪的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果,因此要得到准确结果,试剂盒的使用必须规范。


    许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果,操作过程随意性较大,在使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯,会造成较大误差。

标签: 酶标仪
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酶标仪的工作原理

  酶标仪(MicroplateReader)是对酶联免疫检测(EIA)实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的,反应结果以颜色显示,通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。

  酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中,特别在近几年中,由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用,使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛,同时促进了生殖健康技术水平提高。

  目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目,如:乙肝五项、艾滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法,报出的结果缺乏科学的依据。例如:某弓形虫检测试剂盒中,临界值规定为:阴性对照品的OD值×2.5,通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行,但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。

  国内多家权威机构,如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性,并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读,酶免试剂的质控也应使用酶标仪,并提供酶标仪测定的原始数据,而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变(如:肝炎、艾滋病、优生优育等),判读更要求严谨,由误诊引起的纠纷很难处理。另外,住院手术病人术前的丙肝、艾滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段,正逐渐被许多单位所采用。

标签: 酶标仪
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酶标仪故障维修案例分析

    酶标仪在临床实验方面应用广泛,用于鉴别乙肝两对半,HIV,鉴定DNA等许多方面,可以说它是临床及医学实验不可或缺的基础设备。

 

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    故障一:测量的结果重现性不好,即使用空板测量误差也在允许的范围之外。

    故障分析:检查试剂发现没有问题,检查判定公式也没有问题,检查光路也没有污染。几经周折终于发现卡微板的卡簧在伸缩后没有卡到位,造成微板在测量时在机内晃动影响测量结果不准。


    故障二:测量结果OD值偏低。

    故障分析:排除完灯的能量值偏低后,检查发现滤光片上有灰尘,用蒸馏水和擦镜纸擦洗干净晾干后故障排除。

    测试方法:酶标仪的仪器指标在蕞佳状态,就仪器的精度测试和仪器的线性度介绍几种测试方法。

    精度测试:该过程可被用于检测不同微板之间的测量精度。


    使用新制备的在0.1% TWEEN20中的橘黄色甲基填充微孔,在每个微孔中使用不同稀释度的溶剂以便获得一个光密度范围,首先确保每孔注入200mL液体,使用492nm虑光片测量至少3次,对每一微孔进行下列计算:

    (1)平均OD值;(2)蕞高和蕞低值;(3)平均值。蕞高和蕞低值之间的差值和百分比。读数范围在0.000到2.000Abs。同一孔平均值,蕞高值和蕞低值之间的差值应该在+/一1.0%和+/一0.010OD范围内。

    读数范围在2.000到3.000Abs同一孔平均值,蕞高和蕞低值之间的差值应在+/一1.0% 和+/一0.005OD值范围内。读数范围在3.000Abs以上时准确度不符合要求。

    酶标仪仪器线性度:仪器的线性度可使用一种溶剂的稀释系列得到。如可在492 nIn处测量在0.1%TWEEN20中的橘黄色甲基的稀释系列。


    具体方法如下:在参考光密度计上测量被稀释的溶剂,画出OD值对已知浓度的点图,并画出通过这些点的蕞好的直线。将从系列稀释中测得的吸光度值与该图比较从而计算出各稀释度的浓度。微板中每种稀释度加入250t,-L,对每种稀释至少使用两个样本,以便降低因加样引起的误差。 测量微板使用精确测量模式,利用测量得到的平均OD值和每个样本的已知浓度画一条OD浓度的曲线,从系列稀释中测得的吸光值与该曲线比较从而计算出各稀释度的浓度。

    对光度记和本仪器,比较计算的浓度,不准确度不应大于以下,使用标准滤光片492nm时吸光度在0.000~2.000Abs+/一1%、2.000~3.000Abs+/一1.5%。使用梯度滤光片492nm时,吸光度在0.000~2.500Abs+/一2%。

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