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液相色谱仪维护保养(下)及解决方案

时间:2020-05-10    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
  【中国仪器网 维护保养】
 
  高压恒流泵维护:
 
  1、溶剂过滤头。吸液过滤头,或称沉子,主要作用是过滤流动相中可能存在的颗粒性杂质。长时间使用后,杂质有可能阻塞溶剂过滤头上的过滤板孔隙;或长时间使用缓冲液,过滤头表面容易产生一层膜,阻碍流动相正常通过。严重时,即使是已超声过的溶剂,泵吸液时也会有气泡在四氟输液管里产生,因此应经常对过滤头进行清洗。清洗溶剂可以选择乙醇或者30%稀硝酸溶液,正相系统需注意滤头的烘干处理。
 
  2、单向阀。单向阀的作用是确保液体向一个方向流动,是高压恒流泵稳定输液的保证。日常使用过程中,可以通过观察压力的情况,初步判断流量是否正常。如果系统已经平衡一段时间,压力应该是稳定的。但如果压力存在波动,则表明流量不稳定;如果无压力,则表明无流量。这两种情况大多是因为单向阀里混入了气泡或杂质。混入气泡的情况,应把放空阀打开,按冲洗键将里面的气泡排出。单向阀混入杂质的情况,须对其进行清洗。清洗溶剂可以选择乙醇,安装时注意标记环的方向。
 
  检测器的维护:
 
  1.紫外检测器
 
  使用紫外检测器时要注意环境因素带来的干扰由于静电的作用,检测器在使用时易于从周围环境中吸附尘埃,覆盖在光学元件上的尘埃能降低光的传播效率,加大了光的散射,对检测有影响。故紫外检测器周围的环境要清洁,经常打扫,保持干净。强紫外照射还会使一些光学材料涂层降解,慢慢增加噪声,故检测器应避免阳光直射。长时间不用检测器时,应定期冲洗流路赶走池内产生的气泡。
 
  2.荧光检测器的使用与维护
 
  荧光检测器的灵敏度比紫外检测器高,特别适用于痕量组分检测。日常使用中应注意以下几点:
 
  2.1不能使用抑制或吸收荧光的溶剂作流动相仁。
 
  2.2溶剂的极性和溶液的温度对荧光强度有明显的影响。增大溶剂的极性,导致荧光增强。通常荧光物质溶液的荧光效率和荧光强度,随着温度的升高而降低,液相色谱中,荧光检测器通常在室温下操作,可以保证足够的灵敏度。
 
  2.3当样品浓度过高时,荧光物质分子易与溶剂分子或其它溶质分子相互作用,引起溶液的荧光强度降低,荧光强度不再与浓度呈线性关系,即荧光淬灭效应。因此,在进行荧光检测时,试样要配成低于10-6g/mL浓度的溶液,要使用不含荧光物质的溶剂。
 

液相色谱仪管路阻塞的解决办法

  在使用高效液相的过程中,管路的堵塞是常发生的故障之一。下文为您介绍液相色谱管路堵塞的原因与解决方法。

  液相色谱管路阻塞的原因:

  1、没有很好过滤流动相;

  2、样品中有微粒;

  3、泵或进样器垫圈产生碎片;

  4、预柱、护柱和分析柱中漏出填料;

  5,毛刺和锉屑进入;

  6、流动相中的结晶盐;

  7、微生物

  8、系统中进入了其它颗粒性物质。

  液相色谱管路阻塞解决方法:

  系统中管路阻塞的现象很少见,常见的是烧结过滤片(玻璃砂芯)阻塞。用烧结过滤器或过滤片(孔径2-10um)能去掉阻塞管路的微粒(如0、25mm管径)。用系统分段法检查阻塞的管路,从后向前分别松开接头检查,找到阻塞管路后,应立即拆下来疏导或换新。

  如果是非刚性物质阻塞,如生物样品中的生化物质(蛋白质)、微生物等,可用极细的金属丝导通,也可以在火头上烧一烧,使有机物炭化,而后再导通。

  如果是刚性物质阻塞,要导通则十分困难,采用反冲的办法有时能成功。就是将管子调头用泵冲洗。操作时要注意保护眼睛和裸露的皮肤,因阻塞物会以很高的速度冲出来。无法导通的管路要换上同样规格的管子。如果换上新管后又被阻塞,则应该停机检查上面提到的引起阻塞的几种原因。

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液相色谱柱的日常维护保养

  液相色谱柱是液相色谱仪的核心部件,且极易因使用不当而损坏,不互溶的流动相,不正确的保存方式及清洗都会降低色谱柱的使用寿命。因此液相色谱柱的日常维护保养极为重要。

  1.流动方向已明确标明在色谱柱上,请正确安装色谱柱,除非您想冲洗色谱柱入口的污染物,否则,请不要反接色谱柱。

  2.反相柱做完实验后,若使用流动相中含有缓冲溶液盐,请在使用完毕后用不含缓冲剂的80%水-有机溶剂流动相冲洗色谱柱,后换成100%有机溶剂贮存。

  3.正相色谱柱正相使用保存在纯正己烷中,反相使用时需要将柱内贮存液用异丙醇置换。

  4.流动相与样品在使用前可以用0.45um的微孔滤膜或用预处理柱(SPE固相萃取小柱)进行预处理,并严格脱气。

  5.流动相pH需保持在2-8之间,请尽量不超过适用范围。

  6.柱温不要大于60℃。

  7.压力最高不超过30Mpa,建议在20Mpa以内使用。

  8.使用新鲜溶剂,防止细菌增长。


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