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高效液相色谱质谱仪日常维护计划及解决方案

时间:2020-05-10    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
  正确的维护和保养高效液相色谱质谱仪,能够提高仪器使用寿命,使仪器稳定的工作得到稳定可靠的数据。
 
  液相色谱仪部分:
 
  1、
 
  流动相的制备要求:
 
  高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤;
 
  流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法。
 
  2、
 
  高压恒流泵的维护和保养
 
  1.高压恒流泵为整个色谱系统提供稳定均衡的流动相流速,保证系统的稳定运行和系统的重现性。高压输液泵由步进电机和柱塞等组成,高压力长时间的运行回逐渐磨损泵的内部结构。在升高流速的时候应梯度势升高,每次升高0.2mL/min当压力稳定时再升高,如此反复直到升高到所需流速。
 
  2.特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流动相通过吸滤头打出以判断其是否堵塞。若有堵塞情况可用异丙醇超声波清洗;清洗不成功则需要更换
 
  3.在仪器使用完了以后,要及时清晰管路冲洗泵,保证泵的良好运转环境,保证泵的正常使用寿命。
 
YL9900 液相色谱质谱仪 LC/MS
 
  三、
 
  色谱柱的维护和保养
 
  1.所使用的流动相均应为HPLC级或相当于该级别的,在配置过程中所有非HPLC级的试剂或溶液均经0.45um薄膜过滤。而且流动相使用前都经过超声仪超声脱气后才使用。
 
  2.所使用的水必须是经过蒸馏纯化后再经过0.45um水膜过滤后使用,所有试液均新用新配。并且在进样的样品都必须经过0.45um薄膜针筒过滤后进样。
 
  3.所使用到的最大流速为1.0mL/min,所以流速提升过程应是梯度提升,不存在流速的突升突降。
 
  4.仪器检测完,均使用水:甲醇=90:10清洗了管路和色谱柱1小时以上,使用水:甲醇=90:10保存管路和色谱柱40分钟以上。
 
  四、
 
  工作站的维护
 
  出现死机可重启计算机;不正常运行时,首先可更换电脑测试其硬件故障;或在本机上重新插拔接口、重新安装软件。
 
  液相质谱仪质谱部分:
 
  七、死机处理的9个步骤
 
  1.Analyst软件中Hardware configure重新deactive,再active。
 
  2.用CTRL-ALT-DEL,Windows任务管理器结束任务,关掉Analyst软件,然后重新打开Analyst。
 
  3.关掉Analyst软件,Stop Service后重新打开Analyst软件。
 
  4.重新启动控制仪器的电脑,HPLC重新启动,再active。
 
  5.StopService后进入Scu21.exe中,clear GPIB Bus。
 
  6.StopService后进入Scu21.exe中,Reset System controller。
 
  7.同时按下电源旁边的两个按扭reset。
 
  8.重新开关仪器总电源。
 
  9.StopService后进入Scu21.exe中。
 
  ※说明:一步不行,再使用下一步,不一定7步都需要做完
 
  ------ 责任编辑:瑞利祥合--分析仪器采购顾问
 
  版权所有(瑞利祥合)转载请注明出处

液相色谱仪检测器阻塞的解决办法

  液相色谱仪检测器阻塞的现象有:系统压力增高,松开检测器进口的接头压力降至正常水平。检测器部分有三处易发生阻塞,即进口管路、流通池和出口管路。因组设造成压力显著增高,虽然用一般的净化方法去掉阻塞可能不奏效,但值得一试。如用注射器回抽池中的溶剂受到很大阻力,说明阻塞相当严重。若是检测仪器厂商标明池能耐高压,可用泵反冲,这样常可去掉阻塞压力,注意压力不要超过6MPa~7MPa。标准池一般耐压在3~5MPa左右,不可用此法。
  用以上方法试验不能成功疏通检测器通道阻塞时,可将流通池从检测器中拆下来,将进口管路卸下,用泵方向冲洗。然后再冲洗出口管路。如果进出口管路都是通畅的,那么就是流通池本身阻塞。
  进口管路是最易发生堵塞的地方,用小径的管路可以挡住进入检测器的微粒。但有下列情形者在进口处可发生堵塞:
  1、自己填装的柱在出口处留下填料微粒;
  2、修复柱时逆向反冲时间不够就接到检测器上;
  3、逆向反冲时原柱头密封性能不好,填料漏出。
  如果堵塞循环发生,应在柱和检测器之间装一个没有死体积的在线过滤器。拆下进口管路反接到泵上反冲,可以疏通堵塞。
  对一些顽固性阻塞而又不能从池上拆开的管路,可以从管路进口处切掉大约1~2cm长的管子。当然这是一种无可奈何的选择,因为每次操作后会使得管子变短,还涉及到换刃环接头等,还可能会因为切口不平整、密封不严等造成渗漏。
  若用以上方法都不能疏通疏通进口管路,应考虑更换新管子或请厂商修理。出口管路阻塞,也可参照上述方法进行处理。

标签: 液相色谱仪
液相色谱仪 液相色谱仪检测器阻塞的解决办法_液相色谱仪

高效液相色谱分析法与气相色谱法有哪些区别呢?

    高效液相色谱法与气相色谱法一样,都属于色谱法,具有选择性高、分离效率高、灵敏度高、分析速度快等特点。下面就两种色谱法的应用范围、仪器构造等不同点进行比较。

 

色谱.jpg

 

    一、气相与液相的概念

 

    气相

    气相色谱是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度)的微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配使原来只有微小的性质差异产生很大的效果而使不同组分得到分离。

 

    液相

    高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上引用了气相色谱的理论。在技术上,流动相改为高压输送;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而,使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时,柱后连有高灵敏度的检测器可对流出物进行连续检测。


    二、应用范围

 

    气相

    有着分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等特点。受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析,一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。

 

    液相

    高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此,不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于400以上)的有机物(些物质几乎占有机物总数的75%~80%)。原则上,都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计,在已知化合物中能用气相色谱分析的约占20%,而能用液相色谱分析的约占70~80%。


    三、气相仪器构造

    由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。


    1.柱箱:

    色谱柱是气相色谱仪的心脏,样品中的各个组份在色谱柱中经过反复多次分配后得到分离,从而达到分析的目的,柱箱的作用就是安装色谱柱。由于色谱柱的两端分别连接进样器和检测器,因此,进样器和检测器的下端(接头)均插入柱箱。柱箱能够安装各种填充柱和毛细管柱并且操作方便。色谱柱(样品)需要在一定的温度条件下工作,因此,采用微机对柱箱进行温度控制,并且由于设计合理,柱箱内的梯度很小。

 

    对于一些成份复杂、沸程较宽的样品,柱箱还可进行三阶程序升温控制。且程序设定后自动运行无需人工干预,降温时还能自动后开门排热。


    2.进样器:

    进样器的作用是将样品送入色谱柱。如果是液体样品,进样器还必须将其汽化。因此,采用微机对进样器进行温度控制。

 

    根据不同种类的色谱柱及不同的进样方式,共有五种进样器可供选择:

    填充柱进样器

    毛细管不分流进样器附件

    毛细管分流进样器附件

    毛细管分流/不分流进样器

    六通阀气体进样器


    3.检测器:

    检测器的作用是将样品的化学信号转化为物理信号(电信号)。

 

    检测器也需要在一定的温度条件下才能正常工作,因此,采用微机对检测器进行温度控制。

    根据各种样品的化学物理特性,共有五种检测器可供选择:

 

    氢火焰离子化检测器(FID);

    热导检测器(TCD);

    电子捕获检测器(ECD);

    氮磷检测器(NPD);

    火焰光度检测器(FPD);


    4.数据处理系统:

    该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。


    四、高效液相仪器构造

    高效液相色谱仪主要有:进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。


    1.进样系统

    一般采用:隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。


    2.输液系统

    该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47~4.4×107Pa流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、pH值。


    3.分离系统

    该系统包括:色谱柱、连接管和恒温器等。

 

    色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管)内径为2~5mm,由优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,柱内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成),固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(如,硅胶表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍(与气相色谱中固定相的制备一样)或者用化学法偶联各种基因(如,磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物。


    因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性,例如,在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。

 

    另外,固定相基质粒小,柱床极易达到均匀、致密状态,极易降低涡流扩散效应。基质粒度小、微孔浅,样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析,基质粒度小,塔板理论数N就越大。

 

    这也进一步证明基质粒度小,会提高分辨率的道理。再者,高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60℃通过改善传质速度,缩短分析时间,就可增加层析柱的效率。


    4.检测系统

    高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种:


    (1)紫外检测器

    该检测器适用于对紫外光(或可见光)有吸收性能样品的检测。

    其特点:使用面广(如,蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用);灵敏度高(检测下限为10-10g/mL);线性范围宽;对温度和流速变化不敏感;可检测梯度溶液洗脱的样品。


    (2)示差折光检测器

    凡具有与流动相折光率不同的样品组分,均可使用示差折光检测器检测;糖类化合物的检测使用此检测系统。这一系统通用性强、操作简单,但是,灵敏度低(检测下限为10-7g/mL),流动相的变化会引起折光率的变化;因此,它既不适用于痕量分析,也不适用于梯度洗脱样品的检测。


    (3)荧光检测器

    凡具有荧光的物质,在一定条件下,其发射光的荧光强度与物质的浓度成正比。因此,这一检测器只适用于具有荧光的有机化合物(如,多环芳烃、氨基酸、胺类、维生素和某些蛋白质等。。。)的测定,其灵敏度很高(检测下限为10-12~10-14g/mL)痕量分析和梯度洗脱作品的检测均可采用。


    5.数据处理系统

    该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。


    五、高效液相色谱与气相色谱法优点和不足分析

    只有20%样品可不经化学处理而能满意地用气相色谱分离,80%的有机化合物要用高效液相色谱分析。


    气相色谱中流动相是惰性的,它对组分没有作用力,仅起运载作用、而高效液相色谱的流动相不仅起运载作用,而且流动相对组分有一定亲合力,可以通过改变流动相种类和组成提高分离的选择性;另外,可作流动相的化合物多,选择余地广。

 

    与气相色谱相比,高效液相色谱仪的另一个优点是:样品的回收比较容易,只要开口容器放在柱子末端,就可以很容易地将所分离的各组分收集。回收是定量的,可以用来提纯和制备具有足够纯度的单一物质。

 

    高效液相色谱不足的是,日前,检测器的灵敏度不及气相色谱。必须特别注意“柱外效应”对柱效率及色谱分离的影响。


    以上内容由捷配仪器仪表网小编为您整理提供,希望能帮到您,祝您工作学习愉快

标签: 高效液相色谱
高效液相色谱标签: 高效液相色谱分析法与气相色谱法有哪些区别呢?_高效液相色谱组合标题:

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