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半制备液相色谱仪的类别与应用 制备液相色谱解决方案

时间:2020-06-03    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     

    半制备液相色谱仪是全新的自动化制备液相色谱系统。采用与多数仪器不同的设计理念,更为注重仪器的耐用性,能适应长时间高负荷的检测工作,适用于高、中压力范围,快速、精确、高效。

 

    半制备液相色谱仪的分类介绍:

    1、按固定相和流动相的极性大小可分:正相半制备液相色谱仪和反相半制备液相色谱仪。

    2、按分离对象的属性可分:有机物半制备液相色谱仪和无机物半制备液相色谱仪。

    3、按产地可分:国产半制备液相色谱仪和进口半制备液相色谱仪。

    4、按分离规模可分:小型半制备液相色谱仪和大型半制备液相色谱仪。

    5、按梯度数目可分:两元梯度半制备液相色谱仪、三元梯度半制备液相色谱仪和四元梯度半制备液相色谱仪等。

    6、按用途可分:生物半制备液相色谱仪、制药半制备液相色谱仪、化工半制备液相色谱仪、食品半制备液相色谱仪、氨基酸半制备液相色谱仪和维生素半制备液相色谱仪等。

    半制备液相色谱仪主要用途:

    1、天然产物分离;

    2、有机合成产物分离纯化;

    3、精细化学品剖析;

    4、新药化合物筛选;

    5、HPLC样品前处理。

    制备液相色谱技术越来越广泛的应用于制药,化工和生物工程等领域中样品的分离和纯化。

    制备液相色谱中,有三个可以观察到的状态:柱压、检测器基线、谱图。通过观察和记录这三个状态可以监测仪器是否正常。若某个状态出现异常,故障排查和解决方案如下。

    1、柱压波动

    1)吸液管路进气泡

    ①溶剂不足,吸滤头吸入空气,添加溶剂并排气泡。

    ②吸滤头脏了或堵塞,用异丙醇(或5%稀硝酸)清洗。

    ③溶剂中有气泡(尤其两种以上溶剂混合),超声(或抽滤)脱气。

    2)泵流量不稳

    ①单向阀堵塞,大流速purge,若不能解决,则需拆下单向阀(异丙醇)超声清洗清洗或更换单向阀。

    ②柱塞密封圈磨损,更换密封圈。

    ③泵头污染,柱塞杆往复活动受阻,清洗泵头。

    3)柱床塌陷,维修或更换色谱柱

    4)流动相混合后吸放热导致温度变化,以致柱压波动,如乙腈和水混合吸热,甲醇和水混合放热。若影响实验结果,则增加柱温箱或流动相预混。

    2、柱压升高或超压。

    逐段排查堵塞的位置:

    1)先拆下色谱柱,接上两通运行,若是色谱柱堵塞:

    ①进样后样品析出,用合适的溶剂反冲色谱柱。

    ②缓冲盐析出,用大比例水相的流动相冲洗色谱柱。

    ③机械杂质堵塞筛板,异丙醇小流速反冲色谱柱。

    ④色谱柱污染严重,需维修或充填。

    2)混合器堵塞,维修或更换。

    3)六通阀堵塞,将泵液管路接到连接色谱柱的阀口处,将阀扳至load状态,用易溶样品的溶剂小流速冲洗。

    4)压力传感器故障,维修或更换。

    3、检测器基线波动

    1)基线有规律波动,且幅度较大,则可能有气泡持续进入流通池。排查气泡来源并用异丙醇冲洗检测器或色谱柱。

    2)基线小幅度规律波动,可能是检测器灯能量不足(能量下降后,低波长下灵敏度先下降。

    3)基线漂移。

    ①流动相在此检测波长下有吸收。更换流动相或改变波长。

    ②色谱柱或检测池污染。以异丙醇冲洗色谱柱或检测池,或将检测池中透镜玻片取出清洗。

    4、谱图重现性差

    1)检查方法设置,包括流速、梯度、波长。

    2)检查流动相配置是否有误,A、B两相是否放反。

    3)检查柱压与之前是否有差异,若有变化,则前面1和2进行排查。

    4)进样前色谱柱是否完全平衡好。

    5)样品溶解方法。

制备液相色谱故障排查及解决方案

  制备液相色谱中,有三个可以观察到的状态:柱压、检测器基线、谱图。通过观察和记录这三个状态可以监测仪器是否正常。若某个状态出现异常,故障排查和解决方案如下。

  1、柱压波动

  1)吸液管路进气泡

  ①溶剂不足,吸滤头吸入空气,添加溶剂并排气泡。

  ②吸滤头脏了或堵塞,用异丙醇(或5%稀硝酸)清洗。

  ③溶剂中有气泡(尤其两种以上溶剂混合),超声(或抽滤)脱气。

  2)泵流量不稳

  ①单向阀堵塞,大流速purge,若不能解决,则需拆下单向阀(异丙醇)超声清洗清洗或更换单向阀。

  ②柱塞密封圈磨损,更换密封圈。

  ③泵头污染,柱塞杆往复活动受阻,清洗泵头。

  3)柱床塌陷,维修或更换色谱柱

  4)流动相混合后吸放热导致温度变化,以致柱压波动,如乙腈和水混合吸热,甲醇和水混合放热。若影响实验结果,则增加柱温箱或流动相预混。

  2、柱压升高或超压。

  逐段排查堵塞的位置:

  1)先拆下色谱柱,接上两通运行,若是色谱柱堵塞:

  ①进样后样品析出,用合适的溶剂反冲色谱柱。

  ②缓冲盐析出,用大比例水相的流动相冲洗色谱柱。

  ③机械杂质堵塞筛板,异丙醇小流速反冲色谱柱。

  ④色谱柱污染严重,需维修或充填。

  2)混合器堵塞,维修或更换。

  3)六通阀堵塞,将泵液管路接到连接色谱柱的阀口处,将阀扳至load状态,用易溶样品的溶剂小流速冲洗。

  4)压力传感器故障,维修或更换。

  3、检测器基线波动

  1)基线有规律波动,且幅度较大,则可能有气泡持续进入流通池。排查气泡来源并用异丙醇冲洗检测器或色谱柱。

  2)基线小幅度规律波动,可能是检测器灯能量不足(能量下降后,低波长下灵敏度先下降。

  3)基线漂移。

  ①流动相在此检测波长下有吸收。更换流动相或改变波长。

  ②色谱柱或检测池污染。以异丙醇冲洗色谱柱或检测池,或将检测池中透镜玻片取出清洗。

  4、谱图重现性差

  1)检查方法设置,包括流速、梯度、波长。

  2)检查流动相配置是否有误,A、B两相是否放反。

  3)检查柱压与之前是否有差异,若有变化,则前面1和2进行排查。

  4)进样前色谱柱是否完全平衡好。

  5)样品溶解方法。

标签: 制备液相色谱
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