超微量紫外分光光度计是应用液体的表面张力特性,样品体积只需要1ul,在侦测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速,微量,高浓度,免石英管,免毛细管等耗材侦测吸收值的优点。
侦测时选择不同侦测模式,可以得到较快速的结果:
吸收光谱,230nm, 260nm, 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值),260/280 ratio,260/230 ratio及核酸浓度.
–200~850nm间所有波长的吸收值及光谱(以1mm光径吸收值呈现).
A280蛋白质定量法–280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值),260/280 ratio及蛋白质浓度.仅适用于纯化后的蛋白质,须具有已知的质量消光系数(mass extinction coefficient)方可计算.
超微量紫外分光光度计的特点
1、检测只需1 微升的样本,节省消耗品费用;
2、直接使用加样器将待检测样本加在检测的表面上,无需使用比色皿和毛细管;
3、测试多样品的时候不需要不停的更换比色皿,减少工作量;
4、样本无需进行稀释,即可进行快速、简便的检测;
5、配套软件具有开放式数据库,可自行添加标样数据,自定义计算公式;
6、样品检测范围广,只要有标样,可对所有有紫外吸收的样品进行微量检测。
超微量紫外可见分光光度计注意事项
1、该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2、使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,甲醛检测仪以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
超微量紫外分光光度计可提供200~850nm的全光谱侦测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度CCD array侦测器,侦测吸收值可高达300Abs(dsDNA浓度2~15000ng/ul),大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可侦测。
超微量紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理行业,紫外可见分光光度计都获得了日益广泛的应用。
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我们如何来评价一台紫外可见分光光度计的优劣呢? 首先,我们要来考察它的外观。然后,我们探讨一下会对仪器的使用有很大影响的几个重要指标:
1、 杂散光 它指不应该有光的地方有了光。它是光谱测量中误差的主要来源。这个值当然越小越好了。
2、 光度准确度 光度准确度指实际测量的光度读数值与真值之差。它是用户对仪器的直接要求,每个用户都必须重视。
3、 噪声 噪声也是仪器的重要指标之一。它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。
4 、光谱带宽 指从单色器射出的单色光谱线强度轮廓曲线的1/2高度处的谱带宽度。表征仪器的光谱分辨率。按照比耳定律,光谱带宽应该是越小越好的,但是如果仪器的光源能量弱,光学传感器的灵敏度低时,光谱带宽小了,也得不到理想的测量结果的。所以,选择和使用仪器时一定注意。
5、 稳定性 稳定性是使用者zui关注的指标之一。仪器的宗旨就是稳定可靠,不稳定更谈不上可靠了。
6、 噪声 噪声也是仪器的重要指标之一。它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。
7、 波长的准确度和重复性 仪器的每个值都是在一定的波长下测得的,如果所示的波长和实际波长偏差万里,那么测出的值和真值的吻合度从何谈起呢?可见这个指标的重要性。
总之,这几个指标都是相互独立又相互关联的,每个指标对仪器的使用都有很大影响。希望大家在选购紫外、可见分光光度计时,多做比较,多做判断,切实找到一个稳定可靠的好帮手。
我们选择时需要根据自己实验室的需要 ,主要考虑光学构造和光源、检测方法、样品类型和数据处理等因素。
1.光学构造
一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。1单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。
双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以zui小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。
2.样品类型
在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。
用小试管装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。
3.光源和检测方法
分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。
紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。
有的仪器可以选择 多种光源 :紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。
分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。
分光光度计通常使用光电倍增管和光敏二极管测量吸光值。
4.样品类型
在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。
用小试管装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。
5.数据管理
大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。
由此可见紫外、可见分光光度计是一种常规的实验室分析仪器。可广泛用于无机物、有机物的定性、定量分析中,在科研、制药、化工、环保、卫生、防疫等领域中发挥重要的作用。
紫外可见分光光度计引用新型技术,其功能强大,采用单色器技术,波长范围190-1100nm,是各种涉及水和废水分析领域的通用仪器,应用范围包括市政和工业废水,饮用水,加工过程用水,地表水,冷却水和锅炉补给水等。 1、单光束UV:最传统的紫外,单光源发射单光束,全程密闭,通过光栅,照射样品,最后由光电倍增管监测器检测。 缺点:测完空白再测试样品,全波段分析时间较长(一般2min)。 2、比例双光束UV:单光源单光束,全程密闭,通过光栅,加入棱镜,把光分为两束,分别照射样品与空白,再合并光,进入光电倍增管检测器,通过差减法计算结果。 好处:空白样品同时检测。 缺点:灵敏度下降,全波段分析时间较长。 3、双光束UV:单光源单光束,全程密闭,通过棱镜分出两道光,分别通过一光栅,分别进入各自的光点倍增管检测器。 好处:加强灵敏度,同时测量空白与样品。 缺点:全波段分析时间较长。 4、全波段UV:单光源单光束,样品与空白暴露在空气中,照射样品,开始进入密闭箱,通过光栅,进入DAD检测器。 好处:空白只需要检测一次,如果你愿意一辈子检测这一次都可以。检测样品不密闭,外界光线对其无影响,使用方便且精确。分析任何波段或全波段不到1s。 缺点:贵(25W)。
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