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金相显微镜照明对物体反光的区别 显微镜如何操作

时间:2020-06-29    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
【导读】金相显微镜常用的照明技术有以下几种: 1、直接照明:光直接射向物体,得到清楚的影像。当我们需要得到高对比高度物体的时候,这种类型的光很有效。但是当我们用它照在光亮或反射的物体上时,会引起镜面的反光

金相显微镜常用的照明技术有以下几种:

1、直接照明:光直接射向物体,得到清楚的影像。当我们需要得到高对比高度物体的时候,这种类型的光很有效。但是当我们用它照在光亮或反射的物体上时,会引起镜面的反光。

2、暗视场:光是按一个角度投射到物体表面,其结果是倾斜的散光进行到相机,在一个暗的背景或视场上创造了明亮的点。用这种照射方法,如果物体表面没有色差的话,通过视觉系统什么也看不到。这两种观察方法通常都是在金相显微镜中配备的。

3、背面照明:从物体背面射过来均匀视场的光,通过相机可以看到物体面的侧面轮廓。背面照明常于测量物体的尺寸和定物体方向。

4、散射照明:反射照明,提供一个无方向,像刺眼的阴影样柔和的光,这种光适合高反射物体。因这种照明的效果我们将这种光比作在阴天里平和,无方向的光。

5、同轴照明:同轴光的形成一垂直方向发射的均匀面光源,通过一片45度角的半透光反镜,使光源以垂直向下的方式照射物体表面。这种类型的光源对检测高反射的平面物体特别有帮助。

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   【仪器网 使用手册】暗视野显微镜又叫暗场显微镜,是一种通过观察样品受侧向光照射时所产生的散射光来分辨样品细节的特殊显微镜。
  
  使用方法
  
  1、使用研究用暗视野显微镜,或将普通光学显微镜上的聚光器取下,换上暗场聚光器。
  
  2、不论是使用干燥物镜还是油浸物镜,镜检时都应在聚光器的上透镜上加一大滴香柏油。
  
  3、将制作好的细菌悬滴标本片置于载物台上,上升聚光器至顶部使油与载玻片接触。
  
  4、放大光源。
  
  5、进行聚光器光轴调节及调焦。用10*物镜找到被检物像,关小聚光器虹彩光圈至可在视野中看到视场光阑的轮廓,再上下缓慢调整聚光器,这样会使视场光阑的像变得清晰,如视场光阑不在场中央,利用聚光器外侧 的两个调节钮进行调整,当亮光点调到场中央后,再将其开大,即可进行观察。

倒置荧光显微镜的适用

    倒置荧光显微镜是指与一般显微镜相比,其物镜、聚光镜和光源的位置都颠倒过来,由荧光附件与显微镜有机结合构成的显微镜。

    激发光从物镜向下落射到标本表面,被反射到物镜中并聚集在样品上,样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜,经双色束分离器使激发光和荧光分开而成像。

    物镜和聚光镜的工作距离很长,能直接对培养皿中的被检物体进行显微观察和研究。

    适用于土壤微生物培养实验,具有在培养瓶或培养皿内进行显微观察的特点,可以观察不经染色的透明活体。

    特别适用于对活体细胞和细胞离体培养等显微观察。

    高信噪比(S/N),能够捕获极弱荧光

    光学品质--对现代生命科学研究至关重要

    荧光观察的理想情况是采用最低量的激发光照射捕获高对比度的图像,由此将细胞受损及荧光衰减的机会降至最小。

    对UIS2系统的物镜进行精密的设计,使用微弱的激发光即可捕获明亮的荧光图像。光透过率进步的同时也提高了UIS2光学系统的信噪比。

    干涉镀膜荧光激发块的性能改进荧光激发块的干涉膜采用了新型镀膜技术,激发带宽(BP)以及荧光带宽(BA)比传统谱线缩短了6nm,使信噪比更进一步得到提高。

    荧光激发块采用硬镀膜技术,大大延长了激发块的使用寿命,提高了在潮湿环境中的使用性能。

    荧光蛋白专用高质量荧光激发块

    BX2系列HQ型荧光激发块转为适宜的波长是ECFP/EFP/EYFP/DsRed。高锐化镀膜以及高透过率(90%-95%)可有效地透过荧光蛋白所发射的荧光。

    这样,即使采用微弱的激发光仍可观察到明亮的图像,同时,防止荧光衰减,并将细胞受损的可能减至最小。

    减少杂散光的功能

    当在分光镜对激发光进行反射时,杂散光的微量透射就可造成噪声上升。

    荧光激发块经由其独特的光吸收涂层可吸收99%以上的杂散光,减少信号干扰,获得高质量图像。

    荧光成像用高数值孔径物镜

    BX2系列具有新研制的PLAPON60XO物镜的特点,提供了当今普通观察方法用物镜最高的数值孔径(N.A.:1.42),用于荧光成像,同时具有先进的通用特性。

    除了其突出的荧光信噪比之外,也可进行紫外激发,这在以前的普通显微镜是不能做到的。

    UPLSAPO100×O物镜在340nm处(紫外)仍然维持着高透过率。

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