使用分光光度计时需要注意的事项 如何挑选购买光度计

    紫外可见分光光度计可达到检测质量与成分的目的。在对不同的仪器进行分析时，紫外可见光光度计是常规的分析仪器之一，原理就是紫外可见光度法。

    紫外可见光光度计有很多的特点：

    如第一，由于选择性好而且灵敏度较高，维护管理很方便，所以在使用中更为常见；

    第二，它的结构较为简单，可以很方便地进行操作而且在成本上又不是非常贵。

    以光路设计为基础，对紫外可见分光光度计进行分类，可以依据光路设计分为三种类型：单光束分光光度计、双光束分光光度计以及双波长分光光度计。

    鉴于此，本文主要分析紫外可见分光光度计主要技术指标及其检定方法。

    1.紫外可见分光光度法工作原理以及相关应用

    紫外可见分光光度法的工作原理就是利用不同物质的分子在紫外可见光谱区上的辐射吸收的不同，利用分子的这一特性来进行有效地区分辨别。

    紫外可见分光光度法在物质的定性定量分析以及物质纯度分析物质结构分析等多种方面都有着广泛的应用，起着不可或缺的作用。

    例如：此种检测方法在食品行业中的运用，可以对食品的质量进行有效地安全监测。而对于生活质量方面来说，食品卫生及质量是较为重要的一点，只有确保食品不会出现安全问题，才能够有效地促进国民健康生活。

    现阶段，我国出现的食品安全问题有以下几种：食品造假；在食品添加对人体有害的添加剂；一些非法添加物的滥用；除了这些主要问题之外还存在食品残留农（兽）药、微生物或者重金属等有害物质的情况，以上情况都会造成食品出现质量安全问题，因此必须对食品进行安全分析、检测，确保食品不会出现质量安全问题。

    2.紫外可见分光光度计主要技术指标

    波长准确度及其检定方法

    波长的实际测定值和理论值相减，就是紫外可见分光光度计的波长的准确度。它在测试不同的仪器时，作用非常大，是非常关键的技术指标。

    在我国，计量检定工作，波长准确度是很重要的。检定紫外可见分光光度计的波长准确度有很多的方式，下面将通过两种方法进行寿命说明：汞灯和氖灯的利用。

    汞灯

    我国在对紫外分光光度计波长准确度进行检定时，很多的生产厂一般都广泛利用汞灯进行测试。具体的操作流程就是：

    将原光源拆下来，采用标准灯，对标准光源灯各条的特征谱线进行测试，波长准确度就是测量值和理论值做差。

    自利用汞灯进行测试的过程中，能量测量作为测量的方式，波段的范围设置在245-560nm范围之内，空气作为样品的参考系，光谱带的宽设置为2nm，再通过波长扫描。波长准确度就是汞灯的各特征波长的测量值和其相应的理论值之差。为了确保准确度，可以重复进行3次，波长准确度就选择3次的平均值。

    氖灯

    在对紫外可见分光光度计的波长准确度进行检测时，通常人们在选用标准灯时用氖灯。在仪器紫外区，由于氖灯的连续光谱优势，就会在紫外区作为光源。

    在可见区，由于光谱中波长为656.1nm和为486.0nm是很容易分离的，而且具有高的强度，谱线特征非常明显，所以对仪器波长准确度进行检定时可以利用谱线。在我国，对于仪器进行计量检定都会用波长准确度较为高的标准灯-氖灯。

    波长重复性及其检定方法

    多次测试波长之后数据符合程度，也就是多次测试波长的数据离散性就是波长的重复性(WavelengthRepeatability)。检定波长的重复性方法，操作简单。第一种方法，测试波长的准确度之后，测试三次取平均值，波长重复性就是通过和3次测试中最小值或者最大值做的差；第二种，测试波长的准确度，要经过3次测试，波长重复性就是最大值与最小值之差。

    光度准确度及其检定方法

    光度的实际测定值和理论值之差就是光度准确度(PhotoMtricAccuracy)。它俩之间的差越小，测量就会更准确，光度的准确度就会更高。一般，表示紫外可见分光光度计光度的准确度有以下两种方式：

    ①透射比误差或者透射比准确度（TransmittanceAccuracy)，表示用TA(或AT);②吸光度误差（AbsorbanceError)或者是吸光度准确度(Absorbd-nceAccuracy)，在表示用AA(或AA)时，要注意测量时具体的吸光度情况。

    3.紫外可见分光光度法的合理化运用

    溶液中物质含量的测定

    应用紫外可见分光光度计测定标准溶液和未知液的吸光度进而进行比较；也可先测出不同浓度标准液的吸光度，绘制标准曲线，在一定浓度范围内标准曲线为直线，然后测定出未知液吸光度，即可从标准曲线上查到其对应浓度。

    化合物的鉴定

    用不同波长的单色光分别通过某一浓度溶液，测定每一种单色光的吸光度，之后分别以波长和分光度作为横坐标和纵坐标，绘制得到吸收光谱曲线。

    不同食品有其特定的吸收光谱曲线，借此可以鉴定食品种类。紫外吸收光谱分析主要用于已知物质定量分析，测定化合物中含有微量的具有紫外吸收的杂质。

    反应动力学研宄

    借助于分光光度法可得出特定化学反应速度常数，借此从两个或两个以上温度条件下的速度数据得出反应活化能。

    络合物组成和稳定常数的测定金属离子可与有机物形成络合物且在紫外可见区有吸收，据此可利用分光光度法来研宄其组成。

    总之，紫外可见分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析，这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁。

    朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律，是分光光度法定量分析的依据和基础。紫外可见分光光度计在食品检验中应用广泛，主要包括定量、定性和结构分析以及反应动力学和溶液平衡研宄。

    红外分光光度计是目前石油化工、医药卫生等诸多行业进行物质结构分析的一个重要工具。

    红外分光光度计的基本原理：

    由光源发出的光，被分为能量均等对称的两束，一束为样品光通过样品，另一束为参考光作为基准。这两束光通过样品室进入光度计后，被扇形镜以一定的频率所调制，形成交变信号，然后两束光和为一束，并交替通过入射狭缝进入单色器中，经离轴抛物镜将光束平行地投射在光栅上，色散并通过出射狭缝之后，被滤光片滤除高级次光谱，再经椭球镜聚焦在探测器的接收面上。探测器将上述交变的信号转换为相应的电信号，经放大器进行电压放大后，转入A/D转换单位，计算机处理后得到从高波数到低波数的红外吸收光谱图。

    用户在使用红外分光光度计时需要注意：

    1、使用之前把厂家附带的使用说明书熟读一遍，以便能够对将其操作的具体流程以及注意事项有一个大致的了解。另外，在操作红外分光光度计之前还要注意对其整个仪器进行较为细致的检查，如果发现检查该光度计无任何问题时就可以放心的使用了，但如果是发现其仪器有问题则应该及时的与商家进行联系，切勿在不懂的情况下对其进行修理。

    2、使用时一定要注意按照开机、校正、检测样品、保存数据、取出样品、复位、关机等正确的步骤对其进行有序的操作，并且用户要轻轻的操作仪器，避免对其进行胡乱的拍打或剧烈撞击。另外，在使用的过程中一定要注意不能擅自对红外分光光度计进行调整，更不能拆卸其中的零件。

    3、在每次样品测定结束后要注意保证红外分光光度计设备干净整洁，尤其是对于不小心残留在仪器表面的液体要及时的清理干净，同时还要注意将其仪器的所在房间打扫干净。另外，不使用红外分光光度计一定要记得将其电源开关及时的关掉。

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