液相色谱中的过滤器
过滤器，一般在液相里面出现的地方有三个。最前面的在溶剂瓶中，接在溶剂管路的头上，一般是不锈钢烧结材料的，也有是高分子材料的。可以过滤掉溶剂中的杂质。溶剂一般应该是很干净的，有机相使用色谱纯溶剂，水是去离子水，都是经过了0.22微米滤膜过滤的。缓冲溶液应该经过滤膜过滤后再使用。夏天，容易长霉菌，应该经常注意清洗，换溶剂的时候可以用手摸一下，如果摸上去滑滑的，肯定是脏了，清水里面超声即可，不行再加点酸。第二个出现过滤器的地方是泵后两相混合的地方，一般是为了防止两相溶剂混合后有析出情况，是和混合器合在一起的，也是一个烧结的不锈钢筛板，也应该定期清洗的。第三个会出现过滤器的地方就是柱前了，通常接的是保护柱，其最主要的作用就是保护后面昂贵的色谱柱。原理一个是会过滤掉流动相中的颗粒物，再就是遇到对色谱柱有伤害的溶剂时，牺牲自己，保护后面的色谱柱，前提是保护柱与后面的色谱柱是同一种颗粒的，其实，个人认为，这种情况几户不会发生，即使发生了，短短的一段保护柱，能否保护后面的色谱柱也很难说。色谱柱最大的敌人，还是流动相中出现的小颗粒物，正式基于这种思路，现在的UPLC，为了最大限度的减少管路死体积，采取了在线过滤器，以烧结不锈钢筛板代替保护柱，同样可以有效的保护后面的色谱柱
一台品质优良的液相色谱系统应从以下几个方面考虑：
一．主要技术指标优异：
首先是如何看指标。液相色谱仪的指标很多，有泵的、检测器的、色谱柱等等。我们认为要看主要技术指标，根据国家标准，仪器的主要指标有噪音，漂移，最小检测浓度，定性定量重复性等。这些指标都要放在系统，回路里去看，去比较。就是需要把各单元装置都要联接好，如接好色谱柱，进样阀，并且要通上流动相。因为您在分析中也都是联接好以后才可以进行分析的，而不是单单用个检测器或是泵的。
然后在这个基础上，我们再去比较这些主要指标。
1．噪音
是指由仪器的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动。噪音的大小直接关系到仪器的检测灵敏度，噪音越大，检测的灵敏度就越低。对于检测低含量的样品就要求仪器的噪音越小越好，否则噪音过大将会导致基线不稳，甚至影响分析结果。
2．最小检测浓度（最小检测限）
是反映仪器灵敏度的重要参数。CL=2×Nd×C/H（CL ：最小检测浓度 Nd:噪音 C：样品浓度最小检测浓度 H：样品峰高）由上式可见，最小检测浓度是和噪音成正比的，噪音越大，最小检测浓度就越大，灵敏度就越低。某些厂家回避了这个指标，说明他们不愿在最小检测浓度的基础上去比较噪音。
3．漂移
是指仪器稳定后一段时间内基线漂离原点的距离，通常用来衡量仪器稳定快慢。高品质的仪器能在较短的时间内达到稳定，从而在一定程度上提高了分析效率。
4．定性定量重复性
主要是考核仪器稳定性的指标，这对于分析样品来说是非常重要的。好的仪器其稳定性应该是十分优秀的，这就要求多次进样保留时间及含量的一致性，这样做出来的结果才能使人信服。
有的朋友会认为这些指标好像都是检测器的。对的，但是就前面所说条件是要放在整个回路和系统里去看去比较。例如：泵的脉动会直接影响噪音指标，泵的流量准确度、精确度指标，以及密封性不好也会影响相关指标。所以要系统地看指标。例如：某些公司在公布的指标中，噪音和漂移指标写的条件是空池或有的干脆不写。这个指标只考核了UV检测器光学和电气的特性，与实际情况相差甚远，并没有考验泵的压力脉动，液流回路的阻尼和UV检测器流通池的性能。所以我们认为从以上的主要指标中可以反应出仪器的一些真实水平。
二．操作方便：
操作方便性无论是对新手还是成熟的用户都是很重要的。操作越简单，有利于提高分析效率，也为以后分析方法的拓展提供有力的帮助。上海伍丰科学仪器有限公司的WS-100工作站软件实现了真正的智能化操作。它摒弃了以往工作站软件只能起到数据处理的理念，率先在国内推出了集控制与后处理于一身的软件，在操作使用上给用户带来了极大的方便。
三．系统的，整体开发
这里指的是仪器的整体开发，是一个完整的系统。目前市场上有这个现象，说我的泵是进口的，或者是检测器怎么好，用了什么很多的进口件组装等等。其实这是个误区。液相色谱是个复杂的系统，不是整体开发的，各项指标之间、软件和硬件、硬件和硬件等都不匹配，整体水平不会高到哪里去，而且在售后服务方面对用户也是不负责任的。
整体开发的主要优点有：各项技术指标统一、仪器各单元的通信协调、能够建立一个整体的数字化评价系统、体现了企业的科技及开发实力。
国外知名的仪器生产厂家的产品也是整体开发的，所以能够保证仪器的整体水平。
四．稳定可靠，故障率低
从以上各方面比较，LC-100智能液相色谱系统完全符合一台优秀仪器的所有特点，代表了目前国产液相色谱的真正水平。
液相色谱具有分离效率高、分析速度快和应用范围广等特点,特别适合于高沸 点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分离分析。目前液相色谱已成为化学、生化、医学、工业、农业、环保、商检和法检等学科领域中重要的分离技 术,是分析化学家和生物化学家手中用于解决他们面临的各种实际分析和分离课题必不可少的工具之一。虽然在检测分析中使用了昂贵的、性能优越的精密仪 器,但是由于在样品的前处理,标准溶液的制备,样品液的测定,分析中的污染,仪器常见故障等等问题上的不注意,而引起大的系统误差,使整个测定分析失败。 现就液相色谱分析的应用中样品预处理注意的几个环节,作简要分析,以达到更好的检测效果。 下一篇：冷热冲击试验箱技术参数
1 样品预处理方法
样品预处理应 包括进样前的一切操作。除了称重、溶解、稀释等步骤外,样品需要: ①过滤; ②萃取; ③衍生化(柱前衍生) ; ④液相色谱(低压柱层析) 。这些操作可以是手工进行或实行自动化操作。样品预处理的目的是除去干扰物、增加检测器灵敏度(富集) 、保护色谱柱等。样品预处理同时也是为了避免色谱分离故障,其中样品萃取是关键的一步,要从大量的干扰物中萃取出微量组分难度极大。
有些样品经预 处理后还不能作进样分析,需进行衍生化处理,使一些无紫外吸收或无荧光的组分,经过衍生化后能用紫外和荧光检测器检测,这样既提高了灵敏度,又改善了分离 度(质量变化) 。样品预处理的同时也会带来一些问题,如样品损失、样品被污染、衍生化反映不完全或多种反应物生成等。衍生反应常会影响试验的度,或者在整个样品预处 理过程中带来误差。
用于液相色谱分析的样品溶液必须均匀而无颗粒,有颗粒会损坏进样器并阻塞柱头。处理好的样品在准备上柱前应对准光线摇 动,检查样品溶液中有无颗粒。只要看到颗粒、混浊或乳化,就应过滤一下,过滤膜要能截留住015μm 以上的颗粒,样品过滤的过程中可能引起:样品被污染,因过滤吸附降低样品组分的含量,样品溶剂挥发引起误差。萃取的目的是从共溶的样品介质中分离出被分析 的组分,或者减少损坏柱的物质(如蛋白质等)和干扰物。一般采用有机溶剂萃取,要求萃取用的溶剂毒性低、挥发性好、杂质少、对待测样品有良好的溶解度且又 与水不相混溶。常用的有乙醚、醋酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、苯或者两种以上的混合溶剂。萃取后一般可直接进样,有时需要浓缩或吹干浓缩,再用定体积的液体或 流动相溶解进样。这样增加了样品浓度,提高了灵敏度,同时避免了溶剂峰对样品峰的干扰。在萃取是要考虑样品分子的溶解能力。除了脂溶性和水溶性组分外,还 有用脂溶性的组分制成水溶性的盐。萃取方法如下:
1.1 水溶性样品
(1) 酸性组分及生成的盐萃取方法:有机溶剂萃取杂质后调成酸性,再加有机溶剂萃取或进样,或在N2 流下吹干,用适当的溶剂解后进样。
(2) 碱性组分及生成的盐萃取方法:有机溶剂萃取杂质后调成碱性,再加有机溶剂萃取或进样,或在N2 流下吹干,用适当的溶剂溶解后进样。
(3) 中性组分萃取方法:有机溶剂萃取杂质后,直接用反相色谱法分析。
1.2 脂溶性组分萃取方法:有机溶剂萃取或进样,或在N2 流下吹干,用适当的溶剂溶解后进样。
2 分析中的污染
一般检测的环境、容器、试剂都是影响测定结果的因素。
2.1 环境污染
仪器室的有害气体、气溶液、灰尘等等都能造成污染,影响检测结果,这种污染很难校正。因此,仪器室与其他实验室应隔离,保持清洁,仪器室内应安装空调,注意防潮、防腐、防震、空气相对湿度应小于70 %为宜。
2.2 容器
实验室常用的器皿有玻璃类、瓷类、石英类、塑料类等,在进行分析时,应按照待则样品的要求来选则器皿,不管使用哪种器皿,容器的洗条清洁都是很重要的,也是取得好的检测结果的基本保证。
2.3 试剂
在液相色谱分析中,所选用的试剂必须是色谱纯、优级纯或分析纯,如果用含量有杂质的试剂,则会出现杂峰而影响测定结果。
3 标准溶液的配置
在配置标准溶液时,先要配置现定浓度的内标溶液,在标准溶液和样品溶液中好使用同一批次配制的内标溶液以减少误差。
(1) 配制标准溶液的物质应当是色谱纯的、性质稳定。
(2) 常用的标准溶液应存放在棕色溶液瓶中低温保存。
(3) 在配制维生素类标准品时,要放置在棕色容量瓶中或避光放置以免分解。
4 样品预处理过程中的主要故障与解决办法
(1) 色谱图中出现无关的峰,原因有可能是样品过滤器带来污染,解决方法如下:
①将过滤器浸泡在样品溶剂中并进样试验; ②改变过滤器类型; ③采用交替清洗技术。
(2) 一些或全部化合物的峰比预期的小,尤其是低浓度的样品,原因可能是样品过滤器表面吸附下降,解决方法如下:①改变过滤器类型; ②严格按相同条件处理所用样品; ③采用交替清洗技术。
(3) 回收率太低或差,原因可能是萃取不完全,解决方法如下:①增加萃取时间,使用热溶剂; ②修改清洗方法。
(4) 色谱峰变宽,柱寿命缩短,原因可能是样品带来的干扰与污染,应改进清洗方法。
(5) 精度差,原因可能是回收不完全,解决方法如下:①改进或替换衍生化、分离、萃取或其他条件; ②用自动化处理装置提高精度。
总之,对分析仪器来说,避免故障的主要的做法是正确的操作和调节,切忌盲目操作,对核心部位如离子室、微电流放大器等减少震动和碰撞,保证绝缘,并减少
各种系统误差要注意以上要点,但还要注意日常的仪器保养,色谱柱子的维护,仪器室保持清洁,这样才能使液相色谱处于佳工作状态,在分析中发挥其重要的作用。
449717568