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薄层色谱中边缘效应 薄层色谱如何做好保养

时间:2020-08-31    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     

    薄层板在展开中点样离边太近会出现边缘效应,这说什么原因呢?

      一般在薄层色谱中,薄层板两边展开剂跑得比较快,使得展开前沿形成一道弧线,称为边缘效应。边缘效应的产生是由于溶剂的挥发造成的.展开剂一般是由几个有机溶剂混合而成的,而在薄层板上一般是边缘上的展开剂较容易挥发,如果这几个有机溶剂的挥发性能差异比较大,那么就会造成薄层板上边缘和中间展开剂比例的差异而产生展开速度不一致的现象.如果展开前能充分饱和,那么展开过程中展开剂挥发就会减少,从而减小边缘效应.

  【仪器网 使用手册】薄层色谱又叫薄板层析,作为色谱法中的一种,它也是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱。薄层色谱兼备了柱色谱和纸色谱的优点,不仅适用于少量样品的分离;而且在制作薄层板时,又可用来精制样品,特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。此外薄层色谱法还可以用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。
 
  薄层色谱仪器特点:
 
  1、操作简单。
 
  2、占用空间小且性能稳定,经久耐用可免维护。
 
  3、圆形色谱板转速可调,适应不同分离要求。
 
  4、经过安全设计,使用安全性高。
 
  5、分离部件使用数控机床加工,同心性好,分辨率高。
 
  6、采用步进电机控制恒流泵,流量准确,调节便利。
 
  7、带有紫外全波长检测器,不需要进行紫外观察设备。
 
  8、带有全自动馏分收集器,进行无人化分离收集。
 
  9、带有样品净化过滤柱,防止出现不可逆吸附。
 
  注意事项:
 
  1、薄层经展开后用刮刀或捕集器将斑点的吸附剂捕集后,再用适当有机溶剂洗脱,然后用可见、紫外分光光度法、荧光分光光度法测定含量。
 
  2、样品斑点不能喷显色剂,以免影响不测定,斑点位置的确定方法。
 
  3、样品在紫外线下发射荧光的,可在紫外灯下观察斑点并用针划去斑点位置。
 
  4、用碘蒸汽显色,在组分处理出棕色斑点(碘吸附后会挥发)。
 
  5、用标准物对照,将标准点于边上一测显色时,盖住样品,定出斑点位置。

 1、简述

薄层色谱法,是将适宜的固定相涂布于玻璃板上,成一均匀薄层。等点样、展开后,与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比,用以进行药品的鉴别,杂质检查或含量测定的方法。

2、仪器与材料

2.1 玻板:除另有规定外,用5cm×20cm,10cm×20cm或20cm×20cm的规格,要求光滑,平整、洗净后的不附水珠,晾干。

2.2 固定相或载体:常用的有硅胶G、硅胶GF、硅胶H、硅胶HF254,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F254等。其颗粒大小,一般要求直径为10—40µm。薄层涂布,一般可分无粘合剂和含粘合剂两种;前者系将固定相直接涂布于玻璃板上,后者系在固定相中加入一定量的粘合剂,一般常用10—15%煅石膏(CaSO4·2H2O在140℃烘4小时),混匀后加水适量使用,或用羧甲基纤维素钠水溶液(0.5—0.7%)适量调成糊状,均匀涂布于玻璃板上。也有含一定展开液或缓冲液的薄层。

2.3 涂布器:应能使固定相或载体在玻璃板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。


2.4 点样器:常用具支架的微量注射器或定时毛细管,应能使点样位置正确集中。
 
2.5 展开室:应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸,并有严密盖子,除另有规定外,底部应平整光滑,应便于观察。

3 操作方法

3.1 薄层板制备:除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的泡后,倒入涂布器中,在玻璃板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为0.2—0.3mm),取下涂好薄层的玻璃板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30分钟。即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。

3.2 点样:除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边2.0cm,点样直径为2——4mm,点间距离约为1.5—2.0cm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

3.3 展开:展开室如需预先用展开剂饱和,可在室中加入足够量的展开剂,并在壁上贴二条与室一样高、宽的滤纸条,一端浸入展开剂中,密封室顶的盖,使系统平衡或按正文规定操作。将点好样品的薄层板放入展开室的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5—1.0cm(切勿将样点浸入展开剂中),密封室盖,等展开至规定距离(一般为10—15cm),取出薄层板,晾干,按各品种项下的规定检测。  

  如需用薄层扫描仪对色谱斑点作扫描检出,或直接在薄层上对色谱斑点作扫描定量,则可用薄层扫描法。薄层扫描的方法,除另有规定外,可根据各种薄层扫描仪的结构特点及使用说明,结合具体情况,选择吸收法或荧光法,用双波长或单波长扫描。由于影响薄层扫描结果的因素很多,故应在保证供试品的斑点在一定浓度范围内呈线性的情况下,将供试品与对照品在同一块薄层上展开后扫描,进行比较并计算定量,以减少误差。各种供试品,只有得到分离度和重现性好的薄层色谱,才能获得满意的结果。

4 注意事项

4.1 所用玻璃板应洗净不挂水珠,光滑平整。

4.2 铺板要均匀,厚度适宜,并于室温下晾干后在110℃活化30分钟,置于有干燥剂的干燥箱或干燥器中备用。

4.3 点样点一般为圆点,不能太大



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