紫外-可见光检测器是应用较为广泛泛的检测器,遵循的原理是Beer’s Law - BEER定律,即光能量P0 = 透过溶剂的光能量, P = 透过样品的光能量,光通量(透过率%) T=P/P0,吸光度 A = -log(T)=log(P0/P),吸光度 = 单位吸光度 ,即 A = abc,也就是说样品池(S)中的样品对光产生吸收有信号差,如是可变波长检测器还有分光系统(光栅) 同紫外检测器灵敏度有关的因素有信号强度(S) 和噪音(N)。
从BEER定律可看出信号强度(S)与样品的种类、样品浓度及进样的体积、检测池的长度、所使用的波长、检测器的时间常数有关。
噪音(N)与流动相、 所使用的波长灯的能量、检测器的时间常数以及非检测器因素如电噪音、泵脉动等有关。
紫外检测器的灵敏度与溶剂的影响、背景吸收、示差折光效应有关,不同种类溶剂有其截止波长,溶剂的质量好坏对其截止波长有影响,溶剂质量与含紫外吸收的杂质、溶解在其中的氧气、缓冲液溶质的紫外吸收等因素有关;背景吸收减少线性范围、许多溶剂会产生背景吸收,所以应该选择应用;示差折光效应会产生假的紫外吸收变化,定量误差导致光谱图不准确,梯度应用时有严重的基线漂移。
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