紫外分光光度计就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
紫外可见分光光度计详细操作流程及校准方法:
一、紫外可见分光光度计光度测量
在模式选择屏幕中选择<1.Photometric光度>选项，将显示参数配置屏幕;
用GOTOWL键设定测量波长;
按F2键设定进样控制;
按START/STOP键时，测量开始，显示测量屏幕;
如需做空白校正，应在测量前先设置空白样品，然后，按AUTO-ZERO键，将测量值置为OABS(100%);
二、紫外可见分光光度计校正
开机预热10分钟足矣;
放入黑块和标样(没有的自己配)，关闭盖子;
校0;
把灯光对着黑块，把透光度调0;
把灯光对标样，将吸光度调到100%;
三、参比溶液介绍
参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。通常，用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时，基体中，虽不含被测物质，但含有别的物质，这时必须保证其不影响测试。经常碰到的是试剂空白中含有被测物质，此时必须经过纯化将其除去。否则将影响测定结果。
四、紫外可见分光光度计使用注意事项
1.开机前应先预热15分钟，然后开机自检;
2.湿度要控制在75%左右，温度在5～30度之间;
3.仪器要稳压电源，接地要好。并且避免阳光直接照射;
5.常见故障及处理方法：
光门不能完全关闭：修复光门部件，使其完全关闭;
透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮;
仪器严重受潮：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂;以上为紫外可见分光光度计的具体操作方法及使用注意事项，希望能给予您帮助。
紫外可见分光光度计对于我们来说熟悉却也比较难读懂理解的。
天天有人提起他的名字却没多少人知道他的工作原理。
下面我们来浅谈一下。
光谱工作原理：
分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同；
因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线；
可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。
根据Lambert-Beer定律说明光的吸收与吸收层厚度成正比，比耳定律说明光的吸收与溶液浓度成正比；
如果同时考虑吸收层厚度和溶液浓度对光吸收率的影响，即得朗伯-比耳定律。
即A=εbc，(A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，b为液池厚度，c为溶液浓度)就可以对溶液进行定量分析。
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。
若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。
如果没有标样，也可以和现成的标准谱图对照进行比较。
这种方法要求仪器准确，精密度高，且测定条件要相同。
实验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同;
这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。
紫外可见分光光度计的工作环境：
1）分光光度计安放在干燥的房间内，使用温度为5-35℃，相对湿度不超过85%
2）仪器应放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈的震动或持续的震动
3）室内照明不宜太强，且应避免直射日光的照射
4）电扇不宜直接向仪器吹风，以防止光源灯因发光不稳定而影响仪器的正常使用
5）尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电气设备
6）避免在有硫化氢等腐蚀性气体的场所使用
紫外可见分光光度计引用新型技术，其功能强大，采用单色器技术，波长范围190-1100nm，是各种涉及水和废水分析领域的通用仪器，应用范围包括市政和工业废水，饮用水，加工过程用水，地表水，冷却水和锅炉补给水等。
紫外可见分光光度计应用：
在水和废水监测中的应用，对于一个水系的监测分析和综合评价，一般包括水相（溶液本身）、固相（悬浮物、底质）、生物相（水生生物）。在水质的常规监测中，紫外可见分光光度法占有较大的比重。由于水和废水的成分复杂多变，待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大，在具体分析时必须选择好分析方法。
在农产品和食品分析中可用于检测的组分或成分有蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷、汞等;
在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等；
在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。
紫外可见分光光度计维护要点：
一、温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀，使金属镜面的光洁度下降，引起仪器机械部分的误差或性能下降;造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀，产生光能不足、杂散光、噪声等，甚至仪器停止工作，从而影响仪器寿命。维护保养时应定期加以校正。应具备四季恒湿的仪器室，配置恒温设备，特别是地处南方地区的实验室。
二、环境中的尘埃和腐蚀性气体也会影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性，也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一。因此必须定期清洁，保障环境和仪器室内卫生条件，防尘等。
三、仪器使用一定周期后，内部会积累一定量的尘埃，建议由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作，同时将各发热元件的散热器重新紧固，对光学盒的密封窗口进行清洁，必要时对光路进行校准，对机械部分进行清洁和必要的润滑，最后，恢复原状，再进行一些必要的检测、调校与记录。
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